首页 > 文献资料
-
MicroRNA调控肿瘤耐药的研究进展
化学药物治疗（简称化疗）是目前治疗恶性肿瘤的主要手段之一，但肿瘤的多药耐药（multidurg resistance, MDR）是临床化疗失败的主要原因之一，然而肿瘤的耐药机制至今尚未被完全阐明。microRNA是近年来生命科学新的研究热点之一，microRNA通过在转录后水平调控基因表达而参与调控一系列的生命活动，包括细胞增殖、凋亡、脂肪代谢、神经元发育、激素分泌、肿瘤血管生成、干细胞分化、肿瘤细胞浸润及转移等多种生理和病理过程。近的研究表明，microRNA对多基因表达的调控具有高效性和特异性，对靶基因的异常调控可能构成肿瘤耐药机制，是肿瘤耐药复杂性调控的重要构成部分。因此，对microRNA与肿瘤耐药性的研究具有现实意义。本文对近年来肿瘤耐药性的研究，microRNA调控肿瘤耐药机制及microRNA作为肿瘤耐药治疗潜在靶点作一综述。
-
microRNA与肺癌
目前,我国肺癌的发病率及死亡率迅速增高,已跃居城市人口恶性肿瘤死亡原因的第一位.microRNA(miRNA)是一类新近发现的长约18-25个核苷酸的非编码小分子RNA,是哺乳动物基因组中为丰富的调节基因之一,可能调控着至少1/3的人类编码蛋白基因[1-3].近年研究证明microRNA的表达失控与肺癌的发生发展密切相关.本文就microRNA在肺癌研究中的进展做一综述.
-
肺癌相关microRNA的研究进展
MicroRNA(miRNA)是一类高度保守、长度很短的非编码调控单链RNA,约20 nt-24 nt,通过与目标mRNA互补配对导致mRNA降解或抑制转录后翻译诱导基因沉默.miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括发育、造血、器官形成、凋亡和细胞增殖、癌症的发生、发展.
-
肺癌相关microRNA的研究进展
MicroRNA(miRNA)是一类高度保守、长度很短的非编码调控单链RNA,约20 nt-24 nt,通过与目标mRNA互补配对导致mRNA降解或抑制转录后翻译诱导基因沉默.miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括发育、造血、器官形成、凋亡和细胞增殖、癌症的发生、发展.
-
微小RNA研究进展
微小RNA(miRNA)是参与基因转录后水平调控的非编码小分子RNA.人类基因中大约有3%编码miRNAs,而编码蛋白的基因中30%受到miRNAs的调控.miRNAs在多种生物进程中起到关键作用,包括调节发育、细胞增殖、分化和凋亡,相应的miRNAs的表达变化与包括肿瘤在内的多种疾病有关.本文综述miRNAs的生物学及其与肿瘤的联系,并讨论了miRNAs的研究方法.
