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荆芥挥发油对大鼠胸腔白细胞5-脂氧酶活性的影响
目的:探讨荆芥挥发油对5-脂氧酶(5-LO)活性的影响,以期进一步阐明其干预花生四烯酸代谢的抗炎机制.方法:以角叉菜胶急性胸膜炎模型大鼠的胸腔白细胞为基本反应体系,分别加入外源性花生四烯酸(AA)与不同质量浓度的荆芥挥发油(0.011,0.022,0.043,0.087,0.179,0.255,0.364 g·L-1)、齐留通(0.625×10-3g·L-1),在钙离子载体A23187盯诱导下,提取完整白细胞的5-LO代谢产物白三烯B4(LTB4)和5-羟基二十碳四烯酸(5-HETE),运用反相高效液相色谱(RP-HPLC)紫外检测分离测定LTB4和5-HETE水平.结果:荆芥挥发油在0.022～0.364 g·L-1内,对大鼠胸腔白细胞LTB4与5-HETE的生物合成均呈现显著性的抑制作用(P＜0.05或P＜0.001),并表现出剂量依赖性,其对LTB4与5-HETE生成的IC50分别为0.124 g·L-1和0.142 g·L-1.结论:荆芥挥发油体外可剂量依赖性地抑制大鼠胸腔白细胞花生四烯酸代谢酶5-LO的活性,表明其良好的抗炎作用与抑制5-LO活性,减少致炎物质LTB4的生成有关.
关键词： 荆芥挥发油 5-脂氧酶 白三烯B4 5-羟基二十碳四烯酸 反相高效液相色谱 -
5-脂氧酶与小鼠肺部感染的关系
目的 探讨小鼠肺组织内5-脂氧酶(5-LO)与呼吸道感染的关系. 方法采用免疫组织化学方法检测24只小鼠肺组织内5-LO的表达. 结果感染组小鼠5-LO阳性强度比未感染组高;治疗组小鼠5-LO的表达强度降低. 结论小鼠肺组织5-LO的表达强度,对临床及科研中肺感染疗效的评价有一定参考价值.
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脑出血大鼠脑组织5-脂氧酶的表达及黄芪多糖的干预作用
脑出血后病情的恶化往往与继发性脑水肿有关.脑水肿的形成涉及到炎性反应在内的复杂的病理生理学过程.5-脂氧酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)是催化花生四烯酸(arachidonic acid, AA)生成白三烯类(leukotrienes, LTS)的关键酶, 其产物中半胱氨酰白三烯类可诱导强烈的炎性反应.
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银杏内酯B对大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶和细胞内钙水平的影响
目的 观察银杏内酯B对大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶及细胞内钙水平的影响。方法 反相高效液相色谱及Fura-2/AM荧光指示剂法。结果 银杏内酯B在0.1-10 μmol*L-1范围内，使花生四烯酸释放量降低10.9%-22.2%；0.1-50 μmol*L-1时，LTB4和5-HETE生成量分别降低29.4%-88.6%和26.2%-89.3%；在0.1-100 μmol*L-1使PAF和fMLP刺激引起的细胞内游离钙浓度分别降低13.9%-51.4%和2.2%-36.6%。结论 银杏内酯B能抑制体外大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶的活性及细胞内游离钙浓度的升高。
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穿心莲内酯衍生物对花生四烯酸致炎抑制作用的研究
目的:研究穿心莲内酯衍生物对花生四烯酸致炎抑制作用.方法:通过花生四烯酸(AA)致小鼠耳肿胀实验研究穿心莲内酯衍生物不同剂量(230,460和920 mag· kg-1)对耳肿胀的抑制作用,在细胞水平研究穿心莲内酯衍生物(12.5,25和50 μmol·L-1)对环氧酶-2(COX-2)和5-脂氧酶(5-LOX)表达和前列腺素E2(PGE2)和白三烯B4(LTB4)的产生的影响.结果:穿心莲内酯衍生物(460和920 mg· kg-1)能够抑制花生四烯酸致小鼠耳肿胀(P＜0.01)、耳片中前列腺素E2(PGE2)和白三烯B4(LTB4)的产生(P＜0.05).在细胞水平穿心莲内酯衍生物(25和50 μmol·L-1)能够抑制环氧酶-2(COX-2)和5-脂氧酶(5-LOX)表达(P＜0.001)和前列腺素E2(PGE2)和白三烯B4(LTB4)的产生(P ＜0.001).结论:穿心莲内酯衍生物对花生四烯酸致炎有抑制作用.
