126 青石棉诱发8-羟基脱氧鸟苷生成

青石棉诱导A549 细胞表达IL-8的研究

目的研究青石棉纤维作用于A549细胞后IL-8蛋白和基因表达水平及酪氨酸激酶抑制剂PD98059对IL-8表达的影响.方法用定量RT-PCR法测定青石棉诱导A549细胞后的IL-8 mRNA水平;用免疫反应法测定A549细胞培养上清中IL-8蛋白水平.结果不同浓度青石棉刺激A549细胞后,培养上清中IL-8释放量明显增加,细胞中A549 IL-8 mRNA表达显著上升,使用酪氨酸激酶抑制剂PD98059可明显抑制IL-8的蛋白及mRNA表达水平.结论青石棉可诱导IL-8的高表达,而这种表达可为PD98059所抑制,提示IL-8的表达源于胞浆中MAPKs信号通路.

青石棉诱导A549细胞ERK1/2及Elk1激活的研究

目的研究细胞外信号调节蛋白在青石棉致肺部疾病的作用.方法用Western免疫印迹、免疫沉淀等对石棉刺激A549细胞后细胞外信号调节蛋白及其下游ElK1蛋白磷酸化等进行了研究.结果石棉刺激细胞后,磷酸化ERK1/2、Elk1等高表达,差异有显著性(P＜0.05).结论 ERK1/2、Elk1磷酸化可能参与青石棉的致病过程.

天然青石棉暴露区肺癌、胸膜间皮瘤与饮食习惯的病例-对照研究

目的 探讨青石棉污染区与肺癌、胸膜间皮瘤相关的饮食偏好及其与青石棉暴露的交互作用.方法 对云南省大姚县2011年随访队列发现的53例病例(27例肺癌和26例胸膜间皮瘤)和匹配了性别、年龄的106例对照进行1∶2匹配的病例-对照研究,采用条件Logistic回归方法计算比值比(OR)及其95％CI,并进行单因素和调整混杂因素的多因素数据分析,探索与肺癌、间皮瘤有关的饮食偏好及其保护作用,并进行交互作用分析.结果 饮用绿茶(OR =0.88,95％CI0.66 ～0.87)、食用野生菌(OR=0.85,95％CI 0.23 ～0.95)与肺癌、胸膜间皮瘤发生呈负相关,并均减弱青石棉暴露与肺癌、胸膜间皮瘤发生的正性关联.食用野生菌与青石棉暴露存在相加交互作用,超额相对危险因素(RERI)、交互作用归因比(API)和交互作用指数(S)分别为-0.86、-0.26和0.61.结论 饮用绿茶和食用野生菌是肺癌、胸膜间皮瘤发生的保护因素.

大姚县农村生活饮用水青石棉污染与消化道癌症关联的病例-对照研究

目的 探讨大姚县受青石棉污染的生活饮用水与消化道恶性肿瘤死亡风险的关系.方法 选取已有27年队列人群(n=1249)中因消化道恶性肿瘤死亡的研究对象作为病例组(n=54),并按年龄、性别、死亡时间等匹配因素,选取108名对照,进行1∶2匹配的病例-对照研究,分析当地饮水情况对消化道恶性肿瘤死亡风险的影响.结果 Logistic回归分析表明,使用石棉炉的时间越长,消化道癌症死亡危险性越高(使用6 ～10年:OR=2.920,95％ CI1.501 ～5.604;使用11 ～15年:OR=3.966,95％ CI2.156 ～7.950;使用15年以上:OR =4.122,95％ CI1.211 ～7.584),喝生水导致消化道癌症死亡危险性增高(OR=1.43,95％ CI 1.07～1.88),饮水类型与消化道恶性肿瘤死亡危险性相关,与饮用自来水比较,饮用井水的风险为OR=1.770,95％ CI 1.001 ～2.444,饮用河水的风险为OR=2.442,95％ CI0.956 ～3.950,饮用宅泯沟水的风险为:OR=2.554,95％ CI1.961 ～6.584,饮用池塘水的风险为OR=3.121,95％ CI1.872 ～6.566.结论 青石棉污染区饮水相关因素与大姚县主要消化道恶性肿瘤死亡有较强的关联.

