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过表达miR-10b促进肺癌细胞系A549增殖
目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌及癌旁组织中miR-10b(miR-10b)表达水平及miR-10b是否通过调控锌指转录蛋白基因(KLF4)对肺癌细胞系A549恶性化的影响.方法 40例NSCLC患者病理切片,原位杂交检测肺癌及癌旁组织中miR-10b的表达量;对肺癌细胞系A549转染miR-10b mimics后,CCK-8法检测肺癌细胞增殖;real-time PCR及Western blot检测KLF4 mRNA及蛋白水平;软琼脂克隆形成实验检测过表达miR-10b对A549细胞的肿瘤恶性化程度的影响.结果 肺癌细胞A549及肺癌组织中miR-10b的表达量分别高于正常肺上皮细胞16HBE及癌旁组织;过表达miR-10b模拟物的A549细胞中,KLF4蛋白水平显著下降(P<0.05);过表达的miR-10b可显著增加A549细胞的增殖速度及在软琼脂内的成瘤性.结论 miR-10b在不同类型细胞及组织中具有分布差异性、可能是通过抑制KLF4的表达促进肺癌细胞增殖及恶性化.
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微小RNA-10b对肝癌细胞体外侵袭转移能力的影响
目的 探讨微小RNA (miR)-10b对肝癌细胞侵袭转移能力的影响.方法 通过Transwell小室基质侵袭和迁移实验检测不同肝癌细胞系的侵袭和迁移能力.qRT-PCR方法检测各肝癌细胞系中miR-10b的表达.通过体外转染法将化学合成的miR-10b的模拟体(mimics)瞬时转染至低表达miR-10b的HepG2细胞并检测侵袭和迁移能力的变化;瞬时转染miR-10b抑制剂(antagomir)至高表达miR-10b的MHCC97H细胞并检测侵袭和迁移能力的变化.利用免疫荧光染色和电镜观察细胞骨架变化.结果 miR-10b表达水平与肝癌细胞的迁移、侵袭能力相关.迁移、侵袭能力较弱的HepG2细胞miR-10b表达较低,而迁移、侵袭能力较强的MHCC97H细胞miR-10b表达较高.上调HepG2细胞miR-10b后迁移和侵袭能力明显增强,而下调MHCC97H细胞miR-10b后迁移和侵袭能力明显削弱.免疫荧光染色和电镜观察显示,转染miR-10b模拟物后,HepG2细胞的丝状伪足和板状伪足明显增多,而下调MHCC97H细胞miR-10b后,丝状伪足和板状伪足明显减少.结论 miR-10b可通过调控细胞微丝骨架参与人肝癌细胞体外侵袭转移,抑制其表达可能为肝癌治疗提供新的靶点.
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非小细胞肺癌组织miR-10b表达临床意义分析
目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织miR 10b的表达及其与临床病理因素的关系.方法:收集2005-01-01-2006-12-01中国医科大学附属第一医院病理科存档蜡块50例NSCLC和癌旁肺组织(距离癌组织＞3 cm),采用实时定量PCR检测NSCLC组织和相应癌旁组织中miR-10b的表达,分析miR-10b表达与临床病理参数的相关性,通过Kaplan-Meier进行生存分析.结果:50例NSCLC组织和相应癌旁组织中,34例癌组织miR-10b表达高于癌旁组织;癌组织miR-10b表达为1.55±0.57,相应癌旁组织为1.01±0.38,t=-2.182,P=0.034.miR-10b的表达水平与病理分期(U=189,P=0.010)和淋巴结转移(x2=6.650,P=0.010)呈正相关,而与其他临床病理因素如性别、年龄、发病部位、病理分型和分化等均无相关性.miR-10b高表达的NSCLC患者5年生存率为4％(1/25),明显低于miR-10b低表达患者的32％(8/25),x2=6.504,P=0.011.结论:miR-10b在NSCLC的发生发展中起着重要作用,可能成为NSCLC预后判断的指标,miRNA可能成为NSCLC分子诊断和靶向治疗的重要指标.
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Has-miR-10b与肿瘤侵袭性关系的研究进展
恶性肿瘤的侵袭转移能力是肿瘤治疗的一大难点.近些年来,小分子RNA(miRNA)的出现为研究肿瘤的发生及侵袭转移机制提供了新的思路和途径,微小RNA(miRNA)是一类内源性、保守、稳定的非编码短单链RNA,在转录后水平调节靶基因表达.miRNA在机体发育,细胞增殖、凋亡及肿瘤发生发展等生理和病理过程中发挥重要作用.miR-10b作为微小RNA家族中的一员,在肝癌、乳腺癌、胰腺癌、胶质瘤、垂体瘤、急性髓性白血病等肿瘤组织中都有异常表达,并且与肿瘤的侵袭性和远处转移有密切关系.
