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珍稀濒危药用植物川西獐牙菜的资源调查
采取文献调查、走访调查、样方调查及市场调查等方法，对西藏、青海、四川等省自治区珍稀濒危药用植物川西獐牙菜进行相关调查，结果表明，川西獐牙菜主要分布在西藏的左贡、芒康，青海的玉树，四川的石渠、道孚、康定、马尔康、金川、小金。从分布海拔来看，可以从2300 m（四川康定）一直到3900 m（西藏芒康），在相对高度为2600 m的变化范围内都有分布。光照、水分、土壤、温度、海拔等因素从不同的角度对川西獐牙菜的分布和生长、资源蕴藏量都有着明显的影响。近年来，作为藏药“藏茵陈”的川西獐牙菜市场需求增长迅速，滥采滥挖是导致近年川西獐牙菜资源急剧减少的主要原因。建议一方面应加强对川西獐牙菜的合理限量采挖管理，同时应开展川西獐牙菜资源利用价值的评价，并加快发展川西獐牙菜的栽培生产。
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藏药川西獐牙菜的质量标准研究
目的:建立川西獐牙莱药材的质量标准.方法:采用薄层色谱法对川西獐牙菜药材进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定主要活性成分獐牙莱苦苷、芒果苷、当药醇苷和齐墩果酸的含量.色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm,5μm),检测獐芽菜苦苷、芒果苷和当药醇苷的流动相甲醇-0.02％磷酸水(45:55),检测波长254 nm,检测齐墩果酸的流动相乙腈-甲醇-0.2％冰醋酸水(65:15:20),检测波长210 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果:川西獐牙菜药材的薄层色谱鉴别特征明显,专属性强；獐牙菜苦苷、芒果苷、当药醇苷和齐墩果酸的HPLC含量测定线性范围分别为0.075～0.75μg(r=0.999 9),0.05 ～0.5 μg(r=0.999 7),0.032～0.32 μg(r=0.999 3),0.116～11.6 μg(r=0.999 4),平均回收率分别为98.91％ (RSD 0.77％),99.61％ (RSD1.38％),100.35％ (RSD 0.69％),99.26％(RSD 0.40％),并根据10批药材中相应成分的含量初步制定了其含量限度.结论:川西獐牙菜定性定量测定方法简单准确,能够为川西獐牙菜药材的质量控制提供有效依据.
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四川西北地区川西獐牙菜指纹图谱研究(I)
目的:建立川西獐牙药材甲醇溶解部分的HPLC指纹图谱.方法:反相高效液相色谱法,流动相甲醇-水(水中含0.2%的磷酸),梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长260nm,柱温30℃.结果:精密度、重复性、稳定性试验中共有峰峰面积、保留时间的RSD均小于5.0%;不同产地川西獐牙菜的相似度大于0.805.结论:该方法简便、实用、可靠,可作为川獐牙菜药材的质量标准.
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遥感和GIS在四川省中藏药川西獐牙菜适宜性分布研究中的应用
川西獐牙菜是一种珍稀的中藏药材,目前对于川西獐牙菜的研究主要集中在药用疗效和药用价值方面,而基于遥感与GIS适宜性分布研究较少.运用遥感和GIS技术来研究分析四川省川西獐牙菜适宜性分布区域,为野生资源保护开发、人工引种栽培以及调整四川省中药产业布局提供了科学依据.该研究在文献查阅和分析川西獐牙菜分布适宜性的海拔、年降水、年均温等生态因子基础上,基于遥感与GIS技术,获取生态因子、叠加分析、结合GPS野外验证数据,对四川省川西獐牙菜的适宜性分布区域进行了研究.①川西獐牙菜在四川省适宜分布面积为1 543.749 km2,主要分布在德格县、甘孜县、道孚县、康定县、马尔康市、金川县、小金县、丹巴县、稻城县、乡城县、新龙县、阿坝县、木里县等县市,占该区县市总面积的7.25％;②相关资料以及野外实地验证调查发现,通过GIS得到的川西獐牙菜适宜分布区域与实际分布情况基本吻合.研究表明基于遥感与GIS技术提取川西獐牙菜适宜分布区是可行的,可以应用到其他道地珍稀中药材的适宜性分布区域研究.
