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石蒜碱诱导肺癌A549细胞凋亡作用研究
为探讨石蒜碱诱导肺癌A549细胞的凋亡作用及其机制.该研究以肺癌A549细胞为实验对象,通过不同浓度的石蒜碱(0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 μmol·L-1)处理A549细胞,MTT观察细胞增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双标法检测细胞的凋亡率;酶标仪检测凋亡因子Bcl-2,Bax,p53的活性;流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位变化;Real-time PCR检测凋亡相关基因Bcl-2,Bax,p53和Survivin的表达.研究结果表明:石蒜碱可显著抑制A549细胞增殖(P＜0.05)、诱导A549细胞凋亡(P＜0.05).同时增强Bax和p53的活性,降低Bcl-2活性和线粒体膜电位,显著改变Bcl-2,Bax,p53和Survivin的基因表达(P＜0.05).综上表明石蒜碱可诱导A549细胞凋亡,具有治疗肺癌的应用前景,其机制可能与其调节Bcl-2信号通路中相关因子活性有关.
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金花石蒜离体培养及快速繁殖
金花石蒜Lycoris aurea Herb属石蒜科石蒜属多年生草本植物,别名忽地笑、龙爪花、大毒蒜.其鳞茎有毒性,含有石蒜碱、石蒜胺碱、加兰他敏、多花水仙碱等10多种生物碱,具有较高的药用价值~[1].
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基于线粒体靶向机制的石蒜碱抗肝癌作用研究
目的 研究石蒜碱诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的作用及其机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测石蒜碱对HepG-2细胞的生长抑制作用;倒置显微镜、荧光显微镜观察HepG-2细胞凋亡形态;透射电镜观察HepG-2细胞超微结构;流式细胞术检测HepG-2细胞凋亡率;激光共聚焦扫描显微镜检测线粒体膜电位;激光共聚焦显微镜检测HepG-2细胞线粒体膜通透性转换孔(MPTP);酶标仪检测Caspase-3蛋白活性;Western blotting法检测细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cyt-C、Caspase-9的表达.结果 石蒜碱对HepG-2细胞具有生长抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为5.73μmol/L;形态学观察发现石蒜碱作用48 h后,细胞生长密度变疏、皱缩,且细胞生长呈现不规则形状,出现凋亡小体,随着给药浓度升高,凋亡小体也逐渐增多;透射电镜下可见细胞出现典型的凋亡特征;与对照组比较,随着石蒜碱给药浓度的增加,细胞凋亡率随之升高,线粒体膜电位下降,MPTP开放;石蒜碱作用48 h后,HepG-2细胞内Caspase-3蛋白相对活性升高,细胞内Cyt-C蛋白、Caspase-9蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达量降低,Bax蛋白表达量升高,且呈浓度依赖性关系,与对照组比较,具有统计学意义;结论 石蒜碱对HepG-2细胞具有生长抑制作用,并可通过启动线粒体途径诱导HepG-2细胞发生凋亡.
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高效液相色谱法测定雪峰山不同海拔忽地笑石蒜碱和加兰他敏含量
建立了测定忽地笑鳞茎中石蒜碱和加兰他敏含量的高效液相色谱分析方法,同时应用该方法测定了雪峰山不同海拔高度忽地笑居群鳞茎中石蒜碱和加兰他敏含量.色谱柱Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm),检测波长288 nm,流动相0.1％磷酸水溶液-甲醇(65:35),柱温25℃,流速1.0 ml/min,进样量20μL.研究结果表明,不同海拔忽地笑居群鳞茎中石蒜碱和加兰他敏含量存在一定差异,其中海拔678 m忽地笑居群鳞茎中石蒜碱和加兰他敏含量均高,分别约为445.23 μg/g和75.71 μg/g,与其它海拔居群相比,差异显著.该方法精确、简便、灵敏度高.雪峰山地区海拔约678 m地带较适于以提取石蒜碱和加兰他敏为目的忽地笑栽培.
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抗癌营养配餐自己做
星期一早餐:低脂牛奶、含麦麸的面包、番茄、鸡蛋.低脂牛奶可以保护胃黏膜,使胃黏膜免遭致癌物质的侵袭.麦麸所含的纤维素可使食物不断通过大小肠,减少致癌物与肠接触的机会和时间,免患肠癌.番茄中的石蒜碱是降低癌症危险的一种抗氧化剂.
