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天麻AFLP反应体系的建立及优化
近年来,随着分子标记技术在植物学研究方面的广泛应用,不少中药研究者也尝试把分子标记技术用于中药材资源的分子鉴定和道地药材的鉴定.
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含淀粉及多糖类中药材DNA的提取方法研究
DNA分子标记技术已广泛用于中药材研究领域中,如药用植物亲缘与进化关系、分类和鉴定、道地药材的研究等,这些工作多需提取高质量的基因组DNA.但由于中药材多为干品,其含有大量的次生代谢产物,特别是淀粉、多糖等物质严重影响了DNA的提取,常规方法均很难直接从含大量淀粉以及多糖的干燥中药材中提取理想的DNA.
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影响总DNA提取因素的探讨
在中药生药学和栽培学研究领域,DNA分子标记技术正逐渐被广泛采用,并成为解决问题的常用手段之一.众所周知,提取得到优质的DNA是研究的前提,作者一直关注这方面的动向,同时也进行过这方面的综述和探讨[1-3].
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微卫星DNA标记技术及其在蚊虫生物学研究中的应用
遗传标记是指用来区分不同的个体或群体,能够稳定遗传的物质或性状,是研究生物遗传学、发育生物学及分类学的重要工具.遗传标记经历了不同的发展阶段,20世纪70年代以来,随着限制性内切酶的发现和DNA重组技术的创立,遗传标记的研究重点转向遗传信息的载体--DNA分子,出现了多种分子遗传标记.常用的DNA分子标记技术有:DNA限制性酶切长度多态性(RFLP);数量可变的串联重复序列(VNTR)(主要包括微卫星和小卫星)分析;DNA序列分析以及基于PCR的随机扩增DNA多态性(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)和单链构象多态性(SSCP)等分析技术.DNA分子遗传标记,特别是微卫星DNA与其他遗传标记相比,具有稳定性高、信息含量高、种群中分布广泛等优点,正日益受到人们的重视.
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长爪沙鼠在生物医学中的应用及其生理生化研究进展
长爪沙鼠是一种抗旱能力强,具有独特的生物学特性的"多功能"实验用动物资源.本文对目前长爪沙鼠在生物医学研究中的广泛应用作简要介绍;同时就近年来国内外对长爪沙鼠的生长繁殖、生理生化以及分子生物学等方面的研究进展作综述.
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基于ISSR的甘肃中麻黄遗传多样性研究
目的 研究甘肃不同居群中麻黄Ephedra intermedia的遗传多样性.方法 应用ISSR分子标记技术对甘肃省11个居群的中麻黄样本进行分析,利用POPGENE 32软件分析Nei's基因多样性指数(H)等遗传信息参数,应用NTSYS软件构建亲缘关系UPGMA聚类图.结果 12条引物共检测到175个位点,其中多态性位点150个,多态位点百分率(PPL)为85.71%.中麻黄居群间的H为0.211 4,Shannon's多样性信息指数(D为0.332 1,种群间基因分化系数(Gst)为0.259 3,基因流(Nm)为1.428 6,遗传距离0.014 4~0.159 8.结论 甘肃中麻黄种群遗传多样性水平较高,但居群内遗传多样性水平低于居群间;中麻黄种群的遗传变异主要存在于居群内;亲缘关系与地理分布具有一定的相关性.
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RAPD技术在中药材鉴定中的应用进展
随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)技术是1990年由Williams等发展起来的一项DNA分子标记技术.RAPD技术是建立在PCR技术的基础上,用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基序列的寡核苷酸单链(一般为10 bp)作为引物,对所研究的基因组DNA进行单引物扩增.
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分子标记技术在木瓜属种质资源研究中的应用
DNA分子标记技术是比形态标记、生化标记和细胞标记更加理想的遗传标记技术,已经广泛应用于动植物的诸多研究中.对目前常用的DNA分子标记技术在木瓜属植物的品种鉴定、亲缘关系及遗传多样性分析等方面的研究进展进行了综述,旨在进一步开发和利用我国木瓜属种质资源.
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分子标记技术在寄生虫分类鉴定中的应用
寄生虫存生物学上有差异的亚种和株具有不同的致病性.其分类学对于寄生虫病的病原学、流行病学和防治等方面具有实际意义.DNA分子标记是以牛物大分子的多态性为基础的遗传标记,具备多态性高、无基凶多效性、能够明确辨别等位基因等优点.本文综述第1代(限制性片段长度多念性、随机扩增多态性DNA等)、第2代(微卫星锚定PCR、简单重复序列问扩增等)和第3代(单核苷酸多态性)分子标记技术在寄生虫分类鉴定中的应用.
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RCR Ribotying在细菌分子流行病学研究中的应用
细菌流行病学鉴定的分子标记技术迅速发展,常以染色体或染色体外DNA为材料,产生特异的或随机的多态性.如DNA限制性片段长度多态性分析(RFLP)、脉冲凝胶电泳技术是非常有效的,但二者都受到耗时及需要昂贵设备等因素的限制,不适于临床实验;rRNA基因的DNA探针技术也适于流行病学研究,但操作较烦琐;Srull[4]等率先把rRNA基因的限制性片段长度多态性(RFLP)分析应用于实践,并称为ribotyping.利用rRNA为基础的广谱探针,分析Southern杂交后呈现的染色体探针指纹谱,已被众多研究者用作描述细菌特征和菌株分型(ribotypes)的一种方法.
