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整合蛋白β3近膜端α螺旋中的E726Q突变影响细胞膜与肌动蛋白皮质层相互作用继而诱导细胞膜形成突起小泡
整合蛋白β亚基胞浆段近膜端α螺旋在与诸多蛋白如踝蛋白(talin)、α-辅肌动蛋白(α-actinin)或者骨架蛋白(skelemin)等的结合上发挥着重要的功能.本研究的目的是通过对α螺旋上5个保守的带电荷氨基酸(R724,K725,E726,E731和E733)的研究,采用定点突变的方法,从而明确其在介导β3与骨架蛋白结合中的作用.实验结果表明,表达有突变型整合蛋白αⅡbβ3E726Q的CHO细胞株在固相化的纤维蛋白原上伸展不良,表型显著.除此之外,E726Q突变可以诱导CHOαⅡbβ3E726Q细胞株在固相化的纤维蛋白原上的细胞膜起泡现象,且这种突起小泡(blebs)可以被肌凝蛋白轻链ATPase抑制剂blebbistatin所抑制.结论:整合蛋白β3亚基近膜端α螺旋在将细胞膜锚定到膜下肌动蛋白皮质层(submembraneous actin cortex)方面发挥重要作用.
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黏着斑激酶和踝蛋白在黏着斑合成代谢中的作用
细胞的运动迁移是一个多因素调控的动态过程,涉及整合素的活化和黏着斑的合成代谢.近年来,有关黏着斑的合成代谢的理论研究取得了实质性进展,且对于黏着斑合成代谢中关键蛋白黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)及踝蛋白(talin)的研究也越来越深入.本文就黏着斑的生物学特性,FAK及 talin在黏着斑合成代谢中的作用展开综述.
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Talin及Integrin/FAK信号通路与肝癌
肿瘤细胞黏附能力的改变是肿瘤细胞侵袭和转移的起始;整合素(integrin)是细胞表面重要的黏附分子受体,介导许多信号通路的发生,包括Integrin/黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)信号通路,直接或间接地影响肿瘤复发和转移,其中Integrin/FAK信号转导通路,在Integrin介导的肝癌黏附转移信号转导通路中起着至关重要的作用.踝蛋白(Talin)是第一个被证实的Integrin活化蛋白,是黏着斑(focal adhesion plaque,FAP)结构的重要组成部分.本文就Talin结构、功能、与Integrin/FAK信号通路的相互作用及其与肝癌及其他肿瘤的关系作一综述.
关键词： 肝细胞癌 踝蛋白 Integrin信号通路 黏着斑激酶 -
低温下皮肤力学信号相关蛋白表达与活力关系研究
目的:探讨皮肤力学信号相关蛋白整合素(integrin)、踝蛋白(talin)在不同低温条件下的表达与皮肤活力改变的关系,进一步揭示皮肤低温损伤的机制.方法:从同一个体取标本后用5种不同的温度保存,分为新鲜组、4 ℃组、-20 ℃组、-80 ℃组和-196 ℃组,并在保存48 h后进行实验观察,用integrinβ1、talin抗体对5种储存条件下的皮肤作免疫组化染色,图像分析方法定量,同时采用氧耗量的方法对不同低温保存后皮肤活力进行检测.结果:新鲜组、-196 ℃组、-80 ℃组、-20 ℃组、4 ℃组活力依次下降,同时-80 ℃组、-20 ℃组、4 ℃组两种蛋白表达亦有明显下降.结论:低温保存后活力的改变与皮肤力学信号相关蛋白的表达下降关系密切.
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桩蛋白和踝蛋白在甲状腺癌中的表达及临床意义
目的 探讨桩蛋白(Paxillin)和踝蛋白(Talin)在甲状腺癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP染色法和Western blotting技术检测甲状腺癌、甲状腺腺瘤、桥本甲状腺炎及癌旁甲状腺组织中Paxillin和Talin的表达,以及Paxillin和Talin在甲状腺癌中的表达与患者肿瘤病理类型、淋巴结转移、浸润程度、年龄及性别的关系.结果 Paxillin和Talin在甲状腺癌组织中高表达,与甲状腺腺瘤、桥本甲状腺炎及癌旁甲状腺组织中表达差异有统计学意义,而且与患者淋巴结转移、浸润程度和临床分期密切相关,与患者年龄、性别和病理类型无关.结论 Paxillin和Talin在甲状腺癌中高表达,与患者淋巴结转移、浸润程度和临床分期密切相关,可作为甲状腺癌患者预后的指标,为临床寻找新的甲状腺癌治疗靶点提供重要依据.
关键词： 甲状腺癌 桩蛋白 踝蛋白 免疫组织化学染色 Western blotting -
机械力对人骶韧带成纤维细胞形态及合成功能的调节
目的 探究机械力对非盆底器官脱垂(POP)患者骶韧带成纤维细胞形态及整合素β1(integrinβ1)、踝蛋白( talin)、细胞外基质(ECM)mRNA表达的调节.方法 选取2009年10月至2010年9月河北医科大学二院非POP患者15例,进行骶韧带成纤维细胞的原代培养,并鉴定.取3～4代的骶韧带成纤维细胞加载力,加载时间分为0(对照组)、4、12、24h,提取RNA,荧光实时定量PCR测定机械力对integrinβ1、talin、Ⅰ、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)mRNA表达量的影响.结果 应力刺激下,细胞的形态和伸展方向发生改变.integrinβ1 mRNA 4、15、24h表达量(18.822±5.545,32.527 ±2.212,40.357 ±5.140)较0h(1.003±0.064)升高,差异有统计学意义(P=0.000).talin mRNA 4、15、24h表达量(109.804±34.875, 106.574±35.477,863.206±144.361)较0h(1.009 ±0.468)升高,差异有统计学意义(P=0.000).Ⅰ型胶原mRNA 4、15h表达量(0.753±0.192,0.701±0.023)较0h(1.000 ±0.129)下降,差异有统计学意义(P =0.008),但在24h后回升至1.113±0.049.Ⅲ型胶原mRNA4、15、24h表达量(4.792±1.612,6.146±1.169,5.021±0.940)较0h(1.001±0.249)升高,差异有统计学意义(P =0.002).MMP-1 mRNA 4、15、24h表达量(6.233±1.690,23.173±9.251,20.133±7.100)较0h(1.000 ±0.100)升高,差异有统计学意义(P =0.005).结论 细胞的形态、伸展方向和合成功能受机械力的调节,基质重塑可能是细胞对机械力的适应性改变.