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二氢石蒜碱对家兔脑血管的选择性作用特点
背景:二氢石蒜碱在外周能抑制交感神经末梢释放儿茶酚胺,阻断α,β肾上腺素能受体,具有扩血管、降血压,抗缺糖、缺氧作用.目的:应用重酒石酸去甲肾上腺素和KCl引起血管收缩反应,观察二氢石蒜碱对家兔脑基底动脉、胸主动脉及心室乳头肌的选择性作用.设计:观察性对比实验.单位:郧阳医学院药理教研室.材料:实验于2001-03/07在郧阳医学院药理教研室的科研室进行,选择46只成年健康新西兰白兔.方法:新西兰白兔在麻醉下耳缘静脉注射10 mL空气处死,迅速取出脑、胸主动脉及心脏.将基底动脉、胸主动脉制成4.0～5.0mm的血管环,打开心脏分离心室乳头肌,分别连接张力换能器.实验观察:①记录重酒石酸去甲肾上腺素或KCl单用时收缩曲线的变化:胸主动脉给予重酒石酸去甲肾上腺素0.1 mmol/L或KCl60mmol/L引起血管亚大收缩,待收缩曲线平稳后,分别用累积法加入不同浓度的二氢石蒜碱或尼莫地平.基底动脉给予重酒石酸去甲肾上腺素0.1 mmol/L或KCl 60 mmol/L,待血管收缩达峰值后,冲洗液每20 min换1次,共3次.再用不同浓度二氢石蒜碱或尼莫地平,20 min后再加入重酒石酸去甲肾上腺素或KCl,待曲线平稳后,观察每单剂药物所致收缩曲线的变化.②记录电刺激心室乳头肌时收缩的幅度变化:1次/s,波宽3 ms,阈电压的120%强度电刺激以引发心室乳头肌同步收缩活动,待收缩曲线平稳后,分别用累加法加入二氢石蒜碱或尼莫地平.主要观察指标:①离体基底动脉、胸主动脉及心室乳头肌收缩张力变化.②二氢石蒜碱或尼莫地平对重酒石酸去甲肾上腺素或KCl所致家兔血管环收缩的半数有效浓度值.结果:46只家兔离体基底动脉、胸主动脉及心室乳头肌标本均进入实验分析.①二氢石蒜碱使基底动脉静息张力升高,尼莫地平则使其降低,对胸主动脉无影响.②重酒石酸去甲肾上腺素、KCl所致基底动脉及胸主动脉收缩,二氢石蒜碱使之呈剂量依赖性松弛,其半数有效浓度值:对基底动脉分别为(6.69±3.12)×10-,(3.41±1.52)×10-3 mmol/L;对胸主动脉分别为(1.49±0.59)×10-3,(2.91±0.99)×10-3 mmol/L.拮抗重酒石酸去甲肾上腺素所致基底动脉收缩作用明显强于KCl.尼莫地平对KCl所致收缩的抑制显著强于对重酒石酸去甲肾上腺素.③重酒石酸去甲肾上腺素或尼莫地平对电刺激诱发心室乳头肌的收缩均有剂量依赖性抑制作用,二氢石蒜碱对电刺激诱发心室乳头肌收缩的半数有效浓度显著高于重酒石酸去甲肾上腺素所致基底动脉.结论:二氢石蒜碱对家兔基底动脉有明显的选择性作用,在基底动脉可能存在使该血管平滑肌收缩的α1受体亚型和使之舒张的β受体.二氢石蒜碱作用可能与对这些受体的阻断作用相关.其选择性作用可能有助于改善缺血区的血液供给.
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石蒜碱2唱位羟基构型翻转的探索
目的：对石蒜碱2唱位羟基构型翻转的研究，为化合物asiaticumine B的半合成提供基础。方法通过氧化再还原的方法，探索石蒜碱2唱位羟基构型的翻转。结果完成了石蒜碱2唱位羟基构型翻转，总收率49％。结论探索出一种高效便捷的对石蒜碱2唱位羟基构型翻转的方法。
关键词： 石蒜碱 asiaticumine B 构型翻转 -
石蒜碱对人白血病U937细胞的凋亡诱导及作用机制
分别采用MTT试验和流式细胞仪观察石蒜碱对U937细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用;应用west-ern bIot法观察石蒜碱对U937细胞bcl-2、Mcl-1、bcl-Xl蛋白表达和poly-(ADP)ribIose polymerase(PARP)蛋白剪切的影响.结果石蒜碱可明显抑制U937细胞增殖并诱导细胞凋亡,其细胞增殖的半数抑制浓度(IC50)为2.42 Μm;石蒜碱可抑制Md-1、bcl-Xl蛋白表达,对Mcl-1蛋白的抑制作用先于PARP蛋白剪切,对bcl-Xl蛋白的抑制发生在PARP剪切片段出现之后.认为石蒜碱可用于治疗异常高表达Mcl-1蛋白的相关肿瘤.
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石蒜药用验方
石蒜又名龙爪花、蟑螂花.多年生草本,地下有球形鳞茎,外包暗褐色膜质鳞被.秋季先叶开花,花通常4～6朵排成伞形,着生在花茎顸端,花被红色,向后开展卷曲,边缘呈皱渡状.花后生带状叶,至翌春末枯死.广布于我国西南至东南部,多生长于低谷、丘陵的山坡、林缘以及路旁较潮湿处.鳞茎有毒,含石蒜碱,可供药用或做农药.
