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发热性中性粒细胞减少白血病患儿血浆人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2水平分析
全球范围内由于恶性肿瘤而接受化疗的患者中中性粒细胞减少极其常见,不明原因的发热是这些患者感染时的唯一征象。感染以及感染所引起的并发症是白血病患儿高发病率和高病死率的一个主要原因。人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(mannan-associated serine protease 2, MASP-2)属于丝氨酸蛋白酶家族,MASP-2是天然免疫系统中的重要组分,通常与甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin ,MBL )结合,以复合物形式存在,只有当 MBL的胶原区暴露,或者凝集素区域结合可导致胶原区构象改变而暴露隐蔽位点,才能激活补体凝集素途径和胶原样区域调理吞噬作用清除病原体和受感染细胞[1]。研究发现,MBL 和 MASP-2与许多疾病的感染风险增加密切相关,例如血液病、风湿性关节炎、呼吸道感染等[2]。本实验应用酶联免疫吸附法(ELISA)探讨MASP-2在发热性中性粒细胞减少(neutropenic febrile ,FN )的白血病患儿血清中的表达及临床意义。
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加替沙星治疗下呼吸道感染的临床疗效
加替沙星是近年来新研制的新一代氟喹诺酮类药物,其化学结构为8-甲氧基氟喹诺酮类外消旋化合物,具有抗菌谱广、抗菌活性强的特点.本实验应用加替沙星治疗下呼吸道感染患者,并以头孢吡肟作为对照,旨在评价其临床疗效与安全性.
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鞘内微量注射白细胞介素-1β对炎症痛敏反应和针刺镇痛作用的影响
近年来,白细胞介素-1β(IL-1β)在痛觉调制中的作用引起人们的重视.本实验应用鞘内微量注射和免疫组化技术,用行为(痛阈)和形态(c-fos表达)指标,对IL-1β在脊髓水平的痛觉调制作用及与针刺镇痛作用的关系进行了研究.结果表明:①大鼠脚掌注射角叉菜胶(0.2 mg)可引起大鼠注射侧脚掌痛阈显著降低,注射后3 hr达底值,并可维持到注射后8 hr.
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建立狗主动脉瘤模型的一种新方法
本实验应用外科学方法,在肾动脉下腹主动脉处吻合预先缝制的主动脉瘤体,建立确切、稳定的主动脉瘤模型,以满足介入治疗实验研究的需要.
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乳腺癌中乙醛脱氢酶1与上皮性钙黏蛋白、神经性钙黏蛋白关系的研究
乳腺癌干细胞是一类具有自我更新及多向分化潜能的原始细胞,在一定条件下可以分化成多种不同功能的细胞,从而影响乳腺癌的发生、发展、转移、耐药及复发等生物学行为[1]。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)在乳腺癌浸润转移过程中起着重要作用。本实验应用免疫组织化学方法研究乳腺癌干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)蛋白与 EMT 标志蛋白上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏蛋白(N-cadherin)在正常乳腺组织、乳腺癌、转移性淋巴组织中的表达情况,探讨乳腺癌干细胞与乳腺癌浸润转移的关系。
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酒精性肝病大鼠肝组织Toll样受体4及血清细胞因子的变化
本实验应用乙醇灌胃建立酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)大鼠模型,动态观察血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量及Toll样受体4(TLR4)在肝组织中的表达状况,结合肝脏病理学指标探讨免疫机制在酒精性肝病发病机理中的作用.
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一种从脑脊髓液中提取病毒RNA和DNA的新方法
从真核细胞中提取总RNA和DNA的方法很多[1],均需从大量细胞和大量临床样本中分离、纯化核酸.从标本中提取靶DNA或RNA的多少是聚合酶链反应(PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)方法敏感性的关键,尤其是某些感染性疾病早期标本中只有微量病毒分子时更是如此.因此,许多新方法和传统方法经修改后[2~5]都致力于病毒滴度很低的临床小样本的检测.本实验应用单一异硫氰酸胍裂解缓冲液分离脑脊髓液(CSF)中的RNA和DNA,旨在建立一种适于临床小样本的有效、快速、简单的核酸提取方法.
