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细菌生物膜——细菌耐药的利器
近年来,由于抗生素的种类不断增多以及抗生素的大量使用,细菌耐药、超级细菌的报道也屡见不鲜.细菌耐药严重威胁着人类的健康,导致很多慢性感染性疾病反复发作而难以控制,这其中与一种叫做细菌生物膜的细菌群落有着密切的关系.
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老年根面龋牙菌斑细菌组成的聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳分析
目的 研究老年人根面龋牙菌斑内细菌群落构成,以期为今后深入研究根面龋的病因提供依据.方法 提取9例60岁以上根面龋患者9颗患牙的牙菌斑细菌DNA,应用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳( PCR-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术扩增,克隆、测序并与核酸序列数据库进行比对,鉴定优势菌属种类.结果 老年人根面龋牙菌斑中共检测到114个细菌基因型,分属于不动杆菌属[0.9％ (1/114)]、放线杆菌属[1.8％ (2/114)]、放线菌属[15.8％( 18/114)]、Aggregatibacter菌属[0.9％(1/114)]、二氧化碳嗜纤维菌属[14.0％ (16/114)]、棒状杆菌属[0.9％ (1/114)]、嗜血杆菌属[0.9％ (1/114)]、动弯杆菌属[0.9％ (1/114)]、纳西杆菌属[0.9％(1/114)]、奈瑟球菌属[10.5％ (12/114)]、卟啉单胞菌属[0.9％ (1/114)]、普氏菌属[12.3％(14/114)]、新月单胞菌属[6.1％ (7/114)]、葡萄球菌属[1.8％ (2/114)]、口腔链球菌群[6.1％(7/114)]和变异链球菌群[7.9％ (9/114)]、Tannerella菌属[0.9％ (1/114)]、密螺旋体[1.8％(2/114)]和韦永球菌属[10.5％ (12/114)],以及两例未获培养的不知名菌种[1.8％ (2/114)].未获培养的基因型占总数的19.3％(22/114).革兰阳性细菌的基因型占31.6％(36/114),革兰阴性细菌的基因型占66.7％ (76/114).结论 老年人根面龋牙菌斑中细菌基因型多且分布较广,以革兰阴性菌占多数；未发现特异性致龋细菌基因型.
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体味的产生及其作用
气味由新陈代谢产生,不同皮肤腺的分泌物以及身体不同部位湿度和氧浓度决定了皮肤细菌群落,不同种类及密度的细菌和皮肤分泌物的相互作用产生不同气味.免疫基因--蛋白质的编码决定了人体新陈代谢和皮肤腺产生的特异性物质,从而决定了身体的特异性气味.人类可根据气味特征来鉴别不同的人,人体气味内部含有标志人类情绪的信息,人体气味尤其是腋部气味具有信息素的功能,气味可改变月经周期,协调男女身心健康.
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117例梗阻性黄疸患者胆汁细菌群落限制性片段多态性分析
目的 分析梗阻性黄疸患者胆汁中的细菌群落结构.方法 选取2010年10月至2013年10月梗阻性黄疸患者117例,其胆汁细菌常规培养和厌氧菌培养结果均为阴性.每例抽取胆汁10 mL,提取胆汁细菌群落DNA,扩增胆汁细菌16S rDNA,进行终端限制性片段长度多态性(T-RFLP)分析,构建克隆文库并行测序和系统分析.研究数据行卡方检验.结果 117例患者中50例胆汁细菌16S rDNA为阳性,总阳性率为42.7％.结石和肿瘤引起的梗阻中胆汁细菌16S rDNA的阳性率分别为97.3％(36/37)和17.5％(14/80),差异有统计学意义(x2=65.828,P＜0.01).肝门部和肝门部以上及肝门部以下的梗阻中胆汁细菌16S rDNA的阳性率分别为43.3％(13/30)和42.5％(37/87),差异无统计学意义(P＞0.05).结石引起梗阻的细菌群落主要为肠杆菌科(埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、变形菌属)、链球菌科(链球菌属)、消化球菌科(消化菌属、消化链球菌属)、微球菌科(葡萄球菌属)、丙酸杆菌科(丙酸杆菌属)、奈瑟球菌科(不动杆菌属).肿瘤引起梗阻的细菌群落主要为肠杆菌科(克雷伯菌属、埃希菌属、伤寒沙门菌)和微球菌科(葡萄球菌属).结论 采用T-RFLP方法分析16S rDNA克隆片段能有效评估梗阻性黄疸患者胆汁中细菌群落的存在情况和多样性.
关键词： 末端限制性片段长度多态性 黄疸 梗阻性 16S rDNA 细菌群落 -
老年根面龋牙菌斑群落组成的多样性观察
目的:对老年人牙菌斑进行群落分析,以了解根面龋微生境构成的多样性.方法:提取25例不同龋敏感性老年人牙菌斑细菌DNA,使用PCR-DGGE技术分析细菌遗传多样性.采用SPSS12.0软件包对不同组间细菌基因型数量做方差分析.结果:分布于根龋组牙菌斑内的细菌基因型比另外2组显著增多.冠龋组与无龋组间无显著性差异.结论:老年人根龋患者牙菌斑细菌群落多样性明显高于冠龋患者及无龋者.