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藏茵陈HPLC指纹图谱及模式识别研究
目的 研究藏茵陈的质量控制方法.方法 采用高效液相色谱法建立藏茵陈药材的指纹图谱,收集了19批样品进行测定,并使用主成分分析对指纹图谱进行了模式识别研究,采用HPLC-MS技术对色谱峰进行了初步归属.结果 对11个主要色谱峰进行了指认,通过主成分分析可知,獐芽菜苦苷和当药醇苷为藏茵陈质量控制中比较重要的指标.结论 本方法为藏茵陈药材的质量综合评价和资源合理利用奠定了基础.
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复方刺山柑胶囊的质量标准研究
目的 建立复方刺山柑胶囊的质量控制标准.方法 采用TLC法对制剂中川西獐牙菜、大黄、黄芪、木香、诃子进行定性鉴别;采用HPLC法对制剂中大黄素、大黄酚进行定量测定.结果 薄层色谱主斑点清晰、特征明显、专属性强;大黄素线性范围为0.768～3.840 μg/mL(r=0.9996,n=5),平均回收率为100.00％ (RSD=1.18％);大黄酚线性范围为2.04～16.32 μg/mL(r=0.9993,n=5),平均回收率为l00.62％(RSD=0.38％).结论 检测方法简便、可靠、重复性好,可作为复方刺山柑胶囊的质量标准控制方法.
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川西獐芽菜化学成分研究
目的 研究川西獐牙菜Swertia mussotii的化学成分.方法 采用柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱解析鉴定化合物结构.结果 从川西獐牙菜75％乙醇提取物中分离得到19个化合物,分别鉴定为1-羟基-3,4,7,8-四甲氧基呫吨酮(1)、1,7-二羟基-3-甲氧基呫吨酮(2)、1,3,7-三羟基呫吨酮(3)、1,3,7,8-四羟基呫吨酮(4)、1,3,8-三羟基-7-甲氧基呫吨酮(5)、1,3-二羟基-7,8-二甲氧基呫吨酮(6)、1,5,8-三羟基-3,4-二甲氧基呫吨酮(7)、1-羟基-3,4,5,8-四甲氧基呫吨酮(8)、1-羟基-3,5,8-三甲氧基呫吨酮(9)、(S)-(+)-龙胆内酯(10a)、(R)-(-)-龙胆内酯(10b)、1,8-二羟基-3,7-二甲氧基呫吨酮(11)、1-羟基-3,7,8-三甲氧基呫吨酮(12)、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基呫吨酮(13)、1,7,8-三羟基-3-甲氧基呫吨酮(14)、1,3,5,8-四羟基呫吨酮(15)、1,7-二羟基-3,4,8-三甲氧基呫吨酮(16),芒果苷(17)、齐墩果酸(18).结论 化合物1～9均为首次从该种植物中分离得到,化合物10a和10b为首次从獐牙菜属植物中分离得到.
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川西獐牙菜牻牛儿基焦磷酸合成酶基因的克隆及表达分析
目的 从川西獐牙菜Swertia mussotii中克隆牻牛儿基焦磷酸合成酶(SmGPPS)编码基因,并进行生物信息分析及该基因的表达研究.方法 根据川西獐牙菜转录组SmGPPS基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增得到cDNA序列,通过生物信息对该序列进行分析;构建原核表达载体pET-28a-SmGPPS,转入大肠杆菌BL-21 (DE3)中,在37℃、1mmol/L IPTG诱导下进行表达.采用半定量RT-PCR方法检测SmGPPS基因在川西獐牙菜不同组织中的表达强度.结果 SmGPPS cDNA全长1119bp,编码372个氨基酸.并对其蛋白二级、三级结构进行了分析和预测.SmGPPS蛋白与其他植物中GPPS蛋白具有高度的相似性.SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致.半定量RT-PCR结果表明SmGPPS在叶中表达量高.结论 为进一步研究该基因的功能和利用基因工程手段提高川西獐牙菜中环烯醚萜类化合物产量提供了基础.
