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BPI23-haFGF融合蛋白的鉴定及其生物活性研究
目的 研究BPI23-haFGF融合蛋白的生物学活性.方法 将已构建的酵母重组表达菌株pPICZαA-BPI23-haF-GF/X-33进行甲醇诱导表达,通过亲和层析纯化和冻十浓缩后,观察融合蛋白BPI23-haFGF埘细菌、NIH3T3细胞以及小鼠烫伤模型的作用.结果 获得纯度约90%的融合蛋白BPI23-haFGF,BPI23-haFGF具有杀菌及促增殖的双重功能,BP123-haFGF促增殖率与HaFGF标准晶相当,当其浓度为0.40 g/L时,促NIH3T3细胞增殖率高(88.7%);在小鼠烫伤模型中,用药组比阴性对照组提前2-3 d愈合.结论 融合蛋白BPI23-haFGF能够改善小鼠烫伤创面的愈合,为其在临床上的应用奠定了基础.
关键词： 融合蛋白BPI23-haFGF 杀菌 促增殖 烫伤愈合 -
局部应用碱性成纤维细胞生长因子对烫伤创面愈合及周围神经纤维再生的影响
本研究应用大鼠深Ⅱ度烫伤愈合模型,观察创面愈合过程中周围神经末梢再生规律和胶原沉积与降解情况,并应用外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),了解其对烫伤创面愈合及周围神经纤维再生的影响及彼此间的作用。
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人表皮细胞生长因子脂质体制备及促大鼠烫伤修复研究
目的:制备重组人表皮细胞生长因子(rhEGF)脂质体,并考察其促大鼠烫伤创面愈合的作用.方法:采用pH梯度法制备rhEGF脂质体；超滤-离心法分离rhEGF脂质体混悬液中的游离rhEGF,ELISA法测定rhEGF含量,计算脂质体包封率；采用透射电镜观察脂质体的外观形态；采用纳米粒度及Zeta电位分析仪分别测定脂质体的粒径和Zeta电位；以大鼠烫伤模型观察给药后各试验组创面愈合过程中的形态、愈合时间和愈合率的变化.结果:制备的rhEGF脂质体包封率为57.7±1.1％；脂质体形状较为规则,呈完整圆球形或椭圆形的单室囊泡；脂质体粒度分布均匀,呈正态分布,平均粒径为63.7 nm;脂质体的Zeta电位为+9.2mV,带正电荷；rhEGF脂质体高、中剂量组能显著性促进大鼠烫伤创面愈合,使创面愈合时间明显提前,低剂量组促烫伤修复效应不明显.结论:pH梯度法制备的rhEGF脂质体包封率较高,rhEGF脂质体对大鼠烫伤创面的愈合有明显促进作用.
关键词： 表皮细胞生长因子脂质体 pH梯度法 烫伤愈合 -
水凝胶携带重组人促红细胞生成素对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响
目的:探讨水凝胶携带重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对深II度烫伤创面愈合的影响.方法:建立18只SD大鼠深II度烫伤模型,随机分为三组,每组6只,分别给予PBS、水凝胶、水凝胶+rHuEPO治疗处理,分别于烫伤即刻、14天、21天测量创面面积,并计算创面愈合指数;治疗21天后取烫伤组织进行组织切片、HE染色和免疫组化检测,比较三组标本上皮化程度、肉芽组织生成和血管形成情况,并进行组织学评分;比较治疗21天后各组血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果:治疗21天,水凝胶+rHuEPO组组织学评分高于水凝胶组和PBS组,表现为较多的肉芽组织形成和血管生成(P＜0.05),创面愈合指数大于PBS组和水凝胶组(P＜0.05),VEGF表达量高于PBS组和水凝胶组(P＜0.05). 结论:应用水凝胶携带rHuEPO治疗深II度烫伤可以增加烫伤组织VEGF表达,促进血管生成、肉芽组织生长、内皮增生和迁移,从而促进烫伤愈合.
