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唐山市1990至2000年肾综合征出血热监测分析
唐山市为全国41个肾综合征出血热(HFRS)监测点之一,自1980年11月首次经血清学确诊HFRS病例以来,每年均有散发病例.现将1990~2000年监测结果总结如下:1 内容和方法1.1 人间疫情监测包括HFRS病人发病时间、性别、年龄、职业、地区分布以及发病率、死亡率、病死率.根据各地上报的疫情进行个案调查,核实后汇总统计.1.2 健康人群HFRS隐性感染率监测包括不同性别、年龄、职业健康人群的隐性感染率.于每年3和10月对所辖县(市)、农场各选2个点,每点选1~2个村,采用随机抽样方法,用滤纸片采集无HFRS病史、未接种HFRS疫苗的健康人耳垂微量全血,用间接免疫荧光法(IFAT)查HFRS抗体,计算隐性感染率.
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微量全血微核实验方法的探讨
自薛开先等[1]对人体外周血微核实验方法改进后,因其灵敏、快捷、价廉而在生物检测领域受到青睐.采血通常取静脉血,从中分离、浓集淋巴细胞用于微核试验.这一经典做法因需血量大,受试者依从性差,因而在某种程度上制约了微核实验在人群监测中的应用.本研究用预实验探索,进一步验证了用末梢血样直接涂片的微核实验方法,且在人群调查中试用有效.
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微量全血法高通量彗星试验方法的研究与应用
目的 建立一种简易快捷,适合大样本人群生物监测的微量全血法高通量彗星试验技术方法.方法 选择1名不吸烟男性,探索微量全血法的彗星试验条件,建立了微量全血法的高通量彗星试验方法.并在柴油机尾气(diesel engine exhaust,DEE)暴露人群中进行验证.结果 经过对铺胶量和细胞上样量的探索,发现30μl细胞悬液能够均匀铺设到彗星玻片的小孔中,胶片表面比较平整,细胞基本为单层,经裂解液处理后也不易脱落.上样量中发现5μ1抗凝全血与200μl琼脂糖凝胶混合,细胞分散均匀,间距适当,电泳后无细胞重叠,图像清晰容易分辨,对比度较高.在方法学的验证中,高通量彗星试验的结果显示,在DEE暴露组较对照组的彗星尾长、尾矩和尾部DNA百分含量均明显增加,板间及板内变异度小于10%.结论 全血法高通量彗星实验适用于化学致癌物和污染物遗传损伤的检测.
关键词: 彗星实验 微量全血 高通量 柴油机尾气(DEE) DNA损伤 -
系统性红斑狼疮患者淋巴细胞CD126 的表达
我们分别采用流式细胞仪结合微量全血双标记免疫荧光法和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了33例SLE患者CD3+与CD19+淋巴细胞表面CD126表达水平和外周血单一核细胞(PBMC)内CD126 mRNA表达水平,现报道如下。
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微量全血培养在HIV感染诊断中的应用
[目的] 建立一种简便、有效的HIV感染检测方法,用于儿童HIV垂直感染的早期诊断及可疑感染者的确认.[方法] 用肝素化全血(每孔分别1000、500、250、125、62.5、10 μl)与正常人激活的PBMC 106在24孔板中进行复孔共培养或与新鲜的正常人PBMC同时刺激共培养来分离HIV病毒,培养上清液用P24抗原ELISA试剂盒做检测.[结果] 4例全血培养中分离出3株HIV-1,微量全血培养出现阳性的时间顺序为10 μl>62.5 μl>125 μl>250 μl>500 μl>1000 μl.[结论] 微量全血培养有较高的敏感性和特异性,能够用少量全血做出快速诊断,可应用于HIV-1垂直感染的早期诊断.
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ELISA法检测儿童百日咳白喉和破伤风抗体的初步应用
我国自1982年正式实施计划免疫之后,儿童中百日咳、白喉和破伤风的发病率和临床病例大幅度降低.为检测儿童免疫后的效果,本文采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测百日咳、白喉和破伤风抗体,并与传统的微量凝集试验和间接血凝法比较,发现ELISA法检测具有灵敏度高、操作快速简便、仅需微量全血等优点.现将结果报道如下.
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1717例小儿外周血BALP水平测定及其临床意义
我科于1997年2月至1998年2月对来自市区的门诊患儿1 717例进行外周血骨碱性磷酸酶(Bone alkaline phosphatase,BALP)水平测定,探讨其临床意义.对象与方法1对象1 717例患儿中,男1 035例,女682例;1~3岁1 200例,4~6岁279例,7~14岁246例;多汗900例,夜惊、夜啼500例.囟门加大230例,出牙迟120例,肋骨串珠27例,郝氏沟40例,手镯2例,"O”形腿弯曲4例.2方法BALP由成骨细胞合成,佝偻病患儿因骨钙化不足,成骨细胞活跃,血浆中BALP活性上升.本试剂盒采用微量全血为样品,结合免疫浓缩、全血干化学等技术,使用试条可简易、快速对小儿血浆BALP做半定量测定,对小儿佝偻病可做出早期诊断.
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流式细胞术分析微量全血样品荧光间接标记的研究
目的应用流式细胞术(FCM)建立用于微量全血样品的间接荧光标记染色方法.方法通过对6种外周血染色方法的比较实验,筛选出一种用于FCM的佳染色方法.结果6种染色方法的FCM二维点图和全血样品阳性细胞结果测定基本一致,而微量全血样品间接荧光染色法操作简单、快速、经济实用.结论我们建立的荧光染色法,是外周血流式细胞样品测定的理想方法,该方法为FCM在临床检验和基础研究的应用提供了实用的技术方法.