首页 > 文献资料
-
问号钩端螺旋体病人血清中LipL21抗体检测
寻找钩体属特异性保护抗原,对于研制通用型钩体疫苗及实验室诊断试剂盒均有重要价值.Cullen等[1]首先报告了致病性问号钩体均具有属特异性lipL21脂蛋白基因.我们也曾证实我国15群15型问号钩体参考标准株均含有序列保守的lipL21基因[2].已知钩体病免疫保护作用主要依赖血清抗体为主的体液免疫[3].我们采用显微镜凝集试验(MAT)检测了156份钩体病人血清的凝集效价,并建立rLipL21-IgM/IgG-ELISAs对血清标本中LipL21的IgG和IgM型抗体进行了检测.
-
重组钩体基因疫苗候选抗原交叉免疫研究
重组钩体基因疫苗与各株钩体抗原交叉免疫反应重组钩体基因多肽疫苗候选抗原p68(分子量68×103)是作者构建的问号钩体赖型017株基因库筛选的重组质粒表达抗原.该疫苗候选抗原具良好免疫原性,能激起体内强有力T-B细胞协同效应的特异性体液免疫反应和动物保护性(BALB/c小鼠、豚鼠).然而,好的交叉保护是作为衡量疫苗候选抗原的金标准.
-
钩体LPS生物合成与装配途径及相关基因分析
目的预测问号钩体黄疸出血型赖株脂多糖(LPS)合成、装配途径,并对其中几个关键基因的特征进行深入分析.方法使用NCBI/BlastX,ProDom/Blast,Jpred2,TMHMM对问号钩体黄疸出血型赖株全基因组ORF基因所编码蛋白进行在线分析,并使用Bioedit,Pep Tool软件进行蛋白质一、二级结构分析.结果确定了脂质A和核心多糖生物合成基因lpxA、lpxB、lpxC、lpxD、lpxK、kdsA、kdsB、kdtA、lnt、htrB和O-抗原生物合成基因簇rfb locus 等以及装配、跨膜转运中的基因rfbP、rfbX、rfc、rfaL、rfe绘制了LPS合成及装配途径示意图.并对合成和装配途径中几个关键的基因编码蛋白(LpxA、 Rfc、 RfbX、 RfaL)的二级结构、跨膜区域、结构域等进行了分析.结论问号钩体黄疸出血型赖株LPS合成、装配途径与典型的革兰阴性菌,如大肠埃希菌K-12相似,主要差异在于钩体特殊的脂肪酸代谢途径和O-抗原多糖结构.该研究为进一步探讨钩体LPS基因功能及其与致病性关系奠定基础.
-
钩端螺旋体主要外膜蛋白在诊断和疫苗研制方面的进展
钩端螺旋体(以下简称钩体)病是全世界流行的自然疫源性人兽共患传染病,我国是该病的主要疫区之一.钩体可分为致病性的问号钩体(Leptospira interrogans)和不致病的双曲钩体(Leptospira biflexa).
-
钩端螺旋体粘附、内化和信号传导及属特异性表面蛋白抗原
强毒力的问号钩体黄疸出血群56601株、弱毒力的波摩那群56608株能以一端或两端粘附于J774A.1小鼠单核巨噬样细胞,无毒力的三宝垄群Patoc Ⅰ株则否.两端粘附呈现为"O-O"或"∩"状,56608株或在在Vero细胞中两端粘附罕见.
-
钩体在豚鼠组织中的动态分布和钩体病发病机制研究
本研究的目的主要是建立钩体赖株感染豚鼠的动物模型,观察病理改变和钩体在肝、肾和肺组织中的动态变化,探讨钩体病的发病机制.我们将幼龄豚鼠随机分为正常对照和感染后不同时间段8组,问号钩体黄疸出血群赖型赖株8×108条腹腔注射感染豚鼠,观察豚鼠发病情况,免疫组化法显示钩体在感染的不同时间肝、肾和肺组织中的动态分布,光镜和透射电镜观察钩体病病理改变,透射电镜观察钩体在组织中分布和降解情况.
-
钩体病豚鼠模型出血机制的实验研究
本研究的目的主要是探讨钩体病过程中出血的发病机制.我们建立了问号钩体黄疸出血群赖型赖株感染豚鼠的疾病模型,动态检测钩体血液学改变和出凝血相关的TM、TAT、D-D、11-DH-TXB2等分子标志物.透射电镜观察组织病变,MSB染色观察肝、肾、肺组织中有无微血栓的存在.
-
问号钩体黄疸出血群赖型赖株特异性基因的筛选
通过抑制消减杂交技术,比较问号钩体黄疸出血群赖型赖株与双曲钩端螺旋体57001株之间基因组的差异,筛选致病钩体特有的基因片段.主要方法为以问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株为tester,非致病性双曲钩端螺旋体57001株为driver,培养后分别抽提基因组DNA,经Alu Ⅰ酶切后连接特殊设计的adaptor进行消减杂交和PCR,获得的消减混合物经T/A克隆后,转化入pMD18中建立消减杂交文库.经PCR和dot blot筛选鉴定阳性克隆,并进行测序及同源分析.结果显示在随机挑取的188个克隆中,有35个含有tester特异的DNA序列.特异性片段测序后进行生物信息学分析,发现.本研究筛选并分析了可能与钩体毒力相关的基因.为进一步探讨该基因地生物学功能及阐明问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株致病分子机制打下了基础.