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非酒精性脂肪性肝病细胞模型中自噬与脂质代谢的相互调节

闫蓉;牛春燕;于璐;田宇

摘要: 目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中自噬与脂质代谢的相互作用.方法 体外人肝细胞培养(脂肪变性)制备NAFLD细胞模型,雷帕霉素诱导细胞自噬,3-甲基腺嘌呤抑制细胞自噬,MTr比色法测定细胞活力,ELISA法检测各组细胞IG、ALT、AST、LDH、GGT、A1b水平,IF法检测LC3-Ⅱ的定位与分布,Western Blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验.结果 诱导自噬组的吸光度值和细胞活率与脂肪变组比较,明显下降(HL-7702细胞q值分别为4.160、4.110,SK-HEP-1细胞q值分别为4.407、4.032;P值均<0.05).脂肪变组TG、ALT、AST、LDH、GGT、AIb水平与对照组相比,明显升高(HL-7702细胞q值分别为5.316、3.730、4.013、6.967、6.192、5.531,SK-HEP-1细胞q值分别为4.963、3.603、4.774、7.479、6.319、5.193;P值均<0.05).诱导自噬组TG、ALT、AST、LDH、GGT、A1b水平与脂肪变组相比,明显降低(HL-7702细胞q值分别为4.978、3.695、3.960、5.130、4.695、3.192,SK-HEP-1细胞q值分别为3.846、5.575、4.184、5.019、4.203、3.049;P值均<0.05).LC3-Ⅱ在各组肝细胞中的标记值,诱导自噬组高(HL-7702细胞为90.1%,SK-HEP-1细胞为80.0%),其次是脂肪变组(HL-7702细胞为47.2%,SK-HEP-1细胞为48.4%)及抑制自噬组(HL-7702细胞为30.2%,SK-HEP-1细胞为45.5%).诱导自噬组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与脂肪变组相比,明显升高(HL-7702细胞q值为6.786,SK-HEP-1细胞q值为5.926;P值均<0.05).结论 自噬的上调有利于促进肝脏脂肪的清除,而下调则促进脂质的聚积.

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