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重组人酸性成纤维细胞生长因子促进烧伤与创伤愈合作用研究
目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对小型猪创伤修复和家兔烫伤创面修复的促进作用.方法建立小型猪创伤模型,其中3组分别按90,60,30 AU·(cm2)-1的剂量给予人碱性成纤维细胞生长因子(haFGF),阳性对照组按60 AU·(cm2)-1的剂量给予rhbFGF,阴性对照组给予等量基质,空白对照组不给予任何药物,采用创面照像和透明膜描记称量法记录伤后第4,8,14天创面面积,用注水法测量伤腔容积.观察伤后第8天和第14天创面肉芽组织生长与再上皮化变化,评价修复效果.另建立家兔烫伤创面模型,分组与给药方法同上.观察伤后3,7,14,21 d创面面积,以及伤后14,21 d创面肉芽组织生长与再上皮化变化情况,评价修复效果.结果各组小猪创面面积随伤后时间的延长逐渐缩小,其中rhaFGF 90 AU·(cm2)-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)-1组小猪的疗效更显著.各组小猪创面伤腔容积随伤后时间的延长而逐渐缩小,其中rhaFGF 90 AU·(cm2)-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)-1组更为明显(P＜0.05).组织学检查,可见经rhaFGF和rhbFGF治疗8 d后小猪的创面成纤维细胞生长活跃,数量多,毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组.伤后第14天,各组家兔创面均已愈合,但各rhaFGF治疗组和阳性对照组家兔的创面表皮层较厚.各组家兔烫伤创面面积随伤后时间的延长而逐渐缩小,其中以rhaFGF 90 AU·(cm2)-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)-1组的效果更明显.组织学检查,可见rhaFGF 90 AU·(cm2)-1组家兔的创面在伤后14 d大部分已被新生表皮覆盖,表面附着少量坏死组织,创面基本愈合.结论 rhaFGF对小型猪背部刀伤创面有促修复作用,可促进创面肉芽组织生长、毛细血管胚芽形成与再上皮化.rhaFGF对家兔背部烫伤创面有促修复作用,可促进创面肉芽组织生长,还可以促进坏死组织脱落与再上皮化.
关键词： 重组人酸性成纤维细胞生长因子 创伤修复 烫伤愈合 -
重组人酸性成纤维细胞生长因子促进大鼠烫伤愈合的研究
目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)促进大鼠烫伤创面愈合的作用.方法:采用大鼠背部深Ⅱ度烫伤模型,将3种不同浓度的rh-aFGF溶液隔日一次滴注于创面,观察伤后不同时间的创面面积变化和病理组织学改变.结果:rh-aFGF可明显加速大鼠皮肤创伤的愈合,使创面面积明显缩小(P＜0.05).病理组织学检查发现,rh-aFGF组创面伤后7 d成纤维细胞生长活跃、数量多,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于溶媒对照组;伤后14 d,创面收缩与再上皮化明显,新生上皮向创面中心爬行较快.结论:外用rh-aFGF对大鼠深Ⅱ度烫伤创面有明显的促愈合作用.
关键词： 重组人酸性成纤维细胞生长因子 烫伤愈合 大鼠 -
重组表皮生长因子对大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤的治疗作用
目的:观察重组表皮生长因子对大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤愈合有无促进作用.方法:采用大鼠深Ⅱ度烫伤模型,观察表皮生长因子(EGF)大、中、小剂量对烫伤创面的愈合作用.在建立约10%的烫伤面积后,每日一次给创面滴抹不同剂量的表皮生长因子(EGF)予以治疗,共用药7天.测定治疗后不同时间的创面愈合面积,并于治疗第7天取部分动物创面组织进行病理组织学检查.同时以蒸馏水和已上市的金因肽(重组人表皮生长因子衍生物)作为阴性和阳性对照.结果:表皮生长因子(EGF)大、中、小剂量(每cm2创面200 IU,400 IU,800 IU,分别相当于临床用量的5倍、10倍、20倍)可以缩短大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤愈合时间,同时可以促进烫伤创面的愈合.愈合时间分别为23.167±3.162、23.50±3.507、23.417±3.204天,和阴性对照(27.333±2.881天)相比具有统计学差异.结论:表皮生长因子(EGF)大、中、小剂量可以促进大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤愈合,三个剂量之间未见明显的量效反应.
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电解铝液烫伤诱发寻常性银屑病2例
例1,男,35岁,铝电解工.1995年右小腿胫前被电解铝液烫伤愈合后感瘢痕处瘙痒,且逐渐呈红色扁平丘疹改变,面积不断扩大,上覆银白色鳞屑,半年后全身泛发,于1996年就诊.体检:头皮覆大片银白色厚屑,头发成束状,全身除颜面、颈部外均可见覆银白色鳞屑的扁平红褐色斑丘疹,Ausptzi征阳性.指甲均呈不同程度角化过度改变.病理学检查:表皮角化不全,粒层变薄,真皮乳头延长,毛细血管扩张.基底细胞空泡形成,乳头上方表皮可见白细胞浸润.角层内可见Munro微脓疡.
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蚯蚓蛋白对大鼠深Ⅱ度烫伤的促愈作用
蚯蚓,又名地龙,是我国的传统中药.现代药理学研究和临床应用证明蚯蚓具有增强免疫、促愈合、抗血栓、降压、解热镇痛、抗癌和抑菌作用,目前对蚯蚓的研究主要集中在其纤溶活性~([1,2]).中医治疗中将活蚯蚓跟白糖匀浆后外用治疗烫伤一直是经典药方,效果明显.为了深入挖掘蚯蚓促烫伤愈合的药理活性,拓展其药用领域,笔者对蚯蚓进行了分离纯化,并研究了纯化后的蚯蚓蛋白(EFP)对大鼠成纤维细胞(NIH3T3)的促进增殖作用及促进大鼠深Ⅱ度烫伤的愈合作用.