-
系统性鉴定长非编码RNA MALAT1调控的微小RNA
背景与目的长非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）在肿瘤的发生、侵袭转移等过程中发挥着重要的调控作用。本研究通过实验和生物信息学手段系统性研究lncRNA MALAT1调控的微小RNA（microRNA, miRNA）。方法设计特异性敲减MALAT1的反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides, ASO），在A549细胞中敲减MALAT1，通过TqaMan Low Density Array（TLDA）芯片研究敲减MALAT1后miRNA表达变化；使用基因集富集分析（gene set enrichment analysis, GSEA）方法分析敲减MALAT1之后差异表达基因，寻找富集的miRNA。结果 ASO有效降低了MALAT1表达，敲减MALAT1之后153个miRNA表达显著变化，其中131个miRNA表达上调，22个miRNA表达下调。在A549细胞中敲减MALAT1后，458个基因发生显著差异表达，GSEA分析发现多个miRNA在差异表达基因中被显著富集。对TLDA和GSEA数据取交集并进一步分析确认28个被MALAT1调控的miRNA。结论本研究系统鉴定了MALAT1对miRNA的调控，为进一步研究提供了基础。
-
miR-614通过调控靶基因PSA表达抑制人肺癌细胞的侵袭和增殖能力
背景与目的 MicroRNAs（miRNAs）是一种非编码的小分子RNA，在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用，各种miRNAs对肺癌的作用及机制仍需进一步阐明。本研究探讨了miR-614对肺癌细胞增殖和侵袭的作用及机制。方法应用实时定量PCR检测miR-614在高低不同转移能力肺癌PGCL3和PGLH7细胞中的表达水平；脂质体2000介导分别转染miR-614类似物和抑制物入PGCL3和PGLH7细胞，应用Transwell实验检测miR-614对肺癌细胞侵袭的作用；应用CCK8实验和BrdU掺入实验检测miR-614对肺癌细胞增殖的作用；生物信息学软件预测miR-614潜在的靶基因，双荧光素酶报告基因验证miR-614是否作用于嘌呤霉素敏感性氨肽酶（puromycin-sensitive aminopeptidase, PSA）mRNA的3’UTR区预测靶位；Western blot检测PSA蛋白水平。结果 miR-614在高转移肺癌细胞PGCL3中的表达水平明显低于其在低转移肺癌细胞PGLH7的表达水平；体外侵袭实验结果显示，miR-614可抑制肺癌细胞侵袭；细胞增殖实验结果显示，miR-614可抑制肺癌细胞增殖；miRanda软件预测并经双荧光素酶报告基因验证PSA是miR-614的靶基因；miR-614类似物可下调PSA蛋白表达，miR-614抑制物可上调PSA蛋白表达。结论 miR-614过表达抑制了人肺癌细胞的侵袭和增殖能力，PSA是miR-614下游靶基因之一。
关键词： 肺肿瘤 microRNA 嘌呤霉素敏感性氨肽酶 侵袭 增殖 -
肺腺癌吉非替尼获得性耐药相关microRNAs的筛选鉴定
背景与目的 肺腺癌吉非替尼获得性耐药严重影响了肺癌的治疗效果,microRNA在肺腺癌吉非替尼获得性耐药中的作用及其机制尚不清楚.本研究筛选与肺腺癌获得性吉非替尼耐药相关的microRNAs.方法 以吉非替尼敏感肺癌细胞PC9与吉非替尼耐药肺癌细胞PC9/AB11为细胞模型,观察二者的形态学差异,流式细胞仪检测二者的细胞周期,计算它们的倍增时间,MTF法检测吉非替尼对两种细胞的IC50,应用microRNA芯片检测和筛选与吉非替尼耐药相关的microRNAs,并进行real-time PCR验证.结果 PC9细胞与PC9/AB11细胞形态差异明显,在细胞周期、倍增时间和吉非替尼对其的IC50上均具有统计学差异.microRNA芯片结果 显示,与PC9相比,耐药肺癌细胞株PC9/AB11中有4个microRNAs表达水平明显上调,有9个microRNAs表达水平明显下调.经real-time PCR验证,microRNA-138在PC9/AB11中表达明显下调,与芯片结果 一致.结论 PC9和PC9/AB11细胞株microRNA表达谱存在明显差异,初步筛选到了13个与肺腺癌吉非替尼耐药密切相关的microRNAs,为进一步深人研究microRNA在肺腺癌吉非替尼获得性耐药中的作用及其分子机制提供了实验依据和理论基础.
