食管癌Eca109细胞的HPV16-E6基因转染条件优化
摘要： 目的：确定HPV16-E6基因转染食管癌Eca109细胞的佳转染条件。方法取体外培养的食管癌Eca109细胞，用中心复合试验设计分组，转染条件控制因素包括DNA用量、Lip2000／DNA和饥饿时间，DNA用量分0．65、1．00、1．50、2．00、2．35μg共5档，Lip2000／DNA分0．65、1．00、1．50、2．00、2．35μL／μg共5档，饥饿时间分0、3、7．5、12、15 h共5档，共设20个组。转染24 h后，倒置显微镜下观察各组荧光情况并拍照，用图像处理软件计算细胞转染效率；用CCK-8法测算各组细胞相对存活率。用响应曲面法绘制有交互影响的因素对细胞转染效率和相对存活率影响的响应曲面，以目的基因细胞数（转染效率×细胞存活率）大化为原则，确定佳转染条件。在佳转染条件下用HPV16-E6基因转染食管癌Eca109细胞，检测细胞转染效率和相对存活率。结果随着饥饿时间延长，细胞转染效率和细胞相对存活率呈下降趋势。依据饥饿0h的转染效率、细胞存活率响应曲面图，得出佳转染条件为（24孔培养板）：DNA用量1．35μg、Lip2000／DNA1．12μL／μg（换算成Lip2000用量为1．51μL）、细胞饥饿时间0 h；转染效率预测值可达38．68％，细胞相对存活率预测值为85．09％。在佳转染条件下用相同方法转染，实际转染效率为39．79％，与预测值的相对误差为2．87％。结论 HPV16-E6基因转染Eca109细胞的佳转染条件（24孔板）为：每孔DNA用量1．35μg，脂质体Lip2000用量1．51μL，不对细胞进行饥饿处理。
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同侧股骨干并股骨颈骨折7例报告
1989年以来,我们收治同侧股骨干并股骨颈骨折患者7例,现报告如下.
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婴儿痉挛症56例报告
婴儿痉挛症是婴幼儿癫痫的一种特殊类型,临床上较难控制,因其对婴幼儿智能发育影响甚大,故预后较差.我院近5年收治56例,现报告如下.
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清开灵治疗流行性腮腺炎并脑膜脑炎60例疗效观察
1996年1月至1997年1月,我院收治流行性腮腺炎并脑膜脑炎(下称腮脑)患儿120例,其中60例应用清开灵治疗,获得满意疗效.
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三种膀胱灌洗法预防膀胱移行细胞癌术后复发的疗效观察
为了预防膀胱移行细胞癌术后复发,我们将93例已接受手术治疗的膀胱癌患者分别用丝裂霉素C(MMC)、卡介苗(BCG)、卡介苗+白细胞介素2(BCG+IL-2)行膀胱灌洗治疗,现将结果报告如下.
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ⅢA期非小细胞肺癌的围手术期护理
1994年2月至1996年4月,我院对23例ⅢA期非小细胞肺癌患者施行肺切除术,无死亡病例.现将围手术期护理体会报告如下.
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甘露醇、氟美松、神经生长因子治疗面神经炎21例
1995年6月至1999年3月,我们采用甘露醇、氟美松、神经生长因子治疗面神经炎患者21例,取得满意疗效.
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三种会阴侧切缝合方法比较
线结反应为会阴侧切缝合后的常见表现,我们对会阴侧切后的三种缝合方法进行了对比观察,现报告如下.
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脾切除术后合并重型肾综合征出血热2例报告
近两年,我们收治2例脾切除术后合并重型肾综合征出血热(HFRS)患者,现报告如下.
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颈-腋动脉旁路-大隐静脉搭桥手术的配合体会
1998年11月,我院为1例锁骨下动脉闭塞患者成功地施行了颈-腋动脉旁路-大隐静脉搭桥手术.现就手术中的配合体会报告如下.
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酷似胃癌的胃假性淋巴瘤2例报告
近年来,我院收治2例临床表现酷似胃癌的胃假性淋巴瘤患者,均经手术后病理证实.