青石棉污染区恶性肿瘤死亡率10年回顾队列研究

为了探讨环境低浓度石棉接触对居民恶性肿瘤尤其是肺癌和间皮瘤发生的关系,对大姚县部分青石棉污染区30岁以上的农村居民进行了10年回顾性队列调查(1987年1月1日～1996年12月31日).队列人数为3 363人,其中男1 503人,女1 860人.对照选用无青石棉污染的该县龙街乡农民和远离该县230多公里的禄丰县金山镇农村居民共7 639人(男3 550,女4 089),观察期9年(1987年1月1日～1995年12月31日).结果发现观察组全肿瘤死亡率为125.64/10万人年,肺癌死亡率为25.13/10万人年,相对危险度(RR)分别为1.40、3.26,差异有显著性(P＜0.05).值得注意的是观察组中有8例死于间皮瘤(男5,女3),平均死亡年龄63岁,死亡率为25.13/10万人年,RR＞16.32,差异有极显著性(P＜0.01).提示非职业环境接触青石棉可能会引起恶性肿瘤,尤其是肺癌、间皮瘤的死亡率显著增高.

大姚县青石棉污染区主要恶性肿瘤的健康生命损失年分析

目的 评价云南省大姚县环境青石棉污染对人群健康及社会造成的危害.方法 通过查阅当地县级医院门诊和住院登记恶性肿瘤病例、人口死因登记报告中1994至2003年期间死亡的恶性肿瘤患者.用健康生命损失年评价当地恶性肿瘤引起的死亡、健康寿命损失及社会负担.结果 1994至2003年,青石棉污染区肺癌、肝癌、间皮瘤、胃癌、结肠直肠癌的死亡率分别为10.15/10万、9.04/10万、8.48/10万、3.96/10万、3.55/10万.除女性乳腺癌外,男女各主要恶性肿瘤死亡率均随年龄增长而增长.肝癌、肺癌、间皮瘤、白血病、胃癌的健康生命损失年损失分别是1981.39、1886.63、1799.23、948.01、754.18人年.健康生命损失年损失的年龄分布主要集中于15～44岁和45～59岁年龄组.恶性肿瘤引起的间接经济损失以肺癌、肝癌、间皮瘤造成的损失较大,分别占总损失的15.02%、13.98%、13.01%.青石棉污染引起的健康生命损失年为3092.23人年,间接经济损失517.58万元.结论 肺癌、肝癌、间皮瘤、白血病和女性乳腺癌对污染区人群健康和社会危害影响较大.恶性肿瘤造成的中老年人死亡较为严重,引起的青壮年死亡造成的社会损失大.

青石棉诱导AL细胞CD59基因突变和DNA氧化损伤的研究

目的研究谷胱甘肽合成酶抑制剂buthionine sulfoximine(BSO)和自由基清除剂二甲亚砜(DMSO)对青石棉诱导人鼠杂交瘤(AL)细胞CD59基因突变率的影响以及青石棉引发细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)产生的规律.方法细胞毒性、遗传毒性检测分别采用克隆法;8-OHdG检测采用ABC酶免疫染色法;非蛋白巯基化合物(NPSH)检测采用改进后的Tietze法.结果 25μmol/L BSO预处理AL细胞24 h后的细胞内NPSH含量降为2nmol/107细胞,仅为对照组的5%.青石棉单独处理组AL细胞CD59基因突变率为208±18.BSO预处理24 h后与青石棉继续共同孵育组细胞突变率可达到397±55,是青石棉单独处理组的2倍左右,差异有显著性(P＜0.05);而DMSO存在时,青石棉诱导的CD59基因突变率仅为57±8,比青石棉单独处理组降低72.6%.细胞内8-OHdG的产生随着青石棉处理剂量的增加而线性增加(y=150+20x,r=0.962 1).当青石棉处理剂量为6μg/cm2时,细胞内8-OHdG含量由对照组的137±9提高到289±6,是对照组的2倍以上.DMSO存在时,可使6μg/cm2石棉诱导的细胞内8-OHdG含量由289±6降低到170±3.结论自由基是青石棉诱导基因突变和DNA损伤过程中重要的调节物,具有剂量-效应关系.