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大孔树脂分离纯化川西獐牙菜中环烯醚萜苷类和(口山)酮类成分的工艺研究
目的 研究大孔吸附树脂分离纯化川西獐牙菜中环烯醚萜苷类和(口山)酮类成分的工艺.方法 考察了HPD-300、HPD-400、HPD-600、AD-8、DM-301及D-101-Ⅰ等6种吸附树脂对环烯醚萜苷类和(口山)酮类的指标成分獐牙菜苦苷和当药醇苷的动态吸附及洗脱性能,从中筛选出效果较好的树脂完成实验研究.结果 HPD-300用于同时分离纯化环烯醚萜苷类和(口山)酮类成分,吸附洗脱性能良好,其吸附过程上样量为0.9 g生药/mL树脂,上柱液pH值约为8,体积流为2 BV/h;洗脱过程采用水洗除杂,7 BV 20%、5BV 70%乙醇梯度洗脱,洗脱率都在90%以上,所得2个固体样品中两类成分质量分数均可达50%以上.结论 HPD-300用于同时富集环烯醚萜苷类和(口山)酮类成分效果佳,是一种理想的分离纯化介质.
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星点设计-效应面法优化川西獐牙菜提取工艺
目的 星点设计-效应面法优化川西獐牙菜的提取工艺.方法 以乙醇体积分数、提取时间、溶媒比为自变量,龙胆苦苷收率和浸膏得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选取较佳工艺,并进行预测分析.结果 确定优提取工艺为86%乙醇12.4倍量回流提取3次,每次63 min.结论 星点设计-效应面法优选的川西獐牙菜提取工艺,方法简便,精度更高.
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川西獐牙菜的化学成分、药理作用和临床应用研究进展
川西獐牙菜是我国传统藏药“藏茵陈”原植物之一,含有呫吨酮、环烯醚萜苷、三萜等化学成分,具有保肝、抑菌等药理作用.其临床应用主要为各型肝炎的治疗,已被开发为多种剂型的成药,该植物其他方面的应用还有待于进一步研究.对该植物的化学成分、药理作用和临床应用研究进展做一综述,以期为开发和利用川西獐牙菜提供参考.
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藏药"蒂达"川西獐牙菜的化学成分研究进展
藏药蒂达,藏名"桑蒂",译名"藏茵陈",是传统高寒藏药,始载于藏医药书《四部医典》,是藏药中具有特色的治疗热症、肝胆病及血液病的常用药物.由于藏区地域辽阔,居住分散,加之受到地理、资源、交通、信息等诸多方面的限制,不同地区藏医药工作者使用的"桑蒂"的来源也不尽相同.
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藏药川西獐牙菜及其同属植物的药理作用及临床应用研究进展
川西獐牙菜(Swertia mussotii Franch.)是一种用于治疗黄疸型肝胆疾病和病毒性肝炎的珍稀藏药草本植物.近年来采用现代中药研究方法,从川西獐牙菜中分离、提取出许多新的有效成分.现代药理研究表明,川西獐牙菜具有保肝、抗病毒、抗菌、消炎等多种作用.本文对近年来藏药川西獐牙菜的各种化学成分、药理活性及临床应用等方面的研究进展进行了综述,并提出了开发利用川西獐牙莱资源的建议.
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野生与栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚药效学的比较研究
目的 研究野生和栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚的乙醇提取物对CC14致小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 采用一次性腹腔注射四氯化碳花生油(0.12％)方法制造染毒小鼠模型,分别给其注射不同剂量的野生和不同剂量、不同地点的栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚对模型动物进行干预性保护,然后测定不同实验组小鼠的ALT和AST活性.结果 不同剂量的野生和不同剂量、不同地点的栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚均能降低四氯化碳导致的小鼠血清ALT和AST活性升高.结论 栽培川西獐牙菜和椭圆叶花锚完全可以代替野生种,同样对小鼠实验性肝损伤具有一定的保护作用.
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HPLC测定青海不同地区川西獐牙菜活性成分的含量
目的:对青海不同产地的川西獐牙菜植物中的落干酸(loganic acid)、獐牙菜苦苷(swertiamarin)、龙胆苦苷(gentiopi-croside)、芒果苷(mangiferin)等4种主要药效成分进行了高效液相色谱的含量测定.方法:采用kromasil C18(250 mm ×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以流动相甲醇-水梯度洗脱,流速:1 mL/min,柱温:35℃,检测波长:238 nm.结果:4种成分均达到了基线分离,落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷的线性范围分别为:1.16～32.61 μg(r=0.999 6),0.051～1.42lxg(r=0.999 9)、0.037～1.05 μg(r:0.999 9)、0.018～0.49 μg(r=0.999 8)、平均回收率在96%～101%,RSD%在1.58%～2.90%之间.结论:该方法具有很好的线性关系,方法简单,准确,实用性强.