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药用植物分子生物学研究中的分子标记
目的了解分子标记在药用植物研究中的应用及进展.方法查阅本领域国内外文献并进行综述.结果分子标记在药用植物的鉴定、亲缘关系、起源进化、遗传多样性、基因定位及克隆、代谢途径的基因工程研究等方面有广泛的应用空间.结论合理运用分子标记技术将加快药用植物研究的步伐.
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分子标记技术在中药分类及资源保护中的应用进展
分子标记技术一般是指研究核酸及蛋白质等携带遗传信息的大分子特征的技术,分子标记可分为DNA分子标记和蛋白质分子标记.分子标记技术引入中药领域后被广泛地应用于分类、鉴别和保护等各个层面,受到越来越多的重视.本文将重点介绍在中药分类和资源保护方面的应用.
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道地药材质量评价的进展
道地药材指来源于特定产区的货真质优的生药,其质量问题一直为从事中药生产、使用、研究的人们所关注,从古至今,道地药材的质量评价有一个发展的过程,其发展程度受科学技术水平的制约.现代的分析技术.尤其是分子标记技术使得生药的质量评价具有了明确的标准性和可控性.
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中药鉴定学基源鉴定方法探讨
基源鉴定是中药鉴定学的核心内容之一.原植物、性状、显微、理化等四大鉴别法都可用于中药的基源鉴定,确定中药的品种,但各种方法的作用和特点不同.其中原植物和原动物鉴定是其它基源鉴定方法的基础.DNA分子标记是新发展的基源鉴定方法,由于不受环境因素、组织类型和发育阶段的影响而具有稳定性和客观性;其中DNA条形码技术由于具有通用性和国际共享的平台而成为中药基源鉴定实用和强大的武器.对于经过提取的中药提取物和中药制剂的原料药,色谱和色谱-光谱联用技术目前是基源鉴定的佳选择.
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分子标记中植物DNA提取方法的研究进展
自20世纪80年代初,分子生物学大量运用于植物研究领域后,DNA分子标记不仅在农业上对植物选种、育种和改良等方面的应用稳步增长,而且在中药资源、鉴定、栽培等方面也有着很好的发展前景.在一般情况下,DNA分子标记技术涉及的分子生物学原理比较简单,实验方法也不复杂,但熟练掌握、灵活运用,并有效地解决实验中出现的各种情况,仍有许多问题值得重视.其中,如何有效地提取高质量的植物DNA已成为生物化学研究的一个重要方面.DNA是遗传信息的载体,是重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此DNA的提取应是分子生物学实验技术中的重要、基本的操作,如不能有效地完成DNA提取,那就无法进行分子生物学方面的实验.植物DNA的有效提取,根据不同研究需要,应保证结构的相应完整性;应尽量排除其他大分子成分的污染(蛋白质、多糖及RNA等);应保证提取样品中不含对酶有抑制作用的有机溶剂及高浓度的金属离子,尽可能少地降解.提取DNA的质量一般采用核酸蛋白质分析仪检测.植物DNA的有效提取,它是进行任何DNA工作的前提和基础,也是关键的一步.
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半夏人工栽培技术及分子标记技术研究新进展
半夏作为一种传统的中药材,具有很重要的药用价值.近年来,由于野生半夏资源遭到严重破坏,半夏的人工栽培技术引起了广泛关注,根据半夏的生物学特性及适宜的环境条件,制定出一套符合GAP原则的SOP技术体系,提高半夏的产量和品质以及有效的保护野生植物资源,是目前面临的主要任务.本文就近几年半夏生产中的高效栽培技术和遗传基因的分子标记技术的研究进行综述.
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应用RAPD技术对溪黄草基原植物分类鉴定
目的:用分子标记技术对中药溪黄草的基原植物分类鉴定.方法:用离心柱法提取5种溪黄草基原植物基因组DNA,用85个10 bp的寡核苷酸随机引物进行PCR(聚合酶链式反应),将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,分析电泳图谱.结果:从85条随机引物中筛选出了12条多态性较好的引物,其中7个引物的扩增图谱表现较好的多态性,且重复性较好.结论:RAPD技术可以成功鉴定溪黄草药材基原.
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采用ISSR分子标记法鉴别道地药材化橘红
目的 探索用ISSR分子标记方法在核酸分子水平上鉴别道地药材化橘红.方法 从20条ISSR引物中筛选合适的引物对化橘红、橘子、柚子等共16个样品进行PCR扩增及电泳分析,寻找特征位点.结果有2条ISSR引物扩增出较为明显的多态性特征条带,可单独或联合应用鉴别化橘红.结论 ISSR作为一种简便、可靠的分子标记方法,可用于化橘红的鉴别.