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摩根摩根菌中质粒介导KPC-2型碳青霉烯酶的检测
目的 研究碳青霉烯耐药摩根摩根菌的分子流行病学及其耐药机制.方法 2010年10月-2011年2月从杭州市中医院分离到7株碳青霉烯不敏感的摩根摩根菌.脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株之间的同源性；琼脂稀释法测定抗生素对细菌的低抑菌浓度(MIC)；接合试验、质粒图谱分析、特异性PCR扩增和序列分析等研究细菌对碳青霉烯耐药的分子机制.结果 分离自急诊监护病房的6株摩根摩根菌PFGE条带完全相同或相差1～3个条带；分离自重症监护病房的1株摩根摩根菌与其他6株PFGE条带差异明显.7株摩根摩根菌的耐药模式基本相同.亚胺培南、美罗培南和厄他培南的MIC值差异较大,分别为8μg/ml(耐药)、1μg/ml(敏感)和0.25～0.50μg/ml(敏感或中介耐药).7株摩根摩根菌对青霉素类、氨曲南和环丙沙星耐药,对头孢菌素类耐药或敏感,对阿米卡星敏感.接合试验使大肠埃希菌EC600对碳青霉烯类抗生素由敏感变为耐药,对其他β-内酰胺类抗生素也均耐药.摩根摩根菌及转移接合子均含有一个约为60kb的质粒.PCR扩增及测序表明摩根摩根菌及转移接合子均产KPC-2型碳青霉烯酶,且携带qnrS1基因.结论 首次在摩根摩根菌中检测到KPC-2型碳青霉烯酶,KPC-2是引起摩根摩根菌对碳青霉烯类不敏感的主要原因.
关键词： 摩根摩根菌 碳青霉烯 耐药性 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 -
产KPC酶肺炎克雷伯菌耐药情况及基因型分析
目的 分析我院产KPC酶肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型.方法 收集2012年2月至2013年5月期间分离自我院临床科室的对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌9株,采用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定及药敏试验,采用改良Hodges试验对KPC酶表型进行检测,采用PCR法对菌株的KPC酶基因型进行检测.结果 所分离的9株肺炎克雷伯菌对所选用的19种抗生素均100.0％耐药,有7株改良Hodges试验呈现阳性结果,阳性率77.8％.9株肺炎克雷伯菌均扩增出KPC目的基因条带,且均为KPC-2型基因.结论 产KPC酶肺炎克雷伯菌耐药形势严峻,合理使用抗菌药物,加强感染者的消毒与隔离,是控制此类细菌感染的有效措施.
关键词： 肺炎克雷伯菌 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 耐药性 抗生素 -
产 KPC 酶肺炎克雷伯菌的检测及传播途径初探
目的：了解上海交通大学医学院附属新华医院产KPC酶肺炎克雷伯菌的分布情况及分子流行病学特点，初步探讨其医院感染暴发流行的传播途径。方法连续收集2010年1月至2013年12月从上海新华医院临床样本中分离到的对碳青霉烯类抗菌药物耐药的肺炎克雷伯菌。采用Vitek 2 Compact系统联合纸片扩散法（ Kirby-Bauer法）对菌株进行鉴定及药敏试验，用改良Hodge试验对碳青霉烯类抗菌药物耐药的菌株进行耐药表型筛查，采用聚合酶链反应（ PCR）及测序方法检测碳青霉烯酶KPC基因，并对产KPC酶的菌株进行肠杆菌基因间重复共有序列（ ERIC）-PCR分型及临床资料汇总分析。结果共收集到77株对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌，71株改良Hodge试验阳性，其中69株携带KPC基因，经测序确定为KPC-2基因。 ERIC-PCR结果提示69株产KPC-2酶菌株均为同一克隆株。12个科室首例分离到产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的患者中，有7例在本院有转科记录，其中4例都曾在外科重症监护室（SICU）接受过治疗。结论上海新华医院的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌以产KPC-2酶为主，这些菌株可能通过转科患者在院内形成广泛的水平播散。
关键词： 克雷伯菌 肺炎 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 交叉感染 传播途径 -
2013-2017年某三甲医院产KPC肺炎克雷伯菌 流行特征研究
目的 分析近五年医院产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌的分布、耐药性变迁及流行特征,揭示产KPC肺炎克雷伯菌(KPCKpn)在医院近年来的流行规律,为临床防治KPCKpn感染提供参考.方法 收集2013年1月-2017年6月医院临床标本分离的肺炎克雷伯菌非重复菌株,采用法国梅里埃VITEK MS质谱仪或VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定药敏仪进行细菌鉴定和药敏实验.使用特异引物序列对CRKpn菌株的DNA模板进行多重PCR扩增,确定其是否携带目前已知的常见碳青霉烯耐药基因.随机选取各病区来源的KPCKpn菌株100株,采用脉冲场电泳(PFGE),使用XbaI内切酶对待测菌株基因组进行酶切和电泳分析,使用BioNumerics 3.0软件对电泳图进行同源性分析.结果 近五年,医院共分离肺炎克雷伯菌4946株,其中碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKpn)710株占14.4%,而82.8%的CRKpn为KPCKpn;CRKpn的比例近五年上升明显;KPCKpn菌株主要来自呼吸病区占20.4%、急诊ICU病区占17.0%;KPCKpn菌株主要分离自痰标本占48.3%、引流液占23.0%.结论 CRKpn的比例呈现逐年增加的趋势,KPCKpn菌株数量的增加是导致CRKpn概率增加的主要原因;KPCKpn菌株数量增加的主要原因是其在院内的克隆传播;创伤性操作等医疗行为对于耐药菌感染的发生发展过程有很大程度的影响.