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炒紫苏子醇提物对5-脂氧酶活性和LTB4释放的影响
目的 探讨炒紫苏子醇提物对5-脂氧酶(5-LO)的抑制作用.方法 大鼠胸腔内注入致炎物质(角叉菜胶),制备多形核粒细胞悬液,超声破碎,得到5-脂氧酶粗提物,设阴性对照组、紫苏子12.8,25.6和51.2 mg·L-1、木犀草素5组,EHSA法检测LTB4释放水平;体外观察炒紫苏子醇提取物对5-LO和15-LO酶活性的抑制作用.结果 12.8,25.6和51.2 mg·L-1炒紫苏子醇提取物及木犀草素能够明显抑制胸腔多形核粒细胞悬液LTB4释放(P值均＜0.01),抑制率分别达到75.06%,79.04%,81.26%,81.43%;炒紫苏子醇提取物对5-LO酶活性具有明显的抑制作用,其IC50为79.73 mg·L-1.结论 紫苏子醇提取物能够抑制5-脂氧酶酶活性.
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咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的保护
背景：咖啡酸苯乙酯可抑制大鼠脑损伤后的脂质过氧化和脑损伤，但是在帕金森细胞模型中，5-脂氧酶和白三烯的变化规律，以及咖啡酸苯乙酯是否通过抑制鱼藤酮诱导的5-脂氧酶和白三烯变化而发挥对帕金森样损伤的保护作用，仍有待进一步研究。
目的：探讨咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的保护作用，同时观察5-脂氧酶是否参与帕金森细胞模型的损伤。
方法：①取生长状态良好的PC12细胞，分5组培养，分别以0，0.01，0.1，1，10μmol/L鱼藤酮干预，24，48 h后，观察细胞形态及活性变化，选择佳诱导帕金森细胞模型的鱼藤酮浓度；24 h后， Western法检测5-脂氧酶表达，ELISA法检测半胱氨酰白三烯生成释放量；②取生长状态良好的PC12细胞，分6组培养，以正常培养的细胞为空白对照，其余5分别加入0，0.01，0.1，1，10μmol/L咖啡酸苯乙酯预处理30 min，之后加入1μmol/L鱼藤酮，24 h后，检测细胞活性，ELISA法检测半胱氨酰白三烯生成释放量。
结果与结论：①0.1-10μmol/L鱼藤酮可诱导PC12细胞损伤，1μmol/L鱼藤酮处理24 h后的细胞形态和细胞存活率变化适度明显，所以选择该条件作为鱼藤酮诱导PC12细胞帕金森样损伤的细胞模型；②鱼藤酮呈浓度依赖性增加5-脂氧酶的表达与半胱氨酰白三烯的生成释放；③1-10μmol/L 咖啡酸苯乙酯可降低鱼藤酮诱导的PC12细胞半胱氨酰白三烯生成释放量增加，呈浓度依赖性抑制鱼藤酮诱导的PC12细胞存活率降低；④结果表明，5-脂氧酶参与鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的损伤作用，咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的损伤有明显保护作用。 -
维药罗勒提取物对小鼠巨噬细胞RAW264.7生长及其胞内5-脂氧酶活性的影响
目的 观察罗勒提取物对小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)生长及其胞内5-脂氧酶活性的影响.方法 采用MTT比色法检测罗勒乙酸乙酯提取物或罗勒正丁醇提取物对正常RAW264.7细胞和经脂多糖刺激的RAW264.7细胞生长的影响,求出其IC50值；用罗勒乙酸乙酯提取物或罗勒正丁醇提取物分别干预经脂多糖处理的RAW264.7细胞,采用ELISA法测定并比较上清液中白三烯B4的质量浓度,求出其抑制率.结果 罗勒乙酸乙酯提取物和罗勒正丁醇提取物对正常RAW264.7细胞的生长有不同程度的抑制作用,给药时间为24h的IC50值分别为312.5 μg/mL、350.9μg/mL,具有浓度依赖性；两种提取物对经脂多糖刺激的RAW264.7的生长有一定的增殖作用(P＜0.05)；罗勒乙酸乙酯提取物和罗勒正丁醇提取物对白三烯B4的大抑制率分别为42.78％、38.63％,其中罗勒乙酸乙酯提取物的作用强于罗勒正丁醇提取物(P＜0.05).结论 罗勒提取物体外对经脂多糖刺激的RAW264.7细胞生长的大抑制质量浓度为100 μg/mL,对细胞内5-脂氧酶活性具有抑制作用.
