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成纤维细胞生长因子23蛋白原核表达及条件优化

倪培;刘孝菊;腾春燕;王春娥;肖贺欣;李校堃;于庭

摘要: 目的 制备具有生物学活性的可溶性重组人成纤维细胞生长因子23(FGF23),并探讨其佳诱导表达条件.方法 克隆FGF23和SUMO-FGF23两个cDNA序列,分别与原核表达载体pET3c与pET22b相连,转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)和BL21 (DE3)宿主菌中,对FGF23表达的佳质粒和宿主菌组合进行筛选,并对Rosetta (DE3)/pET22b-SUMO-FGF23重组菌株的佳诱导表达条件进行优化.结果 只有pET-SUMO-FGF23的质粒和Rosetta(DE3)的组合有FGF23蛋白质表达;融合蛋白在16℃、0.4 mmol/L IPTG诱导19 h以可溶形式表达,且上清表达量占菌体总蛋白的28%.结论 本研究成功获得了高表达量及可溶性的重组FGF23,佳表达条件是16℃、0.4 mmol/L IPTG诱导表达19 h.

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