关键词： 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯耐药 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 -
骨科感染患者病原菌产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶的检测研究
目的 对骨科患者感染的大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌、弗氏柠檬酸杆菌、褪色沙雷菌等进行肺炎克雷伯菌碳青霉烯(KPC)酶检测,为合理使用碳青霉烯类抗菌药物提供依据.方法 选择2008年1月—2011年2月骨科感染患者分离的革兰阴性杆菌包括大肠埃希菌110株、阴沟肠杆菌15株、肺炎克雷伯菌145株、弗氏 柠檬酸杆菌5株、褪色沙雷菌3株等共278株病原菌采用VITEK-2 Compact、K-B纸片法进行药敏试验,以亚胺培南、美罗培南、厄他培南为检测药物,筛选出碳青霉烯类耐药菌株,用改良的Hodge试验筛选、聚合酶链反应(PCR)扩增,确认产KPC酶及基因分型.结果在278株病原菌中,对碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌9株、阴沟肠杆菌10株、肺炎克雷伯菌16株,共35株进行改良Hodge试验,肺炎克雷伯菌阳性2株,2株肺炎克雷伯菌PCR扩增出现目的基因片段,其余菌株改良Hodge试验全部阴性.结论 该项研究除2株肺炎克雷伯菌中发现目的基因片段,其他病原菌未发现产KPC酶的菌株.
关键词： 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 改良Hodge试验 肺炎克雷伯菌 大肠埃希菌 碳青霉烯酶 -
我国携带KPC基因耐药菌流行现况分析
目的 分析我国产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)阳性菌的流行病学特征,探讨我国携带KPC阳性菌流行特征及耐药机制.方法 收集2009～2015年报道我国blaKPC研究文献,对KPC阳性菌株种类与地区分布、感染来源、耐药谱和转移机制进行流行病学分析.结果 我国共有21个省市报道blaKPc阳性菌株,其中浙江多,占43.51％(P＜0.01);阳性菌以肺炎克雷伯菌多,占87.86(P＜0.01);感染阳性菌的患者男性居多(P＜0.05);患者所在科室以ICU病区多,占70.51％(P＜0.01);痰液标本分离blaKPC阳性菌多,占45.62％(P＜0.01);blaKPC阳性菌对头孢菌素类、碳青霉烯类、氨基糖苷类抗生素耐药率普遍较高,对多黏菌素、替加环素的耐药率较低;产KPC-2酶或合并多种β-内酰胺酶和外膜蛋白缺失是导致碳青霉烯类抗生素耐药的重要原因.结论 携带KPC基因的耐药菌感染已成为全球性的公共卫生问题,需要深入研究其发生发展规律.
