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化学诱变剂诱发基因突变分子机理研究
应用一将突变靶基因与哺乳细胞基因组DNA相分离的实验体系,证明化学诱变剂诱发的基因突变可发生在损伤碱基以外的正常序列中(非定标性突变),并有突变谱特征和突变好发的序列特异性.它的发生依存于化学诱变剂诱发的基因表达改变,应用mRNA差异显示和反义技术分离到两个基因表达序列标识,其相关基因表达被阻断后可分别促进和抑制化学诱变剂诱发的非定标性突变.用体外DNA复制技术证明其发生基础是由于化学诱变剂引发细胞DNA复制保真度的下降,而细胞错配修复功能未发现异常,但DNA聚合酶酶谱发生改变.还证明它的发生可因细胞应激信号通路激活剂所促进,在化学诱变剂作用后有蛋白磷酸化谱和蛋白酪氨酸残基磷酸化谱的改变以及应激激活蛋白激酶的激活和cAMP浓度升高.细胞信号转导通路的激活参与了非定标性突变的发生.
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单细胞凝胶电泳对o-PDA诱导CHL细胞基因组不稳定性的研究
基因组不稳定性是DNA接受损伤因素作用后重要的生物学效应.它不仅使受损细胞的损伤敏感性提高,加速损伤,而且具有传递性,即:基因组不稳定性所致的遗传效应并不是出现在受照细胞本身,而是以加强自发突变的形式表现在受照的子代细胞中[1].邻苯二胺是药物合成、染料、杀虫剂生产过程中的一种较为常见的副产品,是一种强的化学诱变剂[2].本实验主要采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)对化学诱变剂邻苯二胺(o-PDA)处理的CHL细胞及其经再次染毒子代细胞的彗星尾长进行测定与分析,初步探讨o-PDA诱发的CHL细胞基因组不稳定性.
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吸烟及某些化疗药物对微核估算辐射剂量的影响
研究证实,微核(MN)法是继经典染色体畸变(CA)分析之后估算辐射剂量又一可靠的生物剂量计[1-3].但有研究表明,MN率受性别、年龄、吸烟、饮酒等因素和某些化学诱变剂的影响[4],致使MN法用于低剂量估算不够敏感.为阐明吸烟及某些化疗药物对MN剂量估算的干扰,作者对9例吸烟者及10例接受化疗(卡铂及阿霉素)的乳癌病人进行了MN及CA分析.
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化学诱变技术在微生物育种研究中的应用
化学诱变是一种传统而经典的微生物育种技术,不仅在高产工业菌株选育中得到广泛应用,而且近来还用于改造野生菌株代谢功能,以发现新产活性产物.本文简要综述常用化学诱变剂及其作用机制,以及化学诱变技术在微生物育种领域中的新近应用研究进展.
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石棉诱发人外周血淋巴细胞姐妹染色单体交换分析
目前普遍认为,姐妹染色单体交换(SCE)是染色体损害和修复的指标.业已证实SCE是揭示化学诱变剂和致癌物质对染色体作用的极为敏感的指标.1974年,Late研究丝裂霉素C对人的淋巴细胞作用时,发现低得不能使染色体畸变增高的浓度,仍可使SCE有明显的增高,从此SCE的方法被建议用于监测诱变剂对哺乳类染色体的作用.由于SCE的计数容易,正确,观察染色体畸变敏感,它要求的诱变剂的浓度远远低于引起染色体畸变的浓度,且发生率高,观察的细胞数较少,故近年来在毒理学中应用很广,已作为一种体外筛选致癌物和诱变剂的方法.
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化学诱变剂对日本血吸虫成虫作用的初步研究
化学诱变剂MNNG诱导对日本血吸虫成虫形态结构变化(畸变)具有一定的影响.本文主要对其影响程度进行初步研究.具体方法是将虫龄为28天的日本血吸虫成虫,随机分成二组.一组分别用不同浓度的MNNG(1、2、3、4、5、6μg/ml)诱导24hrs;另一组用不同浓度的MNNG(1,2,3μg/ml)分别诱导24,36、48hrs.随后均被彻底清洗,并用851培养基培养,每周在光镜下观察虫体形态结构、活力等的变化,记录虫体死亡率以及虫体畸变率,对畸变成虫拍照并做扫描电镜观察.
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3种化学诱变剂对广金钱草种子萌发的影响
目的 研究迭氮钠(NaN3)、甲基磺酸乙酯(EMS)及秋水仙素诱变处理对广金钱草种子萌发及幼苗生长的影响.方法 采用培养皿培养法,测定经NaN3、EMS及秋水仙素处理后,广金钱草的种子发芽势、发芽率和幼苗根长、下胚轴长.结果 不同质量浓度、不同时间NaN3处理均降低了广金钱草种子发芽势和发芽率,同时抑制了根和下胚轴的生长,20 g/L NaN3浸种3h发芽率为24.00%,仅为清水处理对照(CK)的34.62%.EMS处理后,广金钱草种子发芽率明显降低,抑制作用随时间的延长和质量浓度的增加而增强,20 g/L EMS浸种16h发芽率为17.33%,仅为CK的25%.EMS处理对种子根长影响显著,抑制了下胚轴的生长.经秋水仙素处理后广金钱草幼苗变异率高,变异类型可分为下胚轴膨大根长组、下胚轴膨大根短组和下胚轴上端膨大组,下胚轴粗均极显著高于CK,高为CK的3.08倍.结论 3种试剂佳诱变剂量及时间分别为:15 g/L NaN3浸种3h、15 g/L EMS浸种8h、1.0 g/L秋水仙素浸种16h.
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彗星试验中磨砂玻片的制作
彗星试验(COMET)又称单细胞凝胶电泳(singlecell gel electrophoresis,SCGE)是一种简便而灵敏的在单细胞水平上检测有核细胞DNA损伤与修复的方法,在国外广泛的用于各类化学诱变剂的检测.该试验是把在培养过程中经诱变剂或有毒物质干预后的细胞放在凝胶中制片,然后经裂解、解旋、电泳和漂洗及染色一系列过程,后在荧光显微镜下观察,求出拖尾细胞的百分率及拖尾细胞的尾长进行统计分析.
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突变形成的原核与原核-真核检测系统现状
原核细胞检测系统在检测突变形成的过程中,以其简便、快捷、灵敏、价格相对低廉等特点,起着不可替代的作用,目前较为常用的方法有:回复突变试验、修复试验、SOS相关试验等;supF tRNA转运系统是穿梭于原核与真核细胞之间,当属原核-真核检测系统;现就其中回复突变试验和supF tRNA转运系统及其进展作一综述.