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ABCG2基因rs2231142位点多态性与浙南地区人群原发性痛风的关系
目的 探讨三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2基因(ABCG2) rs2231142位点与浙南地区原发性痛风的相关性.方法 收集浙南地区原发性痛风样本508例和正常健康体检样本558例,用微滴式数字化PCR技术进行基因分型,分析该位点多态性与痛风的相关性.结果 痛风组尿酸、三酰甘油、胆固醇、尿素氮、肌酐以及收缩压水平显著高于正常组(P＜0.05).痛风组ABCG2基因rs2231142位点AA型和A等位基因频率显著高于正常组(P＜0.05).痛风组AA基因型/AC基因型尿酸、尿素氮和肌酐水平型显著高于痛风组CC基因(P＜0.05).结论 ABCG2基因rs2231142位点是浙南地区原发性痛风的易感基因位点,提示A等位基因提高了痛风患者的尿酸水平,携带AA基因型的个体更易患痛风.
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脑肿瘤干细胞耐药基因ABCG2的实验研究
目的 脑肿瘤耐药是否与其干细胞相关和耐药机制何在还不清楚,本实验旨在探讨脑肿瘤干细胞耐药的分子机制.方法 从人脑胶质瘤组织标本中分离CD133+细胞,在无血清条件下体外长期传代培养,取其中呈悬浮生长的细胞球,再用CD133免疫磁珠分离其中的阳性细胞在无血清条件下培养.将尼卡地平、米托蒽醌分别或联合作用于上述的培养细胞,观察细胞形态、增殖抑制和细胞凋亡率等变化.结果 经CD133免疫磁珠筛选过的细胞球在相差显微镜下观察到尼卡地平与米托蒽醌联合作用组细胞的细胞毒性非常明显,有的球体已崩解,增殖抑制很明显,并且对米托蒽醌呈浓度依赖性,在2.5或5.0μmol·L-1的尼卡地平协同下的米托蒽醌,于10-6～10μmol·L-1时对肿瘤细胞的增殖抑制呈浓度依赖性,与空白对照和单纯尼卡地平组相比均有统计学差异(P<0.01);而对未经CD133免疫磁珠筛选球体的抑制作用不显著.流式细胞仪检测表明,尼卡地平能协同米托蒽醌促进受试细胞的凋亡.结论 脑肿瘤干细胞高表达ABCG2是其耐化疗药物的原因之一,尼卡地平通过竞争性地抑制ABCG2作用而提高化疗药物的敏感性.
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三磷酸腺苷结合盒亚家族G超家族第二个成员（ABCG2）基因rs2231142多态性与痛风发病风险的Meta分析
目的：运用Meta分析方法探讨三磷酸腺苷结合盒亚家族G超家族第2个成员（ABCG2）基因rs2231142多态性与痛风发病的相关性。方法全面检索中外文数据库，合格研究的质量采用NOS量表评估。使用随机或固定效应模型计算比值比（OR），评估异质性和发表偏倚，对人种和性别进行了亚组分析。结果10个研究包括3478例痛风患者纳入Meta分析。rs2231142 A等位基因[OR=2.03，95%CI （1.77，2.34），P<0.01]和AA纯合子[OR=3.01，95%CI（2.34，3.88），P<0.01]携带者痛风发病风险更高，亚组分析结论类似。结论 ABCG2基因rs2231142多态性与痛风发病风险相关，该结论需扩大样本在不同人种人群中进一步验证。
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结直肠癌干细胞增殖及侵袭中ABCG2基因的效应