关键词： 罗勒 RAW264.7细胞 脂多糖 5-脂氧酶 -
去甲二氢愈创木酸部分抑制大鼠局灶性脑缺血后炎症反应
本实验旨在观察去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)对大鼠局灶性脑缺血后炎症细胞聚集的作用及其机制.在大鼠大脑中动脉阻塞30 min后进行再灌注72 h,在再灌注30 min,2、24、48 h时分别腹腔注射一次NDGA(5、10 mg/kg).再灌注72 h后检测脑损伤、内源性IgG渗出、中性粒细胞和巨噬细胞/小胶质细胞聚集、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA和蛋白表达,并在再灌注3 h后检测脑内5-脂氧酶(5-lipoxygenase,5LOX)的催化产物白烯B4(leukotriene B4,LTB4)和半胱氨酰白三烯(cysteinyl leukotrienes,CysLTs)含量.结果显示:NDGA能显著改善脑损伤,减少内源性IgG渗出、中性粒细胞浸润、ICAM-1 mRNA和蛋白表达,同时降低脑内LTB4和CysLTs含量,但对巨噬细胞/小胶质细胞聚集没有影响.上述结果提示,NDGA对脑缺血亚急性期炎症反应的抑制主要表现为减少中性粒细胞浸润,机制可能与抑制5-LOX激活有关.
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5-LOX 在脑缺血损伤和帕金森病病理过程中的作用
脑缺血损伤和帕金森病（Parkinson's disease，PD）是中老年人常见的中枢神经系统疾病，神经炎症是脑缺血和帕金森病的基本病变。5-脂氧酶（5-LOX）是炎症介质半胱氨酰白三烯（ CysLTs）合成的限速酶。近的研究已经表明，5-LOX在脑缺血损伤和PD病理过程中发挥重要的调节作用。
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5-脂氧酶与脑缺血炎症反应的关系
炎症反应在脑缺血损伤中发挥重要作用.5-脂氧酶是代谢花生四烯酸产生炎症介质白三烯类的关键酶,其产物中半胱氨酰白三烯可诱导强烈的外周及中枢炎症性病变.因此,深入了解5-脂氧酶与脑缺血后炎症损伤的关系,对脑缺血损伤机制及新型抗脑缺血药物研究均有积极意义.
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黄连解毒汤提取物对原代神经元氧糖剥夺再灌注损伤后5-脂氧酶活性的影响
脑缺血是严重危害人类健康的神经系统疾病.5-脂氧酶(5-LOX)是催化花生四烯酸生成白三烯(LTs)的关键酶.大量研究证实,5-LOX及其代谢产物半胱氨酰白三烯(CysLTs)介导脑缺血后炎症反应,5-LOX抑制剂和CysLTs受体拮抗剂对脑缺血损伤具有保护作用[1-2],表明5-LOX/CysLTs通路参与脑缺血再灌注损伤的病理生理过程.
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5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受体及组胺/组胺受体与脑疾病
脑疾病的神经生物学基础研究,对于疾病防治和脑功能认识都有积极意义.脑疾病涉及面极广,其中,相关的神经调质及其受体近年来受到关注.例如,在脑缺血与外伤等损伤性病变中,脑内5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受体系统有明显变化;癫痫、痴呆等病变中,脑内组胺系统发挥重要的调节作用.深入研究这些变化特点,有助于认识脑疾病发生机制,并研制出新的治疗药物.
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芍药苷诱导药理预适应抗脑缺血的神经保护作用
目的:研究传统中药处方芍药甘草汤中的化合物芍药苷(paeoniflorin,PF)对大鼠大脑中动脉梗塞(MCAO)的神经保护作用,为脑卒中的防治提供新思路.方法:脑缺血 90 min,再灌 24 h,观察PF预适应对梗塞体积及神经症状的影响;采用RT-PCR和Western blot研究PF对环氧酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)和5-脂氧酶(5-lipoxygenase,5-LOX)基因、蛋白表达及MAPK通路的影响.结果:PF (20、40 mg/kg, i.p.) 在MCAO前 48 h 给药,可剂量依赖性地降低梗塞体积、改善神经功能;PF(20 mg/kg,i.p.)于MCAO前24、48 h 和 5 d 预给药,可时间依赖性地诱导神经保护作用,PF(20 mg/kg, i.p., 48 h)预给药可显著降低脑缺血再灌中COX-2 mRNA 和蛋白及5-LOX蛋白的过表达,抑制MAPK通路的激活.结论:PF通过药理预适应产生神经保护作用,其机制为抑制COX-2和5-LOX的基因或蛋白表达并抑制MAPK通路的激活.