-
hsa-miR-125a-5p促进非小细胞肺癌细胞侵袭
背景与目的 microRNAs(miRNAs)是小的非编码RNA,它们通过与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后调控靶基因的表达.尽管一些失常的miRNA调节机制在人许多恶性肿瘤中被发现,但是,has-miR-125a-5p在肺癌细胞中的表达及功能还尚不清楚.本研究探讨了has-miR-125a-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达及其与肺癌细胞侵袭的关系.方法 应用real-time PCR的方法检测了has-miR-125a-5p在6种肺癌细胞系中的表达情况,并在EAS49细胞中分别转染正义的has-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核苷酸24 h、36 h、48 h、60 h和72 h后检测has-miR-125a-5p的表达情况.同时应用transwell小室观察上调has-miR-125a-5p后,A549细胞侵袭能力的变化.结果 has-miR-125a-5p在6种肺癌细胞系中低表达,以LH7、NCI-H460、SPC-A-1和A549细胞为明显.在A549细胞中,转染正义的has-miR-125a-5p 2'O-甲基寡核苷酸36h后,has-miR-125a-5p表达高,并进一步发现.上调has-miR-125a-5p后A549和NCI,H460细胞侵袭能力增强.结论 has-miR-125a-5p在肺癌细胞中低表达,但上调has-mig-125a-5p能够促进A549和NCI-H460细胞侵袭.
关键词： microRNA miRNA hsa-miR-125a-5p 肺肿瘤 侵袭 -
hsa-miR-125a-5p通过上调Rock-1表达促进肺癌细胞侵袭
背景与目的 MicroRNAs(miRNAs)是广泛存在于真核生物体中的内源性非编码的小分子RNA,通过与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后调控靶基因的表达,影响了生物的许多复杂的生命过程.本研究探讨了hsa-miR-125a-5p促进肺癌细胞侵袭的作用机制.方法 应用microRNA.org靶基因预测资源预测hsa-miR-125a-5p的靶基因及其结合位点,并进一步根据预测结果用RT-PCR和Western blot的方法榆测了Rock-1的mRNA及蛋白的表达情况.用Rock-1抗体阻断的方法,检测转染正义的hsa-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核苷酸后A549细胞侵袭能力的变化.结果 转染正义的hsa-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核苷酸36h后,A549细胞中Rocb-1 mRNA和蛋白表达均增加,在转染反义的hsa-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核苷酸的A549细胞中则减少.Transwell小室的结果显示,与未阻断组相比较,阻断Rock-1后,转染正义的hsa-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核廿酸的A549细胞侵袭能力减弱.结论 hsa-miR-125a-5p能够上调Rock-1的表达,并促进肺癌细胞侵袭.
关键词： microRNA hsa-miR-125a-5p 肺肿瘤 侵袭 -
探索microRNAs在人类癌症中的治疗潜能
大量研究表明microRNAs(miRNAs )的异常调节与癌症的发生和进展相关.新近研究发现了若干在各种人类癌症中具有可作为治疗靶标巨大潜能的miRNAs.这些肿瘤miRNAs的抑制或过表达可调节相关基因的表达,从而抑制各种癌症的增殖或转移.一些miRNAs可逆转上皮-间质转化的表型,有些则可用于增强细胞对抗癌药物的敏感性.它们大部分的抗癌作用均已在临床前动物模型中得到验证.miRNA治疗的一个优点是它可靶向作用于不同信号通路中的许多基因,但同时亦伴有许多未知的脱靶效应的缺点.此外,对于有效的miRNA治疗来说,成功转运也是一个主要的挑战.然而,新近研究的发现及药物转运系统的高速发展为该领域的飞跃展现了一个乐观的前景.
-
MicroRNA在宫颈癌中的诊断和治疗研究进展
宫颈癌是全球妇女中常见的恶性肿瘤之一.microRNA在细胞的增殖、分化和凋亡过程中发挥着调节器的功能.microRNA涉及原癌基因的激活与抑癌基因的失活,其发生与发展过程是多因素、多步骤的.目前国内外大量研究证实miRNAs上调充当癌基因或是下调充当抑癌基因作用于宫颈癌转移、分化,有助于我们找到治疗宫颈癌的新方法,本文microRNA在宫颈癌的诊断和治疗研究进展作出一综述.
