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紫金龙的薄层色谱鉴别方法研究
目的 建立紫金龙药材的薄层色谱鉴别方法.方法 以异紫堇定、紫堇定为对照品,用三氯甲烷-甲醇-氨水(50∶1∶0.5)进行薄层展开.结果 建立的紫金龙药材的薄层色谱放鉴别方法,层析图显示分离效果佳,斑点清晰.结论 本法准确、简便、重现性好,可用于紫金龙药材及其制剂的质量控制.
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紫金龙生药学研究
目的:对药用植物紫金龙的形态进行了鉴别研究,为开发利用该药材提供依据.方法:野外采集及性状、显微与薄层色谱鉴定.结果:对原植物性状、显微特征和薄层色谱实验进行观察和描述.结论:本属植物形态特征相似,但有明显不同.此研究结果可为制订紫金龙的质量标准提供依据.
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高效液相色谱法测定紫金龙中普罗托品和异紫堇定的含量
目的:建立紫金龙主要有效成分普罗托品与异紫堇定的高效液相色谱分析方法.方法:色谱柱PHENOMENEX-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(用三乙胺调Ph至7.0)(50∶50),检测波长254nm,流0.8mL·min-1结果:普罗伥品和异紫堇定的平均回收率分别为97.9%.98.6%;RSD分别为1.3%,1.4%.结论:本法精确、简便、重现性好;适用于紫金龙的质量控制.
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RP-HPLC同时测定紫金龙中4种异喹啉生物碱的含量
目的 建立同时测定紫金龙药材4种异喹啉类生物碱含量的RP-HPLC方法.方法 采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5 μm),流动相为梯度洗脱,A相:0.2%磷酸水溶液(三乙胺调pH为7.0),B相:甲醇;流速:1mL·min1;检测波长:265 nm;柱温:30℃.结果 4种生物碱可达到基线分离.青藤碱、原阿片碱、紫堇定和异紫堇定的线性范围分别为0.007 3～0.065 7 μg,0.1722～4.304μg,0.486～4.86 μg和0.487 0～9.739 μg,相关系数r均大于0.9990.平均加样回收率分别为97.84%(RSD=0.89%)、98.98%(RSD=0.58%)、97.14%(RSD=1.13%)和97.65%(RSD=0.74%).结论本法精确、简便、重现性好,可用于对紫金龙药材及其制剂的质量控制.
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UPLC测定紫金龙中8-deacetyl-yunaconitine的含量
目的：建立紫金龙药材中8-deacetyl-yunaconitine的含量测定方法,为其质量标准的建立提供科学依据。方法于2015年1—6月,选择贵州不同产地紫金龙药材21批,采用超高液相色谱(UPLC)的方法,色谱柱Agilent Eclipse XDB-C18柱,流动相为乙腈-0.1%醋酸铵,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm。记录8-deacetyl-yunaconitine的色谱峰面积。结果测定了21批不同产地的紫金龙药材,8-deacetyl-yunaconitine含量在0.054%~0.250%。平均回收率为99.6%,RSD为0.6%。结论该方法简便、快速、准确、重复性好,可以控制该药材的质量。
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紫金龙氯仿-甲醇组分对急性实验性炎症的作用及机制研究
目的：观察紫金龙氯仿-甲醇组分对体内急性实验性炎症的作用,探讨其抗炎作用的机制。方法于2015年4-7月,选择健康昆明小鼠60只和Wistar大鼠50只,采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀模型,观察紫金龙氯仿-甲醇组分的抗炎作用,并检测大鼠炎性组织中TNF-α、NO和PGE2的含量。结果与模型组相比,氯仿-甲醇组分能剂量依赖性降低小鼠腹腔渗出液的吸光度(P<0.05, P<0.01),中、高剂量于角叉菜胶致炎后4h分别显著降低大鼠的足趾肿胀率至31.54%和26.78%(P<0.01),且高剂量组可显著降低大鼠炎性组织中TNF-α、NO和PGE2的含量(P<0.05, P<0.01)。结论紫金龙氯仿-甲醇组分具有明显的抗炎作用,其可能通过调节TNF-α、NO和PGE2炎症因子的水平,从而抑制机体的炎症反应。
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苗药紫金龙中生物碱含量的酸性染料比色法测定
目的:测定苗药紫金龙中总生物碱的含量,为其质量控制提供实验依据.方法:以乌头碱为标准品,采用酸性染料比色法测定紫金龙总生物碱的含量.结果:乌头碱在0.1mg/mL～0.3mg/mL范围内,回归方程为Y=2.76X+ 0.0386(r=0.999),吸光度与浓度具有良好的线性关系,平均回收率为93.15％,RSD=0.02％.结论:该方法准确度好,具有一定的专属性,为紫金龙质量的控制提供实验基础.