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川西獐牙菜醇提水沉部位抗黄疸性肝损伤的活性研究
目的 了解川西獐牙莱醇提水沉部位抗CCl<,4>诱导大鼠肝损伤性黄疸的保肝作用.方法 设置空白对照组(20 ml/kg BW蒸馏水)、模型对照组(20 ml/kg BW蒸馏水)、低浓度川西獐牙菜醇提水沉部位组(0.9 g/kg BW),高浓度川西獐牙菜醇提水沉部位组(1.8 g/kg BW)、阳性对照组(80 mg/kg BW联苯双酯),灌胃大鼠8d.末次给药2 h后,除空白对照组,其余各组腹腔注射0.6 ml/kg BW CCl<,4>,建立大鼠肝损伤性黄疸模型;禁食22 h后,腹动脉采血,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性、总胆红素(TBIL)和胆汁酸(TBA)的含量.结果 川西獐牙菜醇提水沉部位可以显著降低血清ALT和AST活性,TBIL和TBA的含量,并且给药量在0.9 g/kg BW和1.8 g/kg BW时保肝活性具有一定的剂量关系.结论 川西獐牙菜的醇提水沉部位对CCl<,4>诱导的肝损伤性黄疸具有显著的降酶退黄功效.
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川西獐牙菜中芒果苷的提取分离研究
目的 从川西獐牙菜中提取分离芒果苷.方法 采用溶剂提取法及聚酰胺柱色谱分离法,经化学和光谱法确定其结构.结果 提取产物经结构鉴定确证为芒果苷,平均收率为0.3%.结论 该提取分离方法简便,易于操作,并且提取率较高.
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藏药川西獐牙菜挥发性化学成分及抑菌活性研究
目的 研究川西獐牙菜挥发油的化学组成及其抑菌活性.方法 采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用GC-MS进行成分分析;选择金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为代表菌种,对挥发油的抗菌活性进行了初步研究.结果 分离出88种成分,鉴定出61种化合物,其峰面积相对含量约占挥发油总量的91.32%.川西獐牙菜挥发油的主要组分为二十六烷(12.88%),二十八烷(17.83%),1-碘-十六烷(7.27%),11-十烷基-二十一烷(5.47%),2-十二烷氧基-乙醇(3.04%),2-环己基-十一烷( 2.19%),1-碘-十八烷(3.21%),四十四烷( 5.47%),二十九烷(4.29%),11-十烷基-二十一烷(5.47%),三十烷( 3.17%) 等.结论 川西獐芽菜挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和伤寒沙门氏菌有抑菌活性.
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大孔吸附树脂结合硅胶色谱分离川西獐牙菜正丁醇萃取部位化学成分研究
目的:制备川西獐牙菜正丁醇萃取部位主要化学成分.方法:采用大孔吸附树脂-硅胶色谱相结合的方法进行分离纯化,并根据理化性质和NMR波谱数据解析鉴定化合物结构.结果:从川西獐牙菜正丁醇萃取部位化学成分得到7个化合物,分别鉴定为异荭草苷;芒果苷;7-O-[β-D-吡喃鼠李糖-(1-2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮;齐墩果酸;1-O-[β-D-吡喃葡萄糖-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖]-8-羟基-3,7-二甲氧基口山酮;bellidifolin和1-羟基-3,5,8-三甲氧基口山酮.结论:该方法操作简单、可行,适用于川西獐牙菜正丁醇萃取部位的分离与纯化.
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野生与施肥种植川西獐牙菜中矿物质元素含量的季节变化
为对比野生与施肥(尿素和磷酸二铵)种植青海川西獐牙菜中元素含量的变化,分别采集野生和6～10月施肥种植川西獐牙菜全植株,采用原子吸收光谱仪分析测定了其钾、钠、钙、镁等矿物质元素含量和铜、锌、铁、锰、钴等微量元素含量.结果表明,施肥种植川西獐牙菜中矿物质元素、微量元素含量除钾外,均高于野生种,并在9～10月份达到高水平,可替代野生种入药,按需适时采收,以解决资源匮乏.