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外源性重组人促红细胞生成素对高氧脑损伤新生大鼠模型神经细胞凋亡及5-脂氧酶的影响
目的 探讨外源性重组人促红细胞生成素(rhEPO)对新生大鼠高氧脑损伤后神经细胞凋亡的影响.方法 将30只新生12 h内的Wistar大鼠按随机数字表法随机分为3组:rhEPO治疗+800 mL/L高氧组(A组),9 g/L盐水+800 mL/L高氧组(B组),9 g/L盐水+空气组(C组).A组每天给予颈后皮下注射rhEPO1 000 IU/kg,共5d.B组和C组给予同样剂量9 g/L盐水.A组和B组持续暴露于常压高氧模型舱中,维持容器内氧体积浓度为(800±30) mL/L,共5d.实验过程中观察大鼠一般情况、体质量改变.5d后处死全部大鼠,取脑组织,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)染色检测海马结构区细胞凋亡情况,免疫组织化学法测定海马结构区细胞5-脂氧酶表达.结果 B组体质量增长和脑质量均低于C组,A组体质量增长和脑质量高于B组,差异均有统计学意义(F=11.179、8.140,均P＜0.05).A组和B组发现海马结构区神经元细胞核部分固缩、深染,神经元排列松散,甚至局部神经元缺失、局灶性坏死,但A组较B组神经元密度大,坏死较少;C组海马结构区神经元细胞排列整齐,结构完整.B组海马结构区TUNEL染色阳性细胞数[(6.20±1.93)个/高倍视野]明显多于C组[(1.80±0.79)个/高倍视野],A组海马结构区TUNEL染色阳性细胞数[(4.20±1.32)个/高倍视野]明显少于B组,差异有统计学意义(F=23.912,P＜0.05).B组5-脂氧酶表达阳性细胞数[(6.90±1.29)个/高倍视野]明显多于C组[(1.00±0.67)个/高倍视野],A组5-脂氧酶表达阳性细胞数[(5.60±0.97)个/高倍视野]少于B组,差异有统计学意义(F =95.044,P＜0.05).结论 rhEPO对新生大鼠高氧脑损伤具有脑保护作用,且可能通过干预5-脂氧酶途径减轻高氧脑损伤引起的脑细胞凋亡.
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5-脂氧酶在脑缺血再灌注损伤中的机制探讨
炎症反应在脑缺血再灌注损伤中发挥着重要的作用.5-脂氧酶(5-1ipoxygenase,5-LOX)是炎症反应中的关键酶,通过多条途径来介导脑缺血再灌注损伤,因此,脑缺血再灌注损伤与5-LOX密切相关.5-LOX可能通过白三烯、N-甲基-D-天冬氨酸、基质金属蛋白酶-9、氧自由基损伤、核转录因子NF-κB等多条途经损伤脑组织.因此,5-LOX通路有望成为脑缺血再灌注损伤保护的靶点,将可能为缺血性脑血管病提供新的治疗对策.
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5-脂氧酶在呼吸道合胞病毒感染患儿喘息发生中的意义探讨
目的:探讨血5-脂氧酶(5-LO)及5-脂氧酶激活蛋白(FLAP) mRNA在呼吸道合胞病毒(RSV)感染患儿喘息发生中的临床意义.方法:分别收集20例毛细支气管炎及无喘息下呼吸道感染(LRTI)患儿鼻咽分泌物并检测RSV.RSV阳性者为病例组,其中毛细支气管炎伴喘息17例为A组,无喘息LRTI8例为B组；同期入院非感染性外科疾病术前患几10例为对照组.以实时荧光定量PCR法检测各组外周血5-LO及FLAP mRNA水平,并进行比较.结果:A组血5-LO及FLAP mRNA水平均高于B组及C组(P＜0.05或0.01).结论:RSV感染患儿伴喘息者5-LO及FLAP mRNA水平明显高于无喘息者,提示白三烯可能参与RSV感染患儿喘息的发病.
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5-LO通路活化对大鼠脑缺血再灌注损伤致血脑屏障破坏的影响
为了研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后血脑屏障(BBB)通透件的改变,观察5-脂氧酶(5-LO)、白三烯(LTs)、核因子-KB(NF-KB)、基质会属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化,探讨5-LO通路活化参与BBB破坏的可能机制,本实验采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞2 h/再灌注24 h模型.伊文氏蓝示踪剂检测BBB的通透性;RT-PCR检测损伤侧脑组织5-LOmRNA、半胱氨酰白三烯受体1(CysLTRI)mRNA的表达;ELISA检测血清LTB4的含量;免疫组织化学法检测损伤侧脑组织5-LO、NF-KB、MMP-9蛋白的表达情况.结果显示:局灶性脑缺血2 h/再灌沣24 h后,大鼠BBB的通透性明显增高,5-LO mRNA、CysLTRl mRNA的表达以及血清LTB4的含量均增高;5-LO、NF-KB、MMP-9蛋白存脑组织内的表达亦显著增多.本研究结果提示,CIRI后5-LO通路活化可经CysLTRl、LTB4、NF-KB、MMP-9介导BBB破坏.继而引发级联反应,加重脑损伤.