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紫金龙总生物碱回流提取工艺的优化
目的 优化紫金龙总生物碱回流提取工艺.方法 在单因素试验基础上,以总生物碱含有量为评价指标,提取时间、乙醇体积分数、料液比为影响因素,正交试验优化提取工艺.结果 佳条件为提取时间2.5h,乙醇体积分数65％,料液比1∶8,总生物碱含有量7.87 mg/g.结论 该方法简便、省时、高效,可用于回流提取紫金龙总生物碱.
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紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用
目的 探讨紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用.方法 脂多糖刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型后,加入不同质量浓度(50、100、200、400 mg/L)紫金龙氯仿-甲醇组分,ELISA法或比色法检测白介素-6(IL-6)、白介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)含有量,Western blot法测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达,以及核转录因子κ转抑制蛋白α (IκBα)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)磷酸化水平.结果 紫金龙氯仿-甲醇组分可显著抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、NO、PGE2释放(P ＜0.05,P＜0.01),下调iNOS、COX-2蛋白水平(P＜0.01),降低p38、JNK、Erk1/2、IκBα磷酸化水平(P ＜0.05,P＜0.01).结论 紫金龙氯仿-甲醇组分可有效抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症,其机制可能与抑制NF-κB、MAPKs信号通路激活、减少炎症因子释放有关.
关键词： 紫金龙 氯仿-甲醇组分 脂多糖 RAW264.7细胞 炎症 -
紫金龙与虎杖之别
通过调查，有不少的医院药房将装有虎杖的药斗子写着紫金龙的名字，笔者认为这是不妥当的。因为紫金龙与虎杖是既不同科、又不同效的两种植物药材。特将两药的鉴别特征及依据论述如下。
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紫金龙种子萌发特性研究
目的:研究紫金龙种子的萌发特性,了解其适萌发温度、种子吸水性、种子萌发抑制性,获得有效的打破休眠、提高种子萌发率的方法.方法:观测不同处理后紫金龙种子的萌发率.结果:紫金龙种子发芽的适宜温度为20～25℃,种子吸水快时间是浸种后6～12h,种子含有抑制萌发的物质,在50～400 mg/L范围内随着GA浓度的升高对紫金龙种子萌发促进作用随之增强,98％浓硫酸处理5～10 min可显著提高种子发芽率和提早种子萌发时间.结论:紫金龙种子存在种皮障碍和含有抑制萌发物质,采用400～500 mg/L GA浸种或98％浓硫酸处理种子10 min能打破种子休眠.
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紫金龙抗炎活性成分的筛选
目的 考察紫金龙(AVK)不同提取部位的抗炎活性,筛选出活性成分.方法 采用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞构建体外细胞炎症反应模型,以一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)为活性指标评价紫金龙水组分(AVHC)、乙醇组分(AVEC)、甲醇-水组分(AVMHC)、氯仿-甲醇组分(AVTMC)和氯仿组分(AVTC)抗炎活性,筛选出抗炎有效组分,并从抗炎有效组分中筛选紫金龙的抗炎活性成分.结果 除AVHC外,其余各组分均下调了LPS处理后RAW264.7细胞的NO和TNF-α释放量(P＜0.05),其中AVTMC的抑制作用强;从AVTMC中分离到的单体化合物中,Vilmorinine、Vilmorrianine D、Talatisamine和8-deacetyl-yunaconitine等化合物具有降低NO与TNF-oα释放量的作用,且8-deacetyl-yunaconitine活性强.结论 AVTMC是紫金龙抗炎主要有效组分,且从中筛选到4种抗炎活性成分.本研究为该药材的深入开发和质量控制提供了实验依据.
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黔产紫金龙药材重金属含量及有机氯农药残留量分析
目的：建立黔产紫金龙药材中铅、镉、铜、汞、砷重金属含量及有机氯农药残留量的测定方法。方法分别采用石墨炉－原子吸收法、氢化物－原子荧光光谱法测定紫金龙药材中铅、镉、铜、砷、汞重金属含量，气相色谱法测定药材中六六六、滴滴涕和五氯硝基苯9种有机氯农药残留量。结果除2批样品铅、铜超标外，其他药材中重金属及有机氯农药残留量均符合国家限量标准。结论所建立的测定方法快速、准确、灵敏，为紫金龙药材及含紫金龙的相关制剂原料来源的质量控制提供了理论依据。
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异紫堇碱对SMC内游离钙浓度的影响
异紫堇碱是从罂粟科植物秃疮花、紫金龙中提取的一种生物碱,具有明显的镇痛、镇静、解除平滑肌痉挛等作用.文献报道,在整体动物和离体器官水平的研究,认为其扩血管作用机制与抑制钙内流和钙释放有关.本实验采用兔动脉血管组织贴块法,制备成可传代的血管平滑肌细胞(SMC).将所制备的贴壁培养的SMC制成细胞悬液,用Ca2+荧光探针Fu ra-2/AM孵化1h后,于RF-2000型双波段荧光扫描仪测定SMC内游离的游离钙离子浓度 [Ca2+]i.结果表明,异紫堇碱(isocorydine,Isoc)1μmol/L,10μmol/L,50 μmol/L和维拉帕米(verapamil)1μmol/L对静息状态下SMC的[Ca2+]i无明显影响,对高K+(50mmol/L)所致的[Ca2+]i增高则表现为抑制作用,与对照组比较,其抑制的幅度分别为8.2%、14.4%、21%,维拉帕米的抑制幅度则达48.8%.此外,上述浓度Isoc和Ver对去甲肾上腺素(NA,1μmol/L)所致[Ca2+]i增高的抑制率分别为11.2%、28.5%、37.1%和28%.结果提示:Isoc及Ver对SMC的电压依赖性钙通道和受体操纵性钙通道均有抑制作用,异紫堇碱的扩血管作用与其降低不同因子所致的[Ca 2+]i水平有关.