大姚县青石棉污染的危害及预防与控制

目的 探讨环境中低浓度接触石棉对居民健康的影响及石棉相关疾病的预防.方法采用横断面调查、回顾队列调查和动物实验等方法.结果大姚县居民胸膜斑检出率为10.7%,在 40岁以上人群中高达19.8%,并相继发现83例地方性石棉肺.1977～1983年期间肺癌的SMR 为6.63,RR为7.23;间皮瘤死亡率为8.5/10万人年.1987～1995年肺癌死亡率为53 .26/10万人年,RR为2.14,明显高于对照组(肺癌死亡率为24.88/10万人年),P＜0. 05;队列中有7例间皮瘤,死亡率为17.75/10 万人年,对照组未发现间皮瘤.动物实验结果表明,绿茶和亚硒酸钠能有效降低大鼠肺癌和间皮瘤诱发率.经过10多年的努力,大姚县综合治理已初见成效,青石棉污染得到明显控制 ,生态环境有了较大的改善.结论 居民在环境中接触低浓度青石棉可引起恶性肿瘤,尤其是肺癌和间皮瘤死亡率的增高.

青石棉污染区CT检查恶性肿瘤的调查研究

石棉为国际肿瘤中心(IARC)确定的致癌物质,其中青石棉的致癌能力强.云南省大姚县居民由于接触环境中的青石棉导致石棉相关性疾病患病率明显增多.我们采用大姚县人民医院CT室检查资料与远离该县的禄丰县人民医院同期CT检查资料进行对比研究,了解大姚县恶性肿瘤患病情况.

青石棉诱发小鼠胃肠道肿瘤的实验研究

石棉可诱发肺癌和间皮瘤已得到国内外学者的公认，但与胃肠道肿瘤的关 系却未达成共识。云南大姚县部分地区因青石棉暴露造成空气、水的污染，居民患肺癌和间 皮瘤的危险明显增高，但消化道肿瘤的差异却未能显示出来。为了探讨石棉污染水源是否能 诱发胃肠道肿瘤发病率增高，我们采用小鼠灌饲石棉的方法进行了观察，结果报道如下。　　一、材料与方法　　1.材料：选用云南大姚青石棉，经高速粉碎机粉碎，纤维长度:<5 μm:36.1%、5～20 μm :57.5%、>20 μm:6.4%；纤维直径均<3 μm。华西医科大学动物中心提供的昆明种4 周龄健康小鼠雌雄各50只，实验组和对照组各50只(雌雄各半)。　　2.实验方法：用生理盐水配成2 g/L的青石棉混悬液。实验组每天上午灌饲0.5 ml混悬液， 每周5 d，持续6个月，共灌饲100 d以上，总剂量为>100 mg/只，对照组灌饲同等量的自来 水。6个月以后常规喂养，1年零7个月后2组各剩余5～6只动物一并处死。小鼠死亡后记录死 亡时间。常规解剖,组织用福尔马林溶液固定。大体观察是否有肉眼可见的病理改变后，分 别取小鼠的食道、胃、肝、肠组织，石蜡包埋、切片，HE染色。光学显微镜观察有无病理改 变，特别是增生、癌前改变或癌变。观察2组的平均生存时间、肿瘤发生情况等。　　3.统计学处理方法:数据以SPSS 8.0软件进行方差分析。　　二、结果　　1.平均存活时间：实验组平均存活(361.2±123.7)d，对照组为(368.1±114.5)d, 差异无显著性(P>0.05)。50%以上的动物在1年以后死亡。　　2.病理改变：大体观察实验组部分动物胃内可见蓝色的 石棉斑。实验组、对照组各有8只和1 0只动物可见肺、肝、肠