背景:ABCG2转运蛋白能介导多重耐药,高表达 ABCG2蛋白能提高干细胞对于化疗药物的耐受性,但是ABCG2基因对结直肠癌干细胞增殖、侵袭机制尚未证实.目的:探讨ABCG2基因在结直肠癌干细胞增殖、侵袭中的作用.方法:常规培养结直肠癌细胞系HCT116,将其随机分为4份:其中2份采用免疫磁珠法分离CD133阳性细胞(结直肠癌干细胞),分别用ABCG2-siRNA和ABCG2过表达质粒转染,构建结直肠癌干细胞ABCG2蛋白低表达与过表达模型,设为ABCG2蛋白低表达和过表达组;另2份HCT116细胞分别设为细胞正常组、空质粒转染后对照组.用 MTT、Transwell 法测定不同模型下结直肠癌干细胞的增殖、侵袭变化;利用酶联免疫吸附实验及PCR法测定两种不同细胞模型下基质金属蛋白酶与mRNA表达水平.结果与结论:①流式细胞仪检测显示CD133阳性细胞在结直肠癌细胞系HCT116中占2.4%,经免疫磁珠分选纯化后其比例升至94.51%,证实分离培养的细胞为结直肠癌干细胞;②转染前4组细胞MTT值比较无差异(P > 0.05);ABCG2蛋白低表达细胞模型转染后MTT值低于过表达组(P < 0.05);③Transwell结果表明:ABCG2蛋白低表达组细胞迁移能力受到明显的抑制;而ABCG2过表达组穿过基底膜数目相对较多,细胞的迁移及侵袭能力明显增强(P < 0.05);④酶联免疫吸附实验显示ABCG2蛋白低表达组基质金属蛋白酶水平低于过表达组(P < 0.05);PCR测试mRNA结果与酶联免疫吸附实验相似;⑤提示:下调ABCG2蛋白表达能抑制结直肠癌干细胞增殖、侵袭,ABCG2基因通过调控基质金属蛋白酶水平影响结直肠癌干细胞活性.
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ABCG2基因rs3114018单核苷酸多态性与武陵山地区痛风及高尿酸血症的相关性研究
目的:探讨三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2基因(ABCG2)rs3114018位点与武陵山地区原发性痛风和高尿酸血症的相关性.方法:采用Hi-SNP结合多重PCR技术和高通量测序技术,对159例原发性痛风患者、188例高尿酸血症患者和106例健康对照者的ABCG2 rs3114018位点进行基因分型,并分析不同等位基因或基因型与原发性痛风、高尿酸血症易感性的关系.结果:痛风组基因型频率与正常组相比差异具有统计学显著统计学意义(P<0.001),Logistic回归分析显示,基因型CC和C等位基因均是痛风的易感因素(OR=5.861,95％CI:2.239～15.340,P<0.001;OR=2.461,95％CI:1.671～3.622,P<0.001);高尿酸血症组基因型频率与正常组相比没有显著差异(P>0.05),该位点多态与高尿酸血症没有相关性(P>0.05);痛风组与高尿酸血症组相比,基因型频率具有统计学差异(P<0.001),基因型CC和C等位基因分别使痛风的发生风险增加了4.131倍和1.994倍.结论:ABCG2 rs3114018位点单核苷酸多态性可能与武陵山地区原发性痛风的发病相关,等位基因C可能是原发性痛风发病的危险因素,携带CC基因型的个体可能更容易患痛风;该位点多态性与高尿酸血症没有显著相关性.
关键词： 原发性痛风 高尿酸血症 ABCG2基因 rs3114018位点 单核苷酸多态性 -
高表达ABCG2基因对人原发性肝癌细胞SP表型的影响
目的 研究高表达ABCG2基因对人原发性肝癌细胞SP表型的影响.方法 构建pMSCVpuro-ABCG2逆转录病毒质粒,并转染至病毒包装细胞PT67中,将获得的病毒上清液感染人原发性肝癌non-SP(Side population)细胞,筛选稳定感染的细胞系non-SP-ABCG2和non-SP-puro,RT-PCR法检测细胞中ABCG2基因的转录水平,Western blot法检测细胞中ABCG2蛋白的表达水平,显微镜观察细胞形态的变化,Hoechst33342染色分析细胞的SP表型.结果 逆转录病毒质粒pMSCVpuro-ABCG2经双酶切及测序证实构建正确；non-SP-ABCG2细胞中ABCG2基因的转录和蛋白表达水平均较空载体pMSCVpuro转染的细胞non-SP-puro明显提高；non-SP-ABCG2细胞的形态发生改变,成梭形生长,偶见小三角样细胞,细胞生长缓慢,细胞间排列不紧密,并出现了SP表型.结论 ABCG2基因的高表达与细胞SP表型的形成具有一定的相关性,并能影响细胞的基本形态.