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miR-10b对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响
目的 探讨miR-10b在人肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法 搜集兰州军区乌鲁木齐总医院46例肝癌组织作为观察组,同期选取18例正常肝组织作为对照组,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测受试者miR-10b的表达水平,分析miR-10b表达与肝癌组织病理特征之间的关系;利用脂质体2000向肝癌细胞系HepG2转染人工化学合成miR-10b模拟物(miR-10b mimics)、miR-10b抑制剂(miR-10b inhibitor),同时设置阴性对照组(NC+脂质体2000),采用MTT实验检测HepG2肝癌细胞增殖能力,采用Transwell实验及细胞划痕实验检测HepG2肝癌细胞侵袭、迁移能力.结果 肝癌组miR-10b水平较对照组明显上调表达(P＜0.05),且肝癌转移组miR-10b水平明显高于未转移组(P＜0.05);miR-10b高表达组与低表达组患者性别、年龄、肿瘤分化程度、有无肝硬化以及肿瘤数量之间比较差异无统计学意义(P＞0.05),肝癌患者miR-10b表达与肝癌是否转移以及肝癌的美国癌症联合委员会(AJCC)分期有关,且肝癌转移患者miR-10b表达高于未转移患者(P＜0.05),Ⅲ～Ⅳ期患者miR-10b表达高于I～Ⅱ期(P＜ 0.05);miR-10b过表达组HepG2细胞增殖能力明显高于miR-10b抑制组,过表达阴性对照组与抑制表达阴性对照组HepG2细胞生长趋势接近一致;miR-10b过表达组HepG2细胞侵袭、迁移能力较过表达阴性对照组均明显增强,miR-10b抑制组HepG2细胞侵袭、迁移能力较抑制表达阴性对照组明显减弱,过表达阴性对照组与抑制表达阴性对照组HepG2细胞侵袭、迁移能力基本一致.结论 miR-10b在人肝癌组织中的表达水平明显高于正常肝组织,抑制miR-10b表达可有效降低肝癌细胞的增殖、侵袭及转移能力.
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MicroRNA-10b对人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响
目的 探讨MicroRNA-10b(miR-10b)对人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 应用Real-time PCR方法检测21例胃癌组织和癌旁正常组织中miR-10b的表达水平,应用Lipofectamine(R)LTX试剂将化学合成的miR-10b mimics和miR-10b inhibitor转染至胃癌SGC-7901细胞,采用MTT方法检测SGC-7901细胞增殖能力的变化,Transwell小室法检测SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的变化;应用Western Blot方法检测P21蛋白表达水平.结果 与正常组织相比,miR-10b在胃癌组织中的表达水平显著增高.与对照组相比,miR-10b表达沉默能够显著抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖、迁移和侵袭能力,显著增加P21的蛋白表达水平.miR-10b过表达的作用与之相反.结论 MiR-10b沉默抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖、迁移和侵袭可能与上调P21蛋白表达相关.
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miR-10b通过Twist调节鼻咽癌表达机制的研究
目的 探究miR-10b调节鼻咽癌促进鼻咽癌细胞转移的作用机制和其和Twist的作用关系.方法 采用脂质转染技术分别用miR10bmimics和mimics-NC及miR10binhibitor及Twist siRNA转染或共转染CNE-2Z细胞,应用qRT-PCR检测miR-10b的表达水平.结果 (1)miR-10bmimic组中miR-1 10b的表达明显高于NC组(P＜0.05),inhibitor组中miR-10b的表达明显低于NC组和miR-10b mimic组(P＜0.05),TwistsiRNA+miR-10bmimics组miR-10b的表达明显低于NC组和miR-10b mimic组(P＜0.05),inhibitor组和TwistsiRNA组miR-1 10b的表达没有明显差别表达(P＞0.05).(2)制作划痕2h后便有细胞越过划痕生长,4h后miR-10b mimic组细胞移动至划痕内生长的细胞数超过inhibitor组和TwistsiRNA组,至6h和8h再次计数,析因设计的方差分析结果显示,制造划痕2h-8h两组移动细胞数有显著差异(P＜0.05).结论 我们揭示了Twist诱导miR-1 10b表达,提高鼻咽癌细胞转移能力.