2007-2012年云南省大姚县胸膜间皮瘤死亡分析

目的 了解云南省大姚县2007-2012年恶性肿瘤,特别是胸膜间皮瘤病例的死亡情况,分析其与青石棉暴露之间的关系.为当地政府制定科学合理的青石棉污染防治措施提供依据.方法 收集大姚县2007-2012年恶性肿瘤病例死亡情况,计算各年恶性肿瘤死亡率,并计算各类癌症标准化死亡率比(SMR),同时分析胸膜间皮瘤死亡病例在大姚县各乡镇分布情况.结果 大姚县肝癌SMR为1.23;胸膜间皮瘤SMR达到5.63;2010-2012年胸膜间皮瘤死亡率高于2007-2009年(P＜0.01).胸膜间皮瘤的死亡人数分布与青石棉污染区分布基本一致.结论 大姚县胸膜间皮瘤死亡率较上世纪有所下降,当地应继续加强青石棉的综合治理.

大姚县环境接触青石棉185例X线胸片分析

大姚县环境接触青石棉所致恶性胸膜间皮瘤,石棉肺及胸膜斑已经被证实[1,2].有关青石棉污染的流行病学调查也曾报道过[1～4].笔者搜集1988年1月～1997年12月间资料完整的X线胸片185例进行回顾性分析,报道如下.

石棉性胸膜斑的X射线计算机断层扫描分析

为了解青石棉致胸膜斑的情况,参照1986年国家尘肺诊断标准,对常规X射线计算机断层扫描(CT)加部分高分辨率CT检查的122例病例进行分析,其中透明胸膜斑57例,钙化胸膜斑15例,混合型胸膜斑50例.按Donise标准,轻度15例,中度54例,重度43例,胸膜广泛增厚10例.结合CT检查情况进行了讨论.

青石棉处理的肺泡巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞的作用

为了探讨青石棉对肺损伤的机理,用兔肺泡巨噬细胞(AM)和人胚肺成纤维细胞(HEPF)组成体外模型,采用MTT颜色反映法测定青石棉处理兔AM24h后的培养上清液刺激HEPF细胞增殖情况,同时用标准石英作为阳性对照,二氧化钛作为阴性对照,以不用粉尘处理的AM培养上清液作为正常对照.结果发现青石棉能明显刺激HEPF增殖,呈剂量-效应关系(P＜0.01).青石棉浓度在100μg/ml时,青石棉组HEPF的净增殖率达60.91%,是正常对照组的3.48倍,高于阳性对照和阴性对照100μg/ml青石棉处理兔AM的培养上清液的不同稀释度对HEPF增殖的影响不同,随稀释度的加大,其促细胞增殖的能力越弱,以1:2稀释度作用强,明显高于阳性对照和阴性对照(P＜0.01).提示青石棉处理肺泡巨噬细胞的培养上清液中存在有促进肺成纤维细胞增殖的生物活性物质,若能阻止这些生物活性物质的合成和分泌将对石棉相关疾病的预防和治疗具有重要意义.

青石棉致胸膜间皮瘤42例临床分析

分析42例资料完整的接触青石棉致胸膜间皮瘤病例的临床症状及诊断方法,并结合该病的发病机理,探讨本地区胸膜间皮瘤高发的原因.