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结直肠癌干细胞微球体的培养及耐药机制
目的:建立结直肠癌HT29细胞微球体耐药模型,并初步探讨微球体对化疗耐药的分子作用机制.方法:人结肠癌HT29细胞以含表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的无血清培养液为介质,通过体外悬浮培养法进行微球体的培养;采用蛋白质印迹法检测微球体中干细胞相关核心蛋白和耐药蛋白的表达水平;以亲本HT29细胞为对照,相差显微镜下观察微球体在化疗药物作用下的形态学变化;通过特异性针对三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 (ATP-binding cassette subfamily G member 2,ABCG2)基因的siRNA沉默ABCG2的表达,并观察ABCG2基因沉默后微球体对化疗药物敏感性的影响.结果:HT29细胞能在含多种生长因子的无血清培养液中形成稳定传代的微球体,并有自我更新和分化的潜能;微球体中高表达干细胞核心蛋白CD133、C-myc和BMI-1以及耐药蛋白ABCG2和多药耐药1(multidrug resistance 1,MDR1)基因编码的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)(P 值均＜ 0.05),并对化疗药物[5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和奥沙利铂)]及靶向药物(西妥昔单抗)均具有一定的抵抗性;沉默ABCG2表达能够逆转微球体对化疗药物的耐药性.结论:无血清培养能够形成微球体,其具有肿瘤干细胞的分子特征和耐药特点,靶向抑制ABCG2表达能提高结直肠癌微球体对化疗药物的敏感性.
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抑制BMI-1表达可增强人肝癌细胞对多柔比星的敏感性
目的:研究RNA干扰技术抑制B细胞特异性小鼠白血病病毒插入位点1(Bcell-specific murine leukemia virus integration site-1,BMI-1)基因表达对肝癌细胞多柔比星(doxorubicin,Dox)化疗耐药性的影响及其相关分子机制.方法:建立Dox耐药的人肝癌细胞系MHCC-97H/Dox(简称97H/Dox),同时以其亲本细胞系MHCC-97H(简称97H)为对照;采用MTT、细胞克隆形成和Transwell侵袭实验分别检测细胞的耐药性、克隆形成能力和侵袭能力;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中肿瘤相关分子的mRNA和蛋白表达水平.采用小干扰RNA (small interference RNA,siRNA)瞬时转染的方法抑制2种细胞中BMI-1基因的表达,然后再用MTT法检测耐药细胞97H/Dox和亲本细胞97H对Dox的耐药性变化,以及采用蛋白质印迹法检测亲本细胞97H中肿瘤相关蛋白的表达变化.结果:肝癌耐药细胞系97H/Dox的耐药性稳定,并呈多药耐药特点,其克隆形成数也明显多于亲本细胞97H (P＜0.05);相对于97H亲本细胞,97H/Dox耐药细胞中BMI-1、ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)和金属基质蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)分子的表达水平上调(P值均＜0.05).siRNA介导的BMI-1基因沉默可以显著提高97H亲本细胞及97H/Dox耐药细胞对化疗药物Dox的敏感性(P值均＜0.05).在97H亲本细胞中,BMI-1基因沉默可显著降低磷酸化Akt (phospho-Akt,p-Akt)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phospho-c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)和ABCG2的表达水平(P值均＜0.05).结论:BMI-1基因表达上调可能参与97H细胞耐药性的获得,抑制BMI-1表达可增强该细胞对化疗药物Dox的敏感性.因此,干预BMI-1表达可能是提高肝癌化疗反应性的一个候选策略.