关键词： 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 流行病学 耐药机制 转移机制 -
肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶流行及分子特征研究进展
在各种介导肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药的机制中，产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(klebsiella pneumoniae carbapenemase，KPC)是为常见的一种。KPC为A类β-内酰胺酶，编码基因通常位于质粒上，便于在细菌间传递。KPC主要分布在肺炎克雷伯菌中，也在大肠埃希菌、阴沟肠杆菌等常见肠杆菌科细菌中检出。本文就KPC的流行和分子特征进行综述。
关键词： 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 肠杆菌 微生物 -
硼酸抑制纸片扩散试验检测肺炎克雷伯菌中的KPC
目的 评估利用硼酸的纸片扩散试验检测肺炎克雷伯菌中肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)的效能.方法 收集经基因鉴定非重复的36株产KPC肺炎克雷伯菌株;采用琼脂稀释法测定所有菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的低抑菌浓度(MIC)值;聚合酶链反应(PCR)和DNA测序鉴定β-内酰胺酶基因型;使用标准和超过标准的2种测试菌量进行改良Hodge试验(MHT)以检测碳青霉烯酶表型;利用8种抗菌药物纸片含或不含硼酸抑制剂的纸片扩散试验检测KPC表型,以两者抑菌圈直径差值≥5 mm判定阳性结果.结果 所有36株产KPC菌株至少对1种碳青霉烯类药物耐药.MHT检测碳青霉烯酶的敏感性和特异性为97.2%和91.0%,增加菌量后的敏感性和特异性为100.0%和87.0%.利用硼酸联合头孢吡肟、亚胺培南或美罗培南的纸片扩散试验检测肺炎克雷伯菌产KPC表型,敏感性和特异性均达到100.0%.结论 硼酸联合头孢吡肟、亚胺培南或美罗培南的纸片扩散试验能检测出KPC表型,而且该方法操作简单、结果易读.
关键词： 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 纸片扩散试验 抑制剂 表型试验 -
产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的研究进展
产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)细菌在世界范围内广泛流行,此酶不仅见于克雷伯菌属,在诸多革兰阴性细菌中皆可检测到.产KPC细菌除了对β-内酰胺类抗菌药物耐药,对其他类抗菌药物如氟喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类也多表现为耐药,受到广泛关注.此文对产KPC肺炎克雷伯菌的流行病学、检测方法、感染的治疗及控制进行了综述.
关键词： 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯类抗生素 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 -
耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药机制及耐药性分析
目的 了解本院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌 (CRKP) 的耐药机制及对常用抗菌药物的耐药性, 为临床感染的控制提供依据.方法 收集2015年-2017年佳木斯大学附属第一医院临床患者分离的CRKP, VITEK 2 Compact检测其对常用抗菌药物的敏感性;PCR方法扩增碳青霉烯酶基因 (KPC、NDM、IMP-4、IMP-8、VIM-1、VIM-2、OXA-23、OXA-24、OXA-48、OXA-51、OXA-58) .结果 共收集31株CRKP对多数β-内酰胺类药物高度耐药, 对酶抑制剂复合制剂及一、三、四代头孢、碳青霉烯类药物的耐药率达90％以上.对氨基糖苷类药物庆大霉素、妥布霉素的耐药率较高, 达80％以上.阿米卡星及左氧氟沙星的敏感率较高, 达90％以上.29株KPC基因阳性, 1株NDM-5阳性, 2株IMP-4阳性.结论 本院分离的CRKP耐药现象严重, 产KPC型酶是本院CRKP的主要耐药机制, 相关部门应积极采取感染控制及预防措施, 避免耐药菌的进一步播散.