-
microRNA在慢性乙型肝炎中作用研究进展
慢性乙型肝炎是我国主要传染病之一。microRNA是近年来研究的热点，主要在转录后水平上调控基因的表达。肝脏中存在大量microRNA，据研究证实，microRNA在慢性乙型肝炎发生发展过程中有及其重要的作用。本文就microRNA在慢性乙型肝炎中的作用进行综述。
-
心脏干细胞基础研究和临床应用回顾与展望
CSCs对心脏干细胞(CardiacStemCells,CSCs)的发现打破了传统对心脏是“终分化不可再生”器官的认识.经过大量实验研究,目前已经对CSCs有了初步的认识,包括CSCs的形态特征,迁移性,具有代表性的细胞标记物,以及CSCs的分化潜能.心脏,从来都被认为是一个终分化的器官,临床上一些疾病,例如心肌梗死、心力衰竭、扩张性心肌病、病窦综合症等造成的心肌损伤都是不可逆的,临床治疗中仍不能找到有效的方法“获取”新的心肌来代替受损的心肌.
-
微小RNA对房颤心脏重构方面的作用研究进展
心脏重构包括心脏的电重构和结构重构,与房颤发生互为因果.目前普遍认为,心脏离子通道的重构由各种离子通道电流密度及通道动力学的改变引起,它是电重构的基础.从分子生物学的角度来讲,心脏重构主要是相应通道的mRNA及蛋白质的表达改变,而microRNA是在翻译水平调控mRNA,其表达的改变必然引起相应mRNA及蛋白质的表达改变,从而影响房颤的发生、发展.结构重构又包括肥厚和纤维化两种形式,但它们并不是截然分开的.本篇综述旨在通过总结、讨论近年来研究中发现的microR-NA在房颤发生、发展中对心脏病理重构的作用以及调控相应microRNA表达水平对房颤的影响等方面问题,为microRNA在房颤的心脏重构方面进一步研究提供潜在的证据.
-
MicroRNA与肝癌发生发展关系研究进展
MicroRNA(miRNA)是一类内源性非编码的小RNA,通过与目标mRNA互补配对,涉及靶基因的转录后调控，在细胞的增殖、分化和凋亡等方面发挥重要的生理作用。利用实验生物学及生物信息学方法对与肿瘤相关的miRNA进行研究成为当前的热点。近多项研究表明miRNA广泛参与肝癌的发生、发展、转移、多药耐药。本文就microRNA与肝癌发生发展之间的关系作一综述。
-
microRNA启动子区甲基化调控对人肺癌细胞A549增殖、迁移、侵袭的影响
目的 研究microRNA启动子区甲基化水平的变化对几种microRNAs (miRNA34a、miRNA34b、miRNA148a、miRNA203a)表达的影响,并进一步研究该甲基化调控对人肺癌细胞A549增殖、迁移以及侵袭能力的影响.方法 不同浓度的去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理人肺癌细胞A549,分别作用24 h、48 h、72 h,采用CCK8法检测细胞增殖情况,计算增殖抑制率.20 μmol/L 5-Aza-CdR处理A549细胞72 h,通过甲基化特异性PCR(MSP)检测A549细胞相关miRNAs启动子甲基化水平的变化;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测A549细胞相关miRNAs表达水平的变化.20μmol/L 5-Aza-CdR处理A549细胞0h、24 h、48 h,采用划痕实验检测细胞迁移能力(计算细胞在24 h和48 h的划痕愈合率);作用48 h,采用Transwell检测细胞侵袭能力.结果 CCK8结果显示,随着5-Aza-CdR的处理浓度升高、时间延长,A549细胞的增殖抑制率逐渐增加.经5-Aza-CdR去甲基化处理后,MSP结果表明,实验组相对于对照组甲基化引物扩增条带减弱,而非甲基化引物扩增条带增强;Real-time PCR结果显示,相关miRNAs表达水平升高(P＜0.05).由划痕实验和Transwell检测结果揭示,经5-Aza-CdR处理后,A549细胞的生长愈合能力降低(P＜0.05),并且侵袭到Transwell小室滤膜下表面的细胞数亦减少(P＜0.05).结论 人肺癌细胞A549经5-Aza-CdR去甲基化处理后,miRNAs表达水平升高,进一步抑制肺癌细胞的增殖、迁移以及侵袭能力.