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大肠癌组织中talin mRNA的表达及意义
目的 探讨踝蛋白(talin)mRNA在大肠癌组织中的表达变化及其在大肠癌发生、发展中的作用.方法 采用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)方法检测41例大肠癌及癌旁正常组织中talin mRNA的表达.结果 talin mRNA在大肠癌组织中的表达量为126 535 copy/μg RNA,而在癌旁正常组织中为22 689 376 copy/μg RNA,两者相比,P<0.01;有淋巴结转移的大肠癌较无转移者talin mRNA表达低,P<0.01;癌组织浸润越深,talin mRNA表达越低,P<0.01. 结论 talin mRNA在大肠癌中表达降低;talin与大肠癌的浸润、转移有关,可作为大肠癌发生、发展的预测指标之一.
关键词： 大肠肿瘤 大肠癌 踝蛋白 荧光定量聚合酶链反应技术 -
Talin和Paxillin在膀胱尿路上皮癌的表达及其意义
目的:检测膀胱尿路上皮癌(BUC)中踝蛋白(Talin)和桩蛋白(Paxillin)的表达情况,探讨其表达的临床意义.方法:采用量子点免疫荧光组织化学方法检测62例膀胱尿路上皮癌和10例癌旁正常膀胱黏膜组织中Talin及Paxillin的表达情况,并分析两种蛋白与其临床病理特征及两种蛋白之间的相关性.结果:①Talin和Paxillin在BUC中呈高表达,阳性率分别为56.45％(35/62)、51.61％(32/62),在10例癌旁正常黏膜组织中均无阳性表达;②Talin和Paxillin蛋白的表达与BUC的淋巴结转移、临床分期、病理分级有关(P＜0.05);③两者的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小与数目均无明显相关(P＞0.05);④Talin和Paxillin之间的表达呈正相关(P＜0.05).结论:Talin和Paxillin的过表达与BUC的发展、侵袭转移有关.
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周期性应变诱导血管平滑肌细胞桩蛋白和踝蛋白的表达
利用脉动膜式张应力系统,给离体培养的VSMCs施加14%,1 Hz的周期性应变,免疫荧光细胞化学染色,激光共聚焦扫描显微镜观察、分析桩蛋白和踝蛋白的表达变化.结果表明,周期性应变促进VSMCs桩蛋白和踝蛋白的表达增加.说明桩蛋白和踝蛋白是周期性应变条件下VSMCs细胞内信号传递的重要信号物质.
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剪切应力对晚期内皮祖细胞细胞骨架蛋白表达及分布的影响
目的 探讨剪切应力对晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)细胞骨架蛋白局部粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、踝蛋白(talin)和桩蛋白(paxillin)表达及分布的影响.方法 梯度密度离心法获取大鼠骨髓单核细胞,体外培养EPCs并鉴定.以第三代即晚期EPCs作为靶细胞,给予12 dyne/cm2的剪切应力干预3h,以静止组作为空白对照.分别采用Western Blot和细胞免疫荧光观察3种细胞骨架蛋白FAK、talin和paxillin表达量和分布情况.结果 与静止组相比,剪切应力作用EPCs 3 h后:FAK蛋白的表达量显著增加,变化为静止组的2.06±0.01倍,差异有统计学意义(P＜0.01),表达位置沿剪切应力方向聚集成束并延伸至细胞边缘;而talin和paxillin蛋白的表达量则均有所下降(P＜0.01).结论 剪切应力能影响晚期EPCs上细胞骨架蛋白FAK、talin和paxillin的表达及分布.
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桩蛋白和踝蛋白在儿童及青少年甲状腺癌组织表达
目的 探讨桩蛋白和踝蛋白在儿童及青少年甲状腺癌组织表达及临床意义.方法 采用免疫组化法检测儿童及青少年甲状腺癌与成人甲状腺癌中桩蛋白和踝蛋白的表达.结果 桩蛋白和踝蛋白在儿童及青少年甲状腺癌与成人甲状腺癌组织中均呈高表达,但儿童及青少年病人桩蛋白的表达明显高于成年病人(χ2=3.894,P<0.05).桩蛋白和踝蛋白在甲状腺癌中的表达与有无淋巴结转移和肿瘤浸润程度显著相关(χ2=4.181～7.479,P<0.05),而与病人性别和肿瘤组织类型无关(P>0.05).儿童及青少年甲状腺癌的淋巴结转移率显著高于成人甲状腺癌(χ2=16.272,P<0.05).结论 桩蛋白和踝蛋白在甲状腺癌组织中呈高表达,两种蛋白在甲状腺癌组织中的表达与有无淋巴结转移和肿瘤浸润程度密切相关,但儿童及青少年甲状腺癌更易发生淋巴结转移,这可为儿童及青少年甲状腺癌病人的诊疗和管理提供参考.