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miR-10b对滑膜成纤维细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及分子机制
目的:探讨miR-10b对类风湿性关节滑膜成纤维细胞(RA-FLS)炎性因子分泌、增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制.方法:首先,分离原代培养FLS细胞并进行microarray,筛选RA和OA中差异表达的miRNA分子.然后,用real-time PCR对筛选得到的结果进行验证,进而通过生物信息学分析、细胞转染等方法明确miR-10b在FLS细胞中下调的分子机制.后,采用MTT比色法、划痕实验和Transwell实验等检测miR-10b对其FLS细胞增殖、侵袭和迁移水平的影响.结果:与OA FLS相比,芯片筛选发现176条miRNA在RA-FLS中上调,204条下调;其中,miR-10b在RA-FLS细胞中受肿瘤坏死因子(TNF-α)等多种炎性因子以NF-κB依赖的方式进行调控;miR-10b的下游靶基因为TAK1和TLR4,通过对这两个靶基因的调控,miR-10b一方面可以促进TNF-α的分泌和NF-κB的活化入核,从而激发TNF-α→NF-κB→miR-1 0b→TNF-α/NF-κB环路;另一方面促进FLS表面TLR4的表达以及LPS对于FLS的刺激作用,激发LPS→NF-κB→miR-10b→TLR4环路.此外,miR-10b的下调可促进FLS细胞的增殖、侵袭和迁移.结论:miR-10b在RA-FLS细胞中显著下调,其通过参与信号环路的调节可影响FLS细胞的炎性细胞因子分泌及其增殖、侵袭和迁移.
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早期自然流产绒毛组织miR-10b表达及意义
目的:探讨miR-10b在早期自然流产绒毛中的表达及其临床意义.方法:应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测早期自然流产患者绒毛及正常早孕绒毛中miR-10b的表达水平；在滋养细胞系HTR8中上调miR-10b,研究miR-10b过表达滋养细胞的浸润功能改变.结果:①real-time PCR检测显示,miR-10b在早期自然流产患者绒毛表达(2.916±0.061)与正常早孕绒毛对照组(1.0±0.106)相比增高,差异有统计学意义(P＜0.001).②过表达miR-10b后,侵袭实验证实滋养细胞侵袭力明显增强.结论:miR-10b可能促进了滋养细胞浸润功能,参与了早期自然流产的病理过程.
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miR-10b在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理参数关系
目的 探讨miR-10b在乳腺癌组织中表达及其与乳腺癌临床病理特征之间的相互关系.方法 采用RT-qPCR法检测50例乳腺癌组织及癌旁乳腺组织中miR-10b的表达情况,分析miR-10b在乳腺癌组织中表达情况与乳腺癌临床病理特征之间的相关性.结果 miR-10b在乳腺癌组织中表达是癌旁乳腺组织的3.87倍,其中有、无淋巴结转移乳癌分别为癌旁乳腺组织的6.12倍和0.95倍;分析与乳腺癌临床病理特征的关系,发现随着肿瘤增大(T2~T4)、病理学分级增高(Ⅱ、Ⅲ级),腋窝有淋巴结转移、Her-2表达阳性、ER阴性及Ki-67数值(≥50%)增高,miR-10b表达均增多,均有相关性(P<0.05);与患者年龄、PR、P53的表达未显示出明显的相关性(P>0.05).结论 miR-10b在乳腺癌组织中表达显著增加,并且与乳腺癌的侵袭性生物学行为密切相关,提示miR-10b有可能成为临床判断预后的指标.
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miR-10b与乳腺癌侵袭及预后的相关性研究
背景与目的:miR-10b通过增加其下游转移基因RHOC的表达,影响肿瘤的转移和侵袭能力.本研究探讨miR-10b在乳腺癌石蜡组织中的表达及其与乳腺癌侵袭转移及预后的关系.方法:采用实时定量PCR (real-time qPCR)对60例乳腺癌患者原发肿瘤蜡块提取的RNA进行miR-10b表达水平的测定,MannWhitney-U非参数检验比较miR-10b表达水平和乳腺癌临床病理参数的关系,预后分析采用Kaplan-Meier生存分析和log-rank计算.结果:miR-10b表达水平与乳腺肿瘤的大小、淋巴结转移、组织学分级、激素受体状态、肿瘤病理分期、组织类型及是否复发等无明显关系(P＞0.05).Kaplan-Meier生存分析表明,miR-10b表达水平并不影响乳腺癌患者的生存期(P=0.485).结论:miR-10b表达在乳腺癌侵袭转移中的作用有限,并不是影响预后的主要因素,尚不足以作为基于石蜡组织标本的乳腺癌预测预后指标.