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紫金龙与宽果紫金龙的鉴别比较研究
目的:为进一步研究和开发紫金龙和宽果紫金龙资源提供理论依据.方法:采用来源鉴别、性状鉴别、显微及理化鉴别等方法对紫金龙和宽果紫金龙的根进行鉴别比较研究.结果:二者植物形态有一定区别；性状及显微特征略有不同；薄层斑点数目、颜色及Rf值、紫外吸收峰形及吸收波长基本相似.结论:为鉴别和利用紫金龙与宽果紫金龙提供了生药学理论依据.
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黔产紫金龙药材水分、 浸出物、 灰分及酸不溶性灰分的测定
目的:测定紫金龙药材中水分、 灰分、 酸不溶性灰分及浸出物的含量,为建立紫金龙质量标准提供实验依据.方法:按照2015年版 《中国药典》 Ⅰ部附录ⅨH中水分测定法中的第一法、 附录ⅨK灰分测定法和附录ⅩA浸出物测定法进行测定.结果:紫金龙药材水分含量在11.09％ ～14.29％ 之间;药材总灰分含量1.883％ ～5.937％ 之间;药材酸不溶性灰分含量为0.2131％ ～0.9064％ 之间;药材水溶性浸出物测定结果在15.87％ ～35.87％ 之间.结论:该方法简单,准确,重复性好,可作为紫金龙药材质量控制的参数指标.
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白族药紫金龙的HPLC指纹图谱研究
目的：建立紫金龙药材HPLC指纹图谱分析方法，为紫金龙药材的质量评价提供依据。方法：采用RP－HPLC色谱法，Inert-sil ODS－SP （4．6mm ×150mm，5μm）色谱柱，以甲醇－0．2％磷酸水溶液（三乙胺调pH为7．0）为流动相梯度洗脱，柱温35℃，流速1．0ml／min，检测波长采用波长切换，0～40min为230nm，40～90min切换至285nm，进样量10μl；数据使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统研究版（2012A）进行处理。结果：在选定的色谱条件下确定10个峰构成紫金龙药材的特征共有峰，各批次药材均具有上述特征，但特征峰的相对含量分布差异导致色谱概貌存在一定差异。结论：该方法简便、精密度高、重现性好，可为紫金龙药材的质量评价提供依据。
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白族药滋坚伦(紫金龙)的研究进展
滋坚伦(紫金龙)是白族民间常用药,主要含异喹啉类生物碱,有消炎、止痛镇痛、止血、降压等功效.本文就近年来对滋坚伦的生药学、化学成分、药理作用及临床应用研究作一简要综述.
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RP-HPLC法同时测定紫金龙中2种生物碱的含量
目的:建立同时测定紫金龙中异可利定和普罗托品的含量测定方法.方法:采用Luna C_(18)100A色谱柱,流动相以三乙胺-0.2%磷酸(0.1:35)为(A),甲醇-乙腈(14:1)为(B)梯度洗脱,流速为1.0mL-min-1,检测波长为285nm,进样量20μL,柱温为25℃.结果:异可利定在0.065mg·mL-1-0.195mg·mL-1范围内线性良好,回归方程为Y=19974X+2.3524(r=0.9999),平均回收率为97.0%,RSD为1.6%;普罗托品在0.025mg·mL-1-0.075mg·mL-1范围内线性良好,回归方程为Y=20923X-4.3441(r=0.9998),平均回收率为98.9%,RSD为1.8%.结论:该方法简便、准确重现性好,适用于紫金龙中异可利定和普罗托品的定量分析.
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紫金龙脂溶性化学成分的研究
目的 研究紫金龙脂溶性化学成分.方法 采用气相色谱-质谱联用技术分离鉴定脂溶性成分,用峰面积归一化法测得相对百分含量.结果 从中鉴定出37个组分,占峰面积的88.33%.结论 紫金龙脂溶性成分主要为生物碱,脂肪酸酯和甾醇类化合物.
