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人鼻型NK/T细胞淋巴瘤的裸鼠移植与传代
鼻型NK/T细胞淋巴瘤是常见的淋巴结外非B细胞淋巴瘤[1],在东南亚国家和地区发病率较高,具有特殊临床表现、免疫表型和生物学行为,肿瘤组织均存在不同程度的凝同性坏死和黏膜溃疡形成[2,3].实际工作中,局部活检组织多较小,除做常规病理诊断和免疫表型检测外所剩无几,致使对该肿瘤的研究工作难以深层次进行.为此,建立该肿瘤实验动物模型,模拟其体内生长状态是值得尝试和探讨的途径之一,但由于实验材料匮乏,工作非常困难,经检索尚未见成功报道.我们将人鼻型NK/T细胞淋巴瘤的实体瘤组织种植于BALB/c裸小鼠皮下,形成移植瘤,并成功传代.
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脐血CIK、PHA-CD3AK、CD3AK细胞的研究
过继免疫疗法在恶性肿瘤的治疗中取得了一定效果,寻求新型免疫效应细胞是当前热点之一.采用脐带血单个核细胞制备CD3AK、PHA-CD3AK、CIK 3种细胞,用MTT法测三者对K562和HL-60肿瘤细胞株的杀伤活性,免疫表型检测采用单克隆抗体APAAP法,采用t检验进统计学分析.
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铜绿假单胞菌产生β-内酰胺酶表型检测及其药敏分析
铜绿假单胞菌(PA)对β-内酰胺类耐药的重要机制之一是产生β-内酰胺酶(BLA),且各地区产酶菌检出率也不同.
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基于假病毒的高通量人类免疫缺陷病毒表型耐药性检测方法的建立和优化
目的:建立一种高通量人类免疫缺陷病毒表型耐药性检测方法。方法通过酶切连接方式失活荧光素酶基因,用 LacZ 基因替代原有的蛋白酶和逆转录酶基因。通过 PCR 方法从含耐药基因的 pSG3△env 质粒中扩增 pol 基因,用 infusion 定向克隆技术连接入酶切后的 pNL4-3. Lac,对该表型耐药性检测方法的主要影响因素进行优化。结果构建了用于高通量耐药性检测的 pNL4-3. Lac,确定了检测方法中细胞加入量为10000细胞/孔(96孔板),病毒加入量为200 TCID50/孔, DEAE-dextran 的佳工作浓度为15μg/ ml。用12种抗病毒药物检测两种假病毒8次,确定方法具有良好的重复性(CV 值在4.32%~28.46%之间)。构建了6种不同的假病毒与基于 pSG3△env 的耐药性检测方法进行比较,两者之间具有良好的一致性。结论基于 pNL4-3. Lac 的表型耐药性检测方法结合了 pSG3△env 和 pNL4-3检测系统的优点,能高通量评价 HIV 病毒对药物的耐受性,可用于感染者耐药性分析和抗病毒药物的筛选。
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耐亚胺培南鲍曼不动杆菌金属β内酰胺酶表型及基因型检测
目的研究华西医院耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌产金属酶的情况.方法采用亚胺培南和亚胺培南加EDTA纸片,筛选出金属酶表型阳性的菌株,再用PCR技术扩增耐药基因blaIMP和blaVIM.结果 49株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌中,有30株菌(61.2%)金属酶表型阳性.PCR法检测到10株携带金属酶基因,6株(20%)携带blaIMP,4株(13.3%)携带blaVIM.结论华西医院耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌要产金属酶.其基因型为IMP型和VIM型.
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耐万古霉素肠球菌表型检测及基因分析
肠球菌可引起菌血症、心内膜炎以及泌尿系、腹腔和伤口感染,并已成为医院感染的主要病原菌[1].由于产β-内酰胺酶的肠球菌及耐高浓度氨基糖苷类抗生素肠球菌,特别是耐万古霉素的肠球菌(VRE)的出现,给临床治疗造成了极大的困难.本研究比较VRE常见的几种分型结果,了解本院VRE的流行状况,为临床治疗提供依据.
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结核分枝杆菌耐药性检测技术进展
耐药MTB的流行与传播是导致结核病高发病率和高病死率的重要因素,MTB耐药性检测研究也是结核病研究的热点和难点问题.目前普遍应用的罗氏培养药敏试验的需时较长、准确性差,分枝杆菌快速培养系统虽能缩短检测时间[1],但仍需4~6周,远不能满足临床诊治需求.因此,迫切需要快速、灵敏、简便和价廉的耐药性检测新技术.近年来出现的耐药表型检测和耐药分子检测技术使MTB耐药性检测技术有了较大发展,并具有临床应用前景,现介绍如下.
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Rh血型表型检测在输血中的应用
目的 探讨Rh血型表型检测在保证输血安全中的作用.方法 对43862名无偿献血者进行Rh血型系统分类,对其中Rh(D)阴性的进行C、c、D、E、e抗原检测,确定其Rh血型表型.结果 共检出Rh(D)阴性个体128例(O.29%).Rh(D)阴性者中,血型表型以eedee为多见(68例,占53.1%),Ccdee次之(38例,占29.7%),其他Rh(D)阴性表型较少见.结论 Rh血型表型检测对提高临床诊治水平,保障临床输血安全有重要意义.