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MicroRNA-10b调控乳腺癌细胞生长增殖与凋亡的研究
研究MicroRNA-10b(miR-10b)对乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231的生长增殖和凋亡的调控作用.采用能模拟内源miR-10b的miR-10b模拟物以及能特异靶向敲除内源miR-10b的miR-10b抑制剂分别转染乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231.RT-PCR测定转染后细胞中miR-10b的表达水平,MTT检测miR-10b对细胞增殖活力的影响,流式细胞仪检测miR-10b对细胞周期和凋亡的影响.生物信息学软件预测miR-10b潜在的靶基因,3'UTR荧光素酶报告法验证其靶向性,Western blot检测caspase-3、P21的蛋白表达水平.研究证实,miR-10b模拟物上调乳腺癌中miR-10b的表达水平,与对照组相比,细胞增殖能力提高,细胞周期加速,细胞凋亡率降低;反之miR-10b抑制剂能显著下调miR-10b的表达,与对照组相比,细胞增殖能力降低,细胞周期阻滞,细胞凋亡率上调.初步探讨miR-10b的作用机制可能是通过靶向作用于TP53INP1,抑制细胞周期与凋亡关键蛋白caspase-3、P21的表达水平,从而促进乳腺癌的发生发展.
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MicroRNA-10b与三阴性乳腺癌预后的关系
目的 研究microRNA-10b(miR-10b)在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)组织中的表达,评估miR-10b判断TNBC预后的价值.方法 采用免疫组化SP法检测ER、PR和HER-2的表达,实时荧光定量RT-PCR检测miR-10b的表达,Kaplan-meier法分析miR-10b对TNBC生存时间的影响.结果 TNBC的发生率约为14.45%,miR-10b在有转移的TNBC组织中呈更高的表达,miR-10b的表达差异影响生存率高低.结论 miR-10b与TNBC转移有关,miR-10b可作为判断TNBC预后的新指标.
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microRNA-10b与肿瘤
microRNA-10b(miR-10b)是小分子RNA-microRNAs(miRNAs)的一种,是一类非编码的小分子RNA,在基因转录后的调控中发挥着重要作用.本文miR-10b与多种肿瘤之间不同程度的关系做一综述.
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miR-10 b对胃癌细胞侵袭迁移的影响
目的：分析miR-10b在胃癌组织中的表达情况；探讨miR-10b ASO对胃癌细胞侵袭和迁移的影响。方法运用RT-PCR检测120例胃癌组织及对应正常组织中miR-10b的表达；通过miR-10b ASO降低胃癌细胞中miR-10b的表达，采用transwell实验和划痕实验观察miR-10b ASO对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响，同时运用western blot的方法检测侵袭相关蛋白的表达变化。结果在120例胃癌病例中，48．33％（58／120）的胃癌组织 miR-10b 表达明显高于19．17％（23／120）对应正常癌旁组织（P＜0．05）。与空白对照组和转染随机ASO组相比，miR-10b ASO可以显著降低miR-10b的表达（ P＜0．05）；Transwell实验和划痕实验结果显示转染miR-10b ASO后，胃癌细胞的侵袭迁移能力下降明显，同时相关侵袭蛋白RHOC表达下降（P＜0．05）。结论 miR-10b在胃癌组织中表达上调，降低miR-10b表达可有效抑制胃癌细胞的侵袭和迁移。 miR-10b有可能成为胃癌侵袭转移调控的新靶点。
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miR-10b 在肾癌中的表达及临床意义研究
目的：检测35例肾癌标本及配对正常组织标本中 miR-10b 的表达,分析 miR-10b 表达水平与患者临床特征之间的关系,为 miR-10b后续功能研究奠定基础.方法提取35例手术切除的肾癌及癌旁正常组织标本中的总 RNA,反转录获得 cDNA,实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测 miR-10b的表达水平,统计分析其表达水平与患者临床病理特征之间的关系.结果35例组织标本中26例(74．29％)肾癌组织 miR-10b表达水平下降(P＜0．05),且下降和患者年龄、性别、肿瘤分期分级等无明显相关(P＞0．05).结论 miR-10b 在肾癌组织中表达明显下调,提示其与肾癌发生有一定关系.