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石蒜碱对肾癌细胞ACHN具有明显的抗肿瘤作用
目的：探讨石蒜碱对肾癌细胞ACHN的作用及可能机制。方法流式细胞仪分析石蒜碱对ACHN细胞周期及凋亡的影响；MTS检测石蒜碱对ACHN细胞增殖的作用；划痕实验、Transwell实验检测石蒜碱对ACHN细胞迁移、侵袭能力的影响；平板克隆形成检测石蒜碱对ACHN细胞集落形成能力的影响；qRT-PCR分析基因转录的变化；Western blotting分析蛋白表达水平的变化。结果石蒜碱对ACHN半数抑制浓度为24.34μmol/L。石蒜碱能将肾癌ACHN细胞剂量依赖性阻滞于G0/G1期（P<0.01）；与正常对照组相比，5μmol/L石蒜碱即能诱导ACHN细胞凋亡（P<0.01）、抑制ACHN细胞增殖（P<0.01）；处理后ACHN细胞迁移能力（P<0.01）、侵袭能力（P<0.01）显著下降、集落形成能力亦呈剂量依赖性降低。qRT-PCR及Western blotting显示5μmol/L的石蒜碱即能在基因及蛋白水平上调CDK4、Bax表达，而下调CyclinD1、Bcl-2、Survivin的表达；caspase-3基因表达增加，caspase-3蛋白水平变化却不甚明显。结论石蒜碱对肾癌ACHN细胞具有明显的抗肿瘤效应，该药可为肾癌的治疗提供新思路。
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石蒜碱诱导结肠癌HT-29细胞凋亡机制研究
目的 探讨石蒜碱诱导结肠癌HT-29细胞凋亡及机制.方法 不同浓度的石蒜碱处理体外结肠癌HT-29细胞,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪和Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;Real time PCR实验检测Caspase-3、Bcl-2和Bax的mRNA水平;Western blot方法检测Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的水平.结果 48h时石蒜碱对HT-29细胞IC50为8.8781μmol/L;与对照组比较,1.251μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L石蒜碱能诱导细胞凋亡(P＜0.05),上调Caspase-3、Bax的mRNA和Caspase-3、Bax蛋白水平,下调Bcl-2的mRNA和Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 石蒜碱能通过调节Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达水平,抑制结肠癌HT-29细胞生长,诱导细胞凋亡,具有明显的体内抗肿瘤作用.
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石蒜碱脂质纳米乳的制备及抗肿瘤活性的初步研究
目的 制备石蒜碱脂质纳米粒,考察体外抗肿瘤活性.方法 制备石蒜碱-油酸复合物,溶剂注入法制备纳米乳,超滤法测定包封率,MTT法初步考察纳米乳的抗肿瘤活性.结果 制备的纳米乳颗粒圆整均匀,形态良好,包封率为82％±1.4％,粒径为91.9±4.0 nm,PDI为0.171±0.013,Zeta电位为-50.4 ±5.4 mV.纳米乳较原药能更好抑制肿瘤细胞增殖.结论 溶剂注入法制备的石蒜碱脂质纳米乳包封率较高,粒径大小分布均匀,较原药具有更强的抗肿瘤活性.
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石蒜碱通过下调细胞周期蛋白D1表达抑制SGC-7901胃癌细胞增殖并促进其凋亡
目的 探讨石蒜碱对胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响.方法 CCK-8法检测(0、2、4、8)μnnol/L石蒜碱对SGC-7901细胞增殖的影响,确定石蒜碱的半数抑制浓度(IC50).以IC50的石蒜碱处理SGC-7901细胞48 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1) mRNA水平,Western blot法检测cyclin D1蛋白水平.结果 石蒜碱能够明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,且呈浓度、时间依赖关系.石蒜碱处理24、48 h,对胃癌细胞的IC50分别为(20.85±2.36) μmol/L和(13.29±1.28) μmol/L.采用13 μmol/L石蒜碱处理SGC-7901细胞48 h,可将其细胞周期阻滞在G0/G1期并促进细胞凋亡,且细胞cyclin D1 mRNA和蛋白水平明显降低.结论 石蒜碱能够抑制SGC-7901胃癌细胞增殖,诱导细胞周期阻滞在G0/G1期并促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调cyclin D1表达有关.
关键词： 石蒜碱 胃癌 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期蛋白D1(cyclin D1) -
石蒜碱药理作用的研究进展
石蒜碱是石蒜科中的活性生物碱成分,经研究发现石蒜碱具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、镇痛等作用,本文对近年来研究发现的石蒜碱药理作用进行了归纳,为石蒜科生物碱进一步利用提供参考.