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一个纯合突变Tyr510Asp导致的遗传性凝血酶原缺陷症家系表型与基因分析
凝血酶原(凝血因子Ⅱ,FⅡ)是肝脏合成的维生素K依赖性丝氨酸蛋白酶,在凝血过程的第二阶段转变为凝血酶.遗传性凝血酶原缺陷症是由位于人类染色体11p11-q12的FⅡ基因突变引起的一种罕见常染色体隐性遗传性疾病,发病率约为1/200万,临床表现为程度不同的出血症状,其出血倾向的严重性与血浆FⅡ活性(FⅡ∶C)水平相关[1-2].研究表明该病是由于FⅡ基因中单核苷酸的插入、替代或缺失,导致FⅡ蛋白中氨基酸序列改变或产生终止密码子使翻译过程提前终止所致[3].我们对1个遗传性凝血酶原缺陷症家系成员进行表型检测及基因分析,报告如下.
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原发性乳腺弥漫性大B细胞淋巴瘤临床病理分析并文献复习
原发性乳腺淋巴瘤(primary breast lymphoma,PBL)少见。PBL主要为非霍奇金淋巴瘤(NHL),以弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)多,而霍奇金淋巴瘤(HL)则罕见。 PBL的诊断标准日趋完善并被广泛接受,为了更加全面地认识原发性乳腺DLBCL的临床病理特征并更好地掌握其诊断标准,本研究对1例原发性乳腺DLBCL进行了临床病理观察、免疫表型检测和长期随访、预后分析并复习文献讨论该类肿瘤的临床病理特征。
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革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶表型检测及耐药性分析
随着碳青酶烯类抗生素(CAB)的应用增多,细菌对 CAB 的耐药性也在不断增加,而且CAB 细菌(RCAB)大多数呈多重耐药,这就给临床治疗造成极大困难.革兰阴性菌对CAB 耐药的主要机制之一是产生各种碳青酶烯酶(CHBLs),CHBLs可分为丝氨酸类(SCHBLs) 和金属类(MCHBLs)两大类,不同类型的CHBLs的特性不同,针对产生不同CHBLs的细菌抗生素的选择也不同,检测出细菌是否产生碳青霉烯酶,产生哪类碳青霉烯酶,指导临床更合理的联合应用抗生素,降低多重耐药菌的流行,提高治疗效果.现对我院分离的115株耐碳青酶烯类抗生素的革兰阴性杆菌进行分析,报告如下.
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免疫表型检测在慢性粒细胞白血病急变细胞中的应用
慢性粒细胞性白血病(CGL)是一种起源骨髓造血多能干细胞的克隆性异常增殖疾病[1,2].对此无论从形态学、细胞化学和遗传学等方面均有其特性显示.但当进入急变期后,由于此病起源于干细胞水平,所以对急变细胞进行准确的定型尤其对过氧化物酶(POX)呈阴性病例是非常重要的.病例本室运用细胞免疫酶法,对29例POX呈阴性的CGL急变细胞进行了细胞表型检测,现在报道如下.
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溶血葡萄球菌红霉素诱导克林霉素耐药的表型检测及耐药性分析
为了解溶血葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药率,特别是红霉素对克林霉素的诱导耐药作用,作者收集各类标本分离的114株溶血葡萄球菌进行研究,现报道如下.
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人巨细胞病毒耐药性的研究进展
抗人巨细胞病毒(HCMV)的治疗药物主要有更昔洛韦(GCV)、膦甲酸钠(FOS)和西多福韦(CDV).但近年来,其耐药株呈增多趋势,主要的耐药机制为病毒UL97基因和UL54基因发生了突变.根据耐药株出现的时间和高危因素,可采用表型和基因型方法进行检测,以利于HCMV感染的及时监测并采取相应的处理措施.
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肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型检测方法研究进展
肠杆菌科细菌是医院和社区感染常见的病原菌,可引起多部位炎症,如肺炎、泌尿系统炎症、败血症、腹膜炎、医疗器械相关性感染等.由于几乎可水解所有头孢菌素的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在肠杆菌科细菌中的流行,对于重症感染患者,碳青霉烯类作为有效的抗菌药物被广泛使用.
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流式细胞术用于形态不典型白血病的诊断
急性白血病正确的分型,对制定治疗方案,判断预后、观察疗效等有十分重要的意义,流式细胞术可快速准确地进行细胞膜及细胞浆免疫表型检测,对于急性白血病诊断,特别是形态不典型白血病的诊断有重要作用,现将我院2001年8月~2002年8月流式细胞术在不典型白血病的诊断中应用情况报告如下.
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耐多药结核病检测技术研究进展
耐多药结核病(muhi-drug resistance tuberculosis,MDR-TB)是引起结核病治疗失败及结核病患者死亡的重要原因,早期、快速、准确的诊断为其临床管理和治疗赢取宝贵时间,同时也极大程度地避免临床经验性治疗引起的耐药作用.目前,MDR-TB诊断主要包括表型检测和分子基因型检测,本文就相关检测技术的研究进展进行综述.
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产碳青霉烯酶菌株实验室检测研究进展
碳青霉烯类抗菌药物是抗菌谱广、抗菌活性强的非典型β-内酰胺类药物,因其具有对β-内酰胺酶稳定以及毒性低等特点,已成为治疗严重细菌感染主要的抗菌药物之一.随着此类药物的大量使用,耐药菌株不断出现且检出率逐年提高,给临床治疗和院内感染控制带来新的挑战.既往临床上常见的耐药菌株以铜绿假单胞菌和不动杆菌属细菌为代表,但随着此类抗菌药物使用频率增加,对其耐药的肠杆菌科细菌在世界各地均有报道.对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性可以是由产生过量AmpC酶同时