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不同龋敏感儿童牙菌斑内口腔链球菌的PCR-DGGE分析
目的 应用PCR-变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,分析不同龋敏感儿童牙菌斑内口腔链球菌菌群及其菌种组成的多样性.方法 牙菌斑组织取自45例学龄前儿童,根据乳牙龋失补牙面(dmfs)指数分为无龋(dmfs=0)、中龋(dmfs=4～6)和高龋(dmfs＞8)(n=15).分别提取细菌总DNA,进行链球菌属rnp B特征序列的PCR扩增及DGGE分析,克隆、测序并与核酸序列数据库的序列进行比对.结果 无龋儿童菌斑中口腔链球菌菌群的基因型分布均显著高于中龋和高龋儿童(P＜0.05);变异链球菌群是高龋组中的优势菌群.结论 PCR-DGGE技术结合rnp B基因克隆文库分析可较灵敏、直观地反映牙菌斑中链球菌属各菌群及其菌种的组成情况.
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闷热天,筷子“得病”不是小事
别让筷子“超期服役”我们天天都要使用筷子,但很多人不知道,筷子也会“生病”.辽宁省人民医院微生物室前不久对居民家里、单位食堂的5种筷子的细菌情况进行了检测:金属筷子:孙女士家使用2个月.细菌含量:0.7cfu/cm2(细菌群落/每平方厘米).漆筷子:王先生家使用2个月.细菌含量:2.8cfu/cm2.竹筷子:张女士家使用2年.细菌含量:16.3cfu/cm2.
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阴道菌群失调的“杀手”
了解阴道生态平衡正常情况下,育龄妇女阴道内寄居着许多细菌群落,如乳杆菌、肠球菌、表皮葡萄球菌、加德纳菌、大肠杆菌,以及支原体及假丝酵母菌等,形成阴道正常微生物群.阴道与这些菌群之间形成生态平衡,并不致病.在阴道正常微生物群中,产生过氧化氢(H2O2)的乳杆菌为优势菌,乳杆菌与雌激素、阴道pH值三者相辅相成,维持着阴道生态平衡.生理情况下,阴道上皮在雌激素作用下变厚,糖原含量增加,并经阴道乳杆菌作用转化为乳酸,这样就维持了阴道正常的酸性环境(pH值多在3.8～4.4),抑制其它病原体的生长,称为阴道自净作用.乳杆菌除了维持阴道的酸性环境外,其产生的过氧化氢及抗微生物因子,可抑制或杀灭其它致病菌.
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不同龋状况母子间口腔微生物群落结构分析
目的:应用PCR-DGGE (变性梯度凝胶电泳)技术,分析20对不同龋状况母子口腔唾液中微生物群落组成的多样性.方法:分别采集20名不同龋状况儿童及母亲的唾液样本,提取细菌总DNA,进行16S rDNA的PCR扩增及DGGE,克隆测序分析.结果:母子口腔唾液中分别检出42 、48个菌种,其共同菌种为37个,归属于16个菌属,同时,检出新菌种Megasphaera spp.,且在无龋儿童及高龋母亲唾液中分别检出Abiotrophia spp.和Olsenella spp.两个特异菌属.无龋组母子唾液中嗜血菌属的相对数量显著高于高龋组(P＜0.001);无龋儿童携带的放线菌属相对数量也多于高龋组(P＜0.001);而链球菌属,奈瑟菌属低于高龋组(P＜0.001),而高龋组母亲口腔微生物中相对数量多的为乳杆菌属,其次为放线菌属,奈瑟菌属,与无龋组比较差异显著(P＜0.001).结论:母子口腔唾液菌群组成具有多样性,且随龋状况不同而有所差异.
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PCR-DGGE初步分析双胞胎儿童牙菌斑细菌群落组成
目的:应用PCR-DGGE技术对双胞胎儿童牙菌斑细菌群落组成进行初步分析.方法:牙菌斑样本取自6对双胞胎儿童,年龄3.5～5.5岁,共17份.分别提取细菌总DNA,PCR扩增16S rDNA V3可变区,产物经DGGE指纹图谱分析其组成.结果:DGGE图谱显示,无龋和患龋双胞胎儿童牙菌斑菌属分布存在差异.结论:PCR-DGGE技术可较直观、灵敏地反应牙菌斑菌属的组成情况.
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肠道菌群与人体健康
在我们人体的皮肤、黏膜和肠道上,有大量的细菌和人体共生,它们的数量远远超过细胞和基因的数量.尽管一部分细菌有致病性,但绝大多数是无害甚至是有益的.这些细菌被称为细菌群落,它们就像器官一样行使实质性功能.生活在人体肠道内数以万计的细菌被统称为肠道菌群,它们和人体有着密不可分的互利共生关系.巴斯德曾提出过非常有远见的假设:我们人类身体的健康与肠内微生物菌群是密切联系在一起的,后来的科学家研究发现证实了巴斯德的假设.事实上,人类在进化过程中,已经与肠道微生物形成了一种共生关系, 肠道微生物的个体差异影响着宿主的健康.许多重要疾病的发生、发展都与肠道菌群的组成失调有着密切关系.
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母子间口腔群落结构的相关性分析
目的：应用聚合酶链反应（PCR）-变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术，分析30对母子口腔唾液中菌群的相似性。方法???选取3~5岁高龋、中龋和无龋儿童及其母亲各10对作为研究对象，取其非刺激性全唾液，分别提取细菌总DNA，进行16S?rRNA的PCR扩增及DGGE分析。结果???母子间口腔菌群组成具高度相似性。其中，无龋组母子间配对相似系数明显低于高龋组及中龋组（P<0.05）；高龋儿童的母亲平均龋失补牙面数（DMFS）明显高于中龋和无龋儿童的母亲（P<0.05）。结论母亲是儿童口腔菌群获得的主要来源。
