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两型钩端螺旋体外膜疫苗人体免疫水平观察
为了解黄疸出血群赖型和七日热群七日热型钩端螺旋体(钩体)外膜疫苗免疫后的人体免疫水平,我们对两型钩体外膜疫苗进行了免疫后1年抗体水平和加强免疫效果观察,现简报如下.1 钩体疫苗和观察对象钩体外膜疫苗,含黄疸出血群赖型和七日热群七日热型,每型含量为200μg/ml,批号:93001、93002.钩体菌体疫苗,其菌型与配比同钩体外膜疫苗,菌浓度为各含1.5亿/ml,批号:93003,作为对照组.
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钩体在豚鼠组织中的动态分布和钩体病发病机制研究
本研究的目的主要是建立钩体赖株感染豚鼠的动物模型,观察病理改变和钩体在肝、肾和肺组织中的动态变化,探讨钩体病的发病机制.我们将幼龄豚鼠随机分为正常对照和感染后不同时间段8组,问号钩体黄疸出血群赖型赖株8×108条腹腔注射感染豚鼠,观察豚鼠发病情况,免疫组化法显示钩体在感染的不同时间肝、肾和肺组织中的动态分布,光镜和透射电镜观察钩体病病理改变,透射电镜观察钩体在组织中分布和降解情况.
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钩体病豚鼠模型出血机制的实验研究
本研究的目的主要是探讨钩体病过程中出血的发病机制.我们建立了问号钩体黄疸出血群赖型赖株感染豚鼠的疾病模型,动态检测钩体血液学改变和出凝血相关的TM、TAT、D-D、11-DH-TXB2等分子标志物.透射电镜观察组织病变,MSB染色观察肝、肾、肺组织中有无微血栓的存在.
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问号钩体黄疸出血群赖型赖株特异性基因的筛选
通过抑制消减杂交技术,比较问号钩体黄疸出血群赖型赖株与双曲钩端螺旋体57001株之间基因组的差异,筛选致病钩体特有的基因片段.主要方法为以问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株为tester,非致病性双曲钩端螺旋体57001株为driver,培养后分别抽提基因组DNA,经Alu Ⅰ酶切后连接特殊设计的adaptor进行消减杂交和PCR,获得的消减混合物经T/A克隆后,转化入pMD18中建立消减杂交文库.经PCR和dot blot筛选鉴定阳性克隆,并进行测序及同源分析.结果显示在随机挑取的188个克隆中,有35个含有tester特异的DNA序列.特异性片段测序后进行生物信息学分析,发现.本研究筛选并分析了可能与钩体毒力相关的基因.为进一步探讨该基因地生物学功能及阐明问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型赖株致病分子机制打下了基础.
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诺氟沙星对钩端螺旋体菌敏感试验
目的为探讨诺氟沙星抗菌药物对钩端螺旋体黄疸出血群赖型菌株抑制和杀菌的效果. 方法采用不同浓度的药物,进行两种不同方式培养的钩体菌,在低倍或高倍镜下观察抑菌及杀菌情况. 结果用两种不同方式培养钩体菌,药物浓度在0.032~0.064 mg/ml剂量下有抑制和杀菌的作用. 结论在体外培养的钩体菌对诺氟沙星有较好抑杀效果,能否替代青霉素有待进一步验证.