-
甲基化调控microRNA表达影响胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的研究
目的 研究基因启动子区甲基化对胰腺癌相关microRNA(miR34a、miR34b、miR148a、miR203a)表达水平的调控,及其对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响.方法 通过5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)去甲基化处理胰腺癌细胞MIAPaca-2,使用甲基化特异性PCR (methylation-specific PCR,MSP)法检测60 μmol/L5-Aza-CdR处理组及0μmol/L对照组MIAPaca-2细胞目标microRNA启动子甲基化水平的变化;用荧光实时定量PCR检测处理组及对照组目标microRNA表达水平的改变;CCK-8法、划痕实验以及Transwell法检测胰腺癌细胞去甲基化处理后处理组和对照组增殖、迁移、侵袭能力的变化.结果 MSP法结果显示处理组较未处理组目标microRNA甲基化M条带灰度值减弱,非甲基化U条带灰度值增强,处理组目标microRNA启动子甲基化程度较对照组减弱.荧光实时定量PCR结果显示处理组较未处理组目标microRNA相对表达量升高(P＜0.05),处理组microRNA的表达水平随去甲基化处理而升高.CCK-8法显示随着药物处理浓度的增加,处理组细胞抑制率增高,去甲基化处理抑制了胰腺癌细胞的增殖能力.划痕实验结果显示处理组较未处理组细胞伤口愈合率降低(P＜0.01),去甲基化处理降低了胰腺癌细胞的迁移能力.Transwell法结果显示处理组较未处理组穿膜细胞数减少(P＜0.01),去甲基化处理降低了胰腺癌细胞的侵袭能力.结论 肿瘤细胞去甲基化处理,导致4种目标microRNA高表达,抑制了胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力.
-
正常结直肠组织、腺瘤、结直肠腺癌中miRNAs的表达差异
目的 探讨6种microRNA(miRNA)在正常结直肠组织、管状腺瘤、管状绒毛状腺瘤及腺癌中的表达差异.方法 共搜集44例管状腺瘤、16例管状绒毛状腺瘤、20例腺癌患者的病变组织及其旁正常组织标本,应用Real-time PCR方法分别检测miR-1、miR-9、miR-31、miR-135a、miR-137、miR-145共6种miRNA的表达量,分析表达差异.结果 ①管状腺瘤中miR-1、miR-9、miR-137、miR-145的表达均低于瘤旁正常组织,miR-31、miR-135a的表达均高于瘤旁正常组织,其中miR-9、miR-135a差异有统计学意义(P＜0.05),miR-1、miR-137、miR-145、miR-31差异无统计学意义(P＞0.05).②管状绒毛状腺瘤中miR-1、miR-137、miR-145的表达均低于瘤旁正常组织,miR-9、miR-135a、miR-31的表达均高于瘤旁正常组织,差异均有统计学意义(P＜0.05).③结直肠腺癌中miR-1、miR-9、miR-137、miR-145的表达均低于癌旁正常组织,miR-31、miR-135a的表达高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 正常结直肠组织、结直肠腺瘤、结直肠癌中miRNA的差异表达,提示上述miRNA在从正常结直肠组织到结直肠腺瘤、结直肠腺瘤到结直肠癌的发生发展过程中可能发挥作用,为miRNA作为疾病预测、预后指标提供了实验基础.
-
MicroRNA影响房颤电生理重构的研究进展
心房颤动在心脏病发病率、致死率以及延长住院时间、加重社会经济负担等方面的影响比其它心律失常更严重。本文从心房颤动基本电生理改变、电重构以及MicroRNA影响电重构研究进展等方面进行回顾，证明MicroRNA在房颤发生过程中的重要作用，希望能使MicroRNA作为潜在的心房颤动的检测指标及治疗靶点成为可能。