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人肝癌细胞株的特性及其实验应用
当前,原发性肝癌是我国高发的恶性肿瘤,死亡率高,治疗困难,对其研究一直是热点.然而,考虑到人道主义精神,肝癌相关研究无法直接在人体上进行.人肝癌细胞株模型的建立打破了这一瓶颈,其来源于人肝癌患者组织,具有一套完整的人体遗传基因,传代较稳定,是合适的实验对象.本文介绍了目前实验中常用的人肝癌细胞株SMMC7721、Bel-7402、MHCC97、HepG2、Hep3B、Huh-7、PLC/PRF/5的来源、特性,与肝癌细胞株的优势、作用、实验应用,希望能有助于该领域的研究.
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外源性IGF-I对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺病理损伤的影响
重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)的发病机制是一个复杂的、多因素参与的病理生理过程.参与SAP发生发展过程中的炎症性细胞因子包括TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、血小板活化因子等[1],抗炎症细胞因子包括TGF-β和IL-10等.本实验应用外源性生长调节素(insulin-like growvhfactor I,IGF-I)干预治疗急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠,以观察其对ANP大鼠血浆TNF-α、IL-10水平及胰腺病理损伤的影响.
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胰腺癌组织中nm23和PCNA的表达及临床意义
胰腺癌发病隐匿,恶性程度高,早期诊断困难,并且对各种辅助治疗敏感性不高[1],生存率低,是预后差的恶性肿瘤之一[2].为探讨胰腺癌生物学行为与nm23和PCNA表达的关系,本实验应用免疫组织化学PV-9000通用型二步法检测41例胰腺癌组织中nm23和PCNA的表达情况,并探讨二者的表达与病理学分级、临床分期之间的关系.
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不同方法提取胰腺癌患者大便DNA的质量比较和评价
胰腺癌是高度恶性肿瘤之一,近年发病率明显升高.已有学者采用分子生物学技术对胰腺癌患者粪便中癌基因K-ras和抑癌基因p53的突变进行系统研究报道.粪便DNA提取技术成熟稳定,但需要用国外进口的土豆粉来中和粪便中的抑制PCR产物反应的物质,由于这种原料在市场上不易获得,限制了该方法的广泛应用.为此,本实验应用提取粪便的专用试剂盒与我院的改良方法[1]提取DNA,对DNA的质量、浓度、纯度和性价比方面进行综合比较.
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PPARγ激动剂对急性胰腺炎小鼠肝损伤的影响
过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)是一类依赖配体活化的转录因子,许多研究表明PPARγ通过抑制NF-κB的活化来发挥抗炎作用[1-3].本实验应用PPARγ激动剂干预急性胰腺炎(AP)小鼠,观察其肝脏NF-κB和PPARγ的表达,探讨AP肝功能损伤机制及探索新的治疗途径.
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p27Kip 1和Ki-67抗原在胰腺导管腺癌中的表达及意义
肿瘤的发生发展是多因素、多阶段、多因子作用的结果,其中癌基因的激活与抑癌基因的失活是其重要特征.抑癌基因p27Kip 1是CIP/KIP成员,是细胞周期的负调控因子.Ki-67核抗原的合成、表达与增殖细胞的增殖周期有关.本实验应用免疫组化SABC法检测p27Kip 1和Ki-67抗原在胰腺导管腺癌、CP和正常胰腺组织的表达,探讨它们在胰腺导管腺癌发病机制中的作用.