关键词： 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯类 耐药机制 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 -
产K PC铜绿假单胞菌的耐药性研究
目的：探讨产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶（K PC ）铜绿假单胞菌的耐药性。方法铜绿假单胞菌菌株来自2例痰液标本。采用VITEK 2 COMPACT全自动微生物鉴定/药敏分析仪进行细菌菌株的鉴定，应用聚合酶链反应（PCR）及基因测序法鉴定K PC酶基因型，采用肉汤稀释法进行抗菌药的低抑菌浓度（M IC ）测定。结果2例菌株均对β-内酰胺类抗菌药、左氧氟沙星耐药，对环丙沙星中介，对庆大霉素、奈替米星、妥布霉素、黏菌素及多黏菌素B敏感；其中1株还对替加环素敏感。2例菌株所产碳青霉烯酶不是金属β-内酰胺酶，其亚型为 KPC-2。接合实验未能证明 bla K PC 基因能接合转移到大肠埃希菌 J53中。结论产K PC铜绿假单胞菌的出现给临床抗感染治疗带来严峻挑战。
关键词： 假单胞菌 铜绿 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 最低抑菌浓度 鉴定 -
我院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性分析
目的：为临床合理使用碳青霉烯类抗菌药物提供参考。方法：收集我院2014年1月－2015年12月检出的肠杆菌科细菌，采用半自动微生物测定仪进行菌株培养、鉴定及药敏试验，采用改良Hodge试验和纸片扩散法进行产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶（KPC）和产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药菌株的确证。结果：我院2014－2015年共检出肠杆菌科细菌1035株，其中大肠埃希菌732株，肺炎克雷伯菌157株、阴沟肠杆菌136株、黏质沙雷菌10株，未检出枸橼酸杆菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿米卡星和碳青霉烯类抗菌药物的敏感率较高，而对大部分头孢菌素类抗菌药物的敏感率较低。共检出耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌64株（6.18％），其中耐碳青霉烯类大肠埃希菌31株（4.23％）、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌30株（19.11％）、耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌1株（0.74％）、耐碳青霉烯类黏质沙雷菌2株（20.00％）；耐药菌株主要来源于痰液和尿液标本，且主要集中于新生儿内科和重症医学科。64株耐药菌株中，产KPC的有59株（92.19％）、产ESBLs的有3株（4.69％）。结论：我院肠杆菌科细菌以大肠埃希菌为主，且耐碳青霉烯类大肠埃希菌和耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的检出数量较多。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性可能与其产KPC和ESBLs有关。临床应遵循用药指征，结合药敏试验结果合理选用碳青霉烯类抗菌药物。
关键词： 碳青霉烯类 肠杆菌科细菌 耐药性 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 超广谱β-内酰胺酶 -
产酸克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究
目的：分析产酸克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素的分子机制。方法收集福建医科大学附属协和医院2011年8月～2012年8月临床分离非重复耐碳青霉烯类抗生素的产酸克雷伯菌菌株5株，检测厄他培南（ETP）、亚胺培南（IPM）及美罗培南（MEM）的低抑菌浓度（MIC）筛查菌株；采用改良 Hodge试验进行碳青霉烯酶表型鉴定、琼脂稀释法测其药敏；聚合酶链反应（PCR）扩增超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、碳青霉烯酶耐药基因；对检出碳青霉烯类基因的产酸克雷伯菌进行接合试验。结果5株产酸克雷伯菌对17种抗菌药物中耐药率≥80％的有9种，分别为头孢西丁、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、厄他培南、亚胺培南、庆大霉素、头孢哌酮／舒巴坦、氨曲南。对替加环素、美罗培南、多黏菌素 B和哌拉西林／他唑巴坦的耐药性较低。改良 Hodge试验检出4例产碳青霉烯酶。2株携带碳青霉烯类耐药基因（1株仅 IMP-4阳性，1株KPC-2和 IMP-8同时阳性），3株检出β-内酰胺酶基因。结论福建医科大学附属协和医院产酸克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素耐药机制可能为携带 IMP及KPC基因，并且发现了产酸克雷伯菌同时携带两种碳青霉烯类耐药基因的现象。
关键词： 产酸克雷伯菌 碳青霉烯酶 金属β-内酰胺酶 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 耐药机制 -
产KPC酶肺炎克雷伯菌中ESBL的检测
目的 了解某医院产KPC酶肺炎克雷伯菌中产ESBL的情况,并建立一种有效的ESBL表型检测方法.方法 收集82株产KPC酶的肺炎克雷伯菌,纸片扩散法进行药物敏感试验；PCR和DNA测序鉴定超广谱β内酰胺酶基因型；脉冲场凝胶电泳进行同源性分析；CLSI推荐的ESBL表型确证试验、利用3-氨基苯酚硼酸的改良ESBL表型确证试验和改良Hodge试验进行表型试验.结果 含blaESBL的产KPC菌株对β-内酰胺类药物耐药率普遍高于单产KPC菌株.ES-BL基因检出率为79.3％,基因型以SHV型和CTX-M型为主.PFGE显示菌株间的相似性系数≥94％.改良Hodge试验均为阳性结果.ESBL表型确证试验检出率低,改良ESBL表型确证试验的检出率与PCR结果相符.结论 大多数产KPC菌株含ESBL基因,因此对β内酰胺类药物具备了更强的耐药性.利用3-氨基苯酚硼酸的改良ESBL表型确证试验能有效地检测合并产KPC菌株中ESBL的表型.
关键词： 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶 超广谱β内酰胺酶 表型试验 抑制剂