血管生成因子在恶性胸膜间皮瘤中的表达

恶性胸膜间皮瘤（ Malignant pleural mesothelioma，MPM）是发生于胸膜间皮细胞的一种少见恶性肿瘤，接触石棉是MPM的主要致病原因，云南省大姚县二十分之一地表覆盖青石棉［1］，是世界上少有环境致MPM高发区。目前认为肿瘤的生长、发展和转移均呈血管依赖性［2］，本研究通过免疫组织化学法评估MPM患者肿瘤组织中微血管密度及相关血管生成因子的表达情况，进一步揭示MPM与血管生成之间的关系。

环境低浓度石棉暴露与肺癌危险性的巢式病例对照研究

目的探讨云南省大姚县环境低浓度青石棉暴露与肺癌之间的关联以及肺癌高发的主要危险因素,为当地的肺癌防制提供依据.方法采用巢式病例对照研究方法,从队列中获得53例肺癌病例,按1∶3的比例分别匹配以性别相同、年龄相当的对照.结果单因素条件logistic回归分析发现石棉环境污染、吸烟、饮酒、喝茶与肺癌有统计学关联,石棉环境污染的各种形式中,只有使用石棉炉对肺癌发生有显著性意义.用多因素条件logistic回归进一步分析,使用石棉炉和吸烟与肺癌有统计学关联,OR值分别是3.38(95%CI 1.43～7.95)和2.62(95%CI 1.08～6.56),其他各因素对肺癌的影响未发现有显著性意义.对吸烟与使用石棉炉的交互作用进行相乘模型的拟合,未发现两因素存在相乘模型的交互作用(P=0.310).相加模型交互作用分析结果显示,吸烟和使用石棉炉对肺癌发病的影响可能存在着相加模型的交互作用.结论吸烟和使用石棉炉是当地肺癌高发的主要危险因素,且两者存在着相加模型的交互作用.

大姚县青石棉天然暴露区主要恶性肿瘤死亡及其危险因素调查

目的:探讨云南省大姚县低剂量青石棉相关暴露与当地恶性肿瘤死亡的关联,为制定当地恶性肿瘤的防治策略提供依据.方法:对大姚县部分青石棉污染区的农村居民进行27年回顾性队列(1984年2月至2011年4日)研究.结果:观察队列共1 249人,随访总人年数为28 848.27人年,其中443人死亡,占全部随访对象的35.47%.队列中有121人死于恶性肿瘤,总死亡率为1 535.64/10万人年.居恶性肿瘤死因顺位首位的是肝癌,共29例,粗死亡率为100.53/10万人年(标化死亡率为51.22/10万人年);居第2位的是肺部恶性肿瘤(不含胸膜间皮瘤),共27例,粗死亡率为93.59/10万人年(标化死亡率为41.05/10万人年);居第3位的是胸膜间皮瘤,共26例,粗死亡率为90.13/10万人年(标化死亡率为54.36/10万人年).肠癌与胃癌死亡率分别为45.06/10万人年(标化死亡率为23.68/10万人年)和41.60/10万人年(标化死亡率为18.27/10万人年).多因素分析显示,当地主要青石棉暴露因素(生产石棉炉、使用石棉炉数量、石棉修路和居住时间)均与恶性肿瘤死亡相关.而且男性的相对危险度高于女性.结论:消化道恶性肿瘤已成为严重危害大姚县居民健康的首位癌种,以肝癌、肠癌及胃癌为主,青石棉相关暴露是当地恶性肿瘤高发的主要危险因素.

青石棉诱导后BEAS-2B细胞磷酸化EGFR的表达

目的:研究青石棉作用于人呼吸道上皮BEAS-2B细胞后表皮生长因子受体(EGFR)的表达.方法:青石棉刺激BEAS-2B细胞30 min,用免疫荧光探针定位磷酸化EGFR;另取BEAS-2B细胞,分别以培养液(空白对照)、青石棉、EGF(阳性对照)刺激30 min和120 min,以Western blot法检测细胞裂解液中的总EGFR和磷酸化EGFR的水平.结果:磷酸化EGFR主要定位于细胞膜表面.青石棉刺激BEAS-2B细胞30 min和120 min,磷酸化EGFR水平(7 949.0±765.1,5 286.7±162.4)高于空白对照组(163.0±67.8,881.7±162.0)(P＜0.05),且120min时磷酸化EGFR水平较30 min有所下降(P＜0.05);而总EGFR水平无明显变化.结论:青石棉可激活BEAS-2B细胞膜表面受体EGFR的磷酸化.