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α-硫辛酸对急性坏死性胰腺炎合并肺损伤的保护作用
重症急性胰腺炎(SAP)并发肺损伤的病理机制尚未完全阐明.目前研究认为核因子κB(NF-κB)在SAP发病过程中扮演重要角色[1].α-硫辛酸(α-lipoic acid,ALA)属于维生素B的一类化合物,是已知抗氧化剂中作用比较广泛的一种,具有抑制NF-κB的作用,在改善人的体质、抗氧化,治疗糖尿病并发症和其他多种疾病方面备受关注[2].本实验应用ALA干预急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠,观察其对ANP并发肺损伤的保护作用,探讨其可能的作用机制.
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GATA-3基因反义逆转录病毒载体的构建
支气管哮喘(简称哮喘)是一种呼吸道慢性炎症性疾病.Ⅱ型辅助性T淋巴细胞(Th2)在起始和维持气道慢性炎症级联反应中具有重要作用.GATA-3为Th2淋巴细胞特异性转录因子,在Th2淋巴细胞分化及Th2类细胞因子基因转录中具有关键性作用[1].我们的实验应用反义真核表达载体构建技术,构建了GATA-3反义逆转录病毒载体,对进一步研究Th2淋巴细胞定向分化及Th2类细胞因子基因转录的分子机制和探讨哮喘治疗的新途径均具有重要意义.
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肺癌组织端粒酶检测及临床意义
端粒是真核线性染色体末端结构,它由(TTAGGG)n重复序列组成,能防止染色体降解、端-端融合、重组和染色体丢失,因而起到稳定染色体的作用。在正常情况下,由于染色体复制的自身缺陷,细胞每分裂1次,端粒将丢失50~150个碱基对。随着细胞分裂次数的增加,端粒DNA将逐渐缩短,终使细胞进入危机期,并导致细胞死亡。端粒酶是由 RNA和蛋白体组成的复合体,属一种专一的依赖 RNA的逆转录酶,能以自身的 RNA为模板,从头合成染色体末端的端粒 DNA,弥补细胞分裂时端粒 DNA的丢失,维持端粒的长度,保持染色体的动态平衡[1]。自1994年Kim等[2]建立了高敏感度的以PCR为基础的检测端粒酶的方法以来,端粒酶引起了人们的广泛关注。人们发现,端粒酶与细胞的增生、分化和不死性有着极为密切的关系,已成为目前肿瘤和衰老基础研究的热点之一。本实验应用放射性同位素端粒重复序列扩增法(telomeric repeat amplification protocol,TRAP),观察人肺癌细胞和癌旁组织端粒酶的活性,为进一步研究提供实验依据[3,4]。
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多原发癌组织中bcl-2表达状况的研究
国内对多原发癌的研究相对较少,尚未见有对多原发癌分子病理学研究的报道[1~3].以往的研究表明,bcl-2基因的过表达在许多单发肿瘤的发生发展中起很重要作用[4~6],本实验应用免疫组织化学方法对多原发癌组织中的bcl-2蛋白表达进行检测.
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细胞内钙离子拮抗剂对升主动脉缩窄诱导大鼠心力衰竭的作用
1材料与方法本实验应用升主动脉缩窄心力衰竭(HF)模型,探讨细胞内钙离子拮抗剂(法舒地尔)对HF的防治作用并探讨其机制.选择100~150 g雌性Wistar大鼠50只(购自中国医科大学实验动物中心),按包伟珂等[1]法建立大鼠升主动脉缩窄HF模型,同时制备假手术组.
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常温下肝门阻断对大鼠肠道微循环影响的实验研究
肝门阻断后,在门静脉系统血流高度淤滞的情况下,肠循环凝血功能是否出现变化,国内外报道很少.本实验应用先进的流式细胞术[1]对此进行了积极的探讨.
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大肠癌p16蛋白和基因突变与临床病理因素关系的探讨
本实验应用聚合酶链反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)和S-P免疫组织化学技术在基因水平和蛋白质水平分别检测同一病例p16的基因缺失及蛋白表达情况,以判定大肠癌p16基因的变异率、p16蛋白表达与临床病理的关系。