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IL-12、IFN-γ在急性移植物抗宿主病发病中作用的临床研究
急性移植物抗宿主病(aGVHD)是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的并发症之一,也是移植成功的主要障碍,因此,研究aGVHD 的发病机制是当今移植免疫的热点课题。本文采用双夹心酶联免疫吸附法研究allo-HSCT患者的外周血单个核细胞(PBMC)体外分泌的IL-12、IFN-γ浓度,以探明IL-12、IFN-γ在临床aGVHD发病中的作用。 30例异基因移植患者,年龄12~53岁(中位年龄为34岁),其中慢性粒细胞白血病19例,急性髓细胞白血病7例,急性淋巴细胞白血病4例。aGVHD的诊断主要依据临床表现,部分病例进行皮肤活检取得病理学依据。移植后发生aGVHD的患者症状出现48h尚未进行药物治疗时、未发生aGVHD的患者于移植后30d采集外周血10ml。分离外周血单个核细胞,细胞浓度调至2×105/ml,经LPS 30μg/ml刺激48h后收集上清检测IL-12浓度;经PHA 25μg/ml、 IL-2 200U/ml刺激48h后收集上清检测IFN-γ浓度(或-20℃保存)。IL-12、IFN-γ的检测采用双夹心ELISA法。
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慢性血液透析患者血清白介素-1β、白介素-6及肿瘤坏死因子-α变化及意义
血液透析(HD)通过血液、透析膜、透析液间相互反应可激活外周单个核细胞并影响到机体细胞因子产生,而细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素(IL-6)为炎性介质,在致热原反应中起一定作用,同时已知IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是导致肾小球基质增生、系膜细胞增殖、肾小球硬化及病变进展、肾功能恶化重要因素之一.此项研究采用酶免疫吸附(ELISA)双夹心抗体法测定30例健康对照组,30例慢性肾功能不全(CRF)未血液透析及60例CRF血液透析患者透析前后白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.并检测HD患者第一次血液透析时,单次透析前后上述指标改变,以探讨CRF患者细胞免疫功能的改变及透析对其影响.
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用间接血凝法与酶联免疫法对照检测肺部感染住院病人血清肺炎支原体抗体
肺炎支原体(MP)肺炎是小儿常见病、多发病.近年来发现它在其他各年龄组均有较高的发病率[1],并且发病率较前增加.目前,实验室诊断方法主要依靠血清学.我们采用间接血凝方法(IHA)和单克隆抗体双夹心免疫酶标法(ELISA)检测住院肺部感染住院患者血清中肺炎支原体IgM抗体,并将两种方法进行双盲平行对照.
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测定RF双夹心ELISA试剂的制备与检定
类风湿因子(RF)首先由Rose等于1948年在类风湿关节炎病人血清中发现,是一种抗变性IgG的自身抗体.以前人们一直认为是IgM型抗体,经过实验证实,RF不仅只有IgM,还有IgG、IgA、IgD、IgE等,类风湿因子不仅存在于类风湿关节炎病人中,它还在干燥综合症等其它病种病人中占很大的比例,类风湿因子对人类的健康有严重的危害作用.