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miR-10b、miR-18b及miR-130b在肺癌中的表达研究
目的 探讨miR-10b、miR-18b及miR-130b在肺癌中的表达特征及其在肺癌发生发展过程中的作用.方法 收集47例肺癌住院患者的癌组织和癌旁组织,利用Trizol提取总RNA,实时荧光定量PCR检测基因相对表达量.结果 肺癌组织与癌旁组织中miR-10b(t=2.83,P＜0.05)、miR-18b(t=2.88,P＜0.05)及miR-130b(t =2.46,P＜0.05)表达量均差异存在显著性.比较鳞癌、腺癌和癌旁组织中miR-10b(F =7.16,P＜0.05)、miR-18b(F =4.11,P＜0.05)及miR-130b(F =3.43,P＜0.05)的表达量也有显著性.癌组织中miR-10b与pri-miR-10b表达量存在负相关关系(r=-0.50,P＜0.05) . 癌组织与临床指标之间的关系中miR-18b、miR-130b与KI67呈正相关(P＜0.05),pri-miR-10b与TOPOⅡ、pri-miR-130b与MRP呈负相关(P＜0.05).结论 miR-10b、miR-18b及miR-130b在癌组织中表达量上调,可能具有促进肺癌发生发展的作用.
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唾液miR-10b对食管癌诊断及预后的预测价值
[目的]探讨唾液miR-10b对食管癌诊断及预后的预测价值.[方法]收集40例食管癌患者和40例健康对照组的唾液并提取总RNA,采用RT-PCR方法检测miR-10b表达量,并分析其对食管癌的临床病理特征、诊断及预后的关系.[结果]食管癌患者唾液上清及全唾液中miR-10b表达水平显著高于正常对照组(P＜0.0001),平均上调倍数分别为26.60倍和36.99倍,其诊断食管癌的敏感性和特异性分别为100.0％和77.5％、77.5％和97.5％.miR-10b的表达水平不受淋巴结转移、癌症分期的影响(P＞0.05).Kaplan-Meier分析表明唾液上清miR-10b低表达组(＜35.49±58.90)的生存时间长于高表达组(＞ 35.49±58.90,P=0.046).[结论]唾液中miR-10b是食管癌预测诊断的敏感性指标,唾液上清液中miR-10b表达量可作为评价预后的预测指标.
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microRNA －10b 与 microRNA －125a 在大肠癌组织及细胞株中的表达及意义
目的：探讨microRNA－10b（miR－10b）及microRNA－125a－5p（miR－125a－5p）在大肠癌组织及细胞株中的表达情况及其临床意义。方法应用实时定量聚合酶链反应（ RT－qPCR）方法检测37例大肠癌组织和癌旁正常组织及8种大肠癌细胞株（ Caco－2、DLD1、HCT116、HT29、LOVO、SW480、SW620、SW116）中的表达情况并分析其与临床病理资料的关系。结果 miR－10b及miR－125a－5p在37例大肠癌组织中的表达均明显低于正常对照组织（P＜0.01）；miR－10b的表达量与临床病理资料均无关（P＞0.05）；miR－125a－5p的表达与分化程度相关（P＜0.05），与性别、年龄、肿瘤部位等临床病理资料均无关（P＞0.05）。 miR－10b在除HT29外其余7种大肠癌细胞株中的表达明显低于正常细胞组织（P＜0.05）miR－125a－5p在8种大肠癌细胞株中的表达明显低于正常细胞组织（P＜0.05）。结论 miR－10b及miR－125a－5p在大肠癌的发生过程中发挥类似抑癌的作用；miR－125a－5p表达水平与分化程度相关，可帮助判断大肠癌恶性程度及推测预后。
关键词： 大肠癌 miR-10b miR-125a-5p RT-qPCR 细胞株 -
miR-10b介导乳腺癌转移的机制与靶向治疗
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,它的局部浸润和远处转移是目前治疗的难点.微小RNA (miRNA)在癌症中的功能研究,为肿瘤的发生及侵袭转移机制提供了新的思路.目前已研究发现miRNA家族中的miRNA-10b (miR-10b)通过三条通路介导乳腺癌的侵袭和转移.随着miR-10b的分子靶向药物如miR-10b阻断剂、CCN5激活剂、NSAID舒林酸(SS)的不断发现,miR-10b可能成为治疗乳腺癌转移的新靶点.该文就miR-10b在乳腺癌转移中的机制与靶向治疗作一综述.