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新疆地区维吾尔族和汉族人群ABCG2基因rs2231142位点多态性与高尿酸血症的相关性
目的 探讨新疆地区维吾尔族和汉族人群ABC转运蛋白2(ABCG2)基因位点rs2231142的单核苷酸多态性(SNP)与高尿酸血症的关系.方法 选取2013年2～ 12月体检的维吾尔族和汉族人群作为研究对象,并依据尿酸水平以及纳入和排除标准分为高尿酸血症组和健康对照组;采集血液样本,提取全血基因组DNA,PCR扩增各组ABCG2基因rs2231142位点,并对扩增产物用多重高温连接酶检测反应(iMLDR)进行SNP检测.结果 总人群中汉族尿酸水平高于维吾尔族(t=10.595,P＜0.05);不同基因型(x2=46.007,P＜0.05)及等位基因(x2=17.924,P＜0.05)在两民族间的分布差异有统计学意义;维吾尔族和汉族高尿酸血症组尿酸水平均高于健康对照组(x2维 =7.796,P＜0.05x2汉=9.963,P＜0.05),两民族高尿酸血症组TT+GT基因型(x2维=12.02,P＜0.05;x2汉=12.28,P＜0.05)以及T等位基因(以=8.625,P＜0.05;x2 =12.05,P＜0.05)频率均显著高于健康对照组; Logistic回归分析发现GT+TT基因型分别使得两民族患高尿酸血症的危险性上升了2.45和1.103倍(维吾尔族OR =2.45,95％CI=1.187～5.054,P＜0.05,汉族OR=1.103,95％CI=1.00～1.026,P＜0.05).结论 ABCG2基因rs2231142位点SNP与维吾尔族和汉族高尿酸血症有一定关联,T等位基因可能是高尿酸血症的危险因素,G等位基因则可能是保护因素.
关键词： 高尿酸血症 ABCG2基因 rs2231142位点 维吾尔族 汉族 -
人大肠癌组织中ABCG2 mRNA的表达
目的:检测人大肠癌组织中耐药基因ABCG2 mRNA的表达并探讨其与临床病理特征的关系.方法:采用RT-PCR方法检测102例大肠癌组织(男60例,女42例;≥60岁63例,<60岁39例;乳头状腺癌21例,管状腺癌48例,黏液腺癌13例,腺鳞癌20例;肿瘤直径≥5 cm者58例,<5 cm者44例;高分化23例,中分化49例,低分化30例;有淋巴结转移72例,无淋巴转移30例;Duke's分期:A期14例,B期20例,C期42例,D期26例)及15例正常大肠黏膜组织中ABCG2 mRNA的表达.结果:大肠癌和正常黏膜组织中ABCG2 mRNA的阳性表达率分别为58.8%和0(P＜0.05).大肠癌组织中ABCG2 mRNA的阳性表达率与患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移情况、Duke's分期等均无关(P均＞0.05),与分化程度有关(P<0.05).结论:ABCG2的表达可以作为判断大肠癌分化程度及预测化疗效果的指标之一.
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结肠癌中ABCG2基因多态性与伊立替康疗效的相关性研究
目的 检测结肠癌中ABCG2基因SNP多态性,探讨其与伊立替康疗效的相关性.方法 收集该院2011年1月～2013年2月应用伊立替康治疗的结肠癌患者92例,34 G＞A、376 C＞T、421 C＞A位点SNPs多态性测定使用Real-Time PCR Taqman分析.结果 34 G＞A等位基因的频率为70.6％和29.4％,376 C＞T等位基因的频率为92.9％和7.1％,421 C＞A等位基因的频率为70.1％和29.9％.34 G＞A位点G/G、G/A、A/A基因型的临床获益患者分别占了68.2％、76.2％和66.7％,各基因型之间差异无显著性(P＞0.05).376 C＞T位点C/C、C/T和T/T基因型的临床获益患者分别占了72.8％、66.7％和50.0％,各基因型之间差异无显著性(P＞0.05).421 C＞A位点C/C、C/A、A/A基因型的临床获益患者分别占了88.6％、61.0％和42.9％,各基因型之间差异具有显著性(P＜0.05).结论 检测ABCG2基因421 C＞A位点SNP的多态性有利于伊立替康临床疗效的早期评估.
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同时具有3个基因异常的严重痛风一例及文献复习
目的 探讨常见的痛风基因在痛风中的作用.方法 报道1例同时具有3个基因异常的严重痛风患者,并以“ABCG2”“SLC2A9”“SLC22A12”“MTHFR”分别与“痛风/gout”或“高尿酸血症/hyperuricemia”组合作为关键词,在中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据库和Pubmed进行检索,收集并分析检索到的相关文献.结果 该例为29岁男性患者,具有脊柱和全身多关节痛风石,基因检测发现其同时存在ABCG2、SLC2A9和SLC22A12的异常变异,具体表现为ABCG2:421 C＞A(rs2231142);SLC2A9:881 G＞A(rs3733591);SLC22A12:831-192 C＞A(rs893006).文献检索结果显示,ABCG2和痛风/高尿酸血症英文文献137篇、中文文献11篇,SLC2A9和痛风/高尿酸血症英文文献138篇、中文文献8篇,SLC22A12和痛风/高尿酸血症英文文献139篇、中文文献4篇,MTHFR和痛风/高尿酸血症英文文献11篇、中文文献5篇.尚无报道同时具有ABCG2、SLC2A9和SLC22A12 3个基因异常的病例.结论 遗传因素在痛风和高尿酸血症中起着非常重要的作用,对于严重痛风患者应该及时进行基因检测.
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乳腺癌组织ABCG2基因启动子区甲基化状况与其表达
目的 研究多药耐药基因ABCG2启动子区甲基化状态与其在乳腺癌组织申表达的关系,探讨ABCG2基因表达的表现遗传学机制. 方法 采用甲基化特异性PCR(Methylafion sPec55c PCR,MSP)检测15例乳腺癌组织及配对癌旁组织中ABCG2启动子区-359-353两特异位点的甲基化情况,并经MSP产物测序检测位点的甲基化状态;用Q-PCR检测ABCG2基因mRNA的表达水平;并应用统计学Spearman等级相关性方法 分析二者的相关关系.结果 15例乳腺癌组织中有13例(86.67%)ABCG2基因启动子区的特异位点存在高甲基化(P<0.05),MSP产物的测序验证了特异位点的甲基化,并且mRNA表达水平相对增高,二者之间存在显著正相关性(r2=0.6842,P
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TSG101和ABCG2基因在结肠癌SP细胞增殖及耐药发生和发展中的作用
目的 探讨TSG101基因和ABCG2基因在结肠癌SP细胞的表达及对耐药性的影响.方法 用流式细胞仪从结肠癌组织标本中分离结肠癌SP细胞,并用裸鼠鉴定,将结肠癌SP细胞置于体外含长春新碱抗癌药物的培养液中进行细胞培养,观察SP细胞对常规抗癌药物的多药耐药现象,应用RT-PCR检测结肠癌SP细胞TSG101基因和ABCG2基因的表达.结果 从结肠癌组织中成功分选出结肠癌SP细胞,种植裸鼠皮下长出移植瘤；用MTT法检测发现,0.5 μg/mL浓度长春新碱对SP细胞的生长抑制作用不明显,其存活率约为81％,而对非SP细胞的抑制作用明显,其存活率仅为37％,差异有统计学意义；RT-PCR检测SP和非SP细胞TSG101、ABCG2基因表达差异均有显著性(P＜0.05).结论 TSG101和ABCG2在结肠癌增殖和耐药的发生和发展中有重要作用.
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胶质瘤SP细胞耐药靶分子ABCG2的实验研究
背景与目的:ABCG2是ATP转运蛋白(ATP binding cassette,ABC)家族中G2成员,具有编码乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)功能,在肿瘤研究中又可作为SP细胞标志蛋白来筛选肿瘤干细胞,本研究旨在逆转其耐药作用.方法:尼卡地平(NCDP)、尼莫司汀(ACNU)分别和联合作用于人脑多形性胶质母细胞瘤(GBM)体外细胞系和裸小鼠脑移植瘤.体外实验:用MTT比色法检测药物作用后GBM细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率;体内实验:观察荷瘤裸小鼠的生存期及移植瘤病理.结果:体外实验中,ACNU+NCDP组对肿瘤抑制和促进凋亡作用都显著高于ACNU组(P＜0.01).体内实验中,ACNU+NCDP组的生存期比ACNU组明显延长P＜0.01).结论:随着胶质瘤恶性程度增高而表达率增加的ABCG2耐药基因功能因被NCDP抑制后增强了ACNU对胶质瘤细胞的杀伤、促进凋亡和延长荷瘤鼠生存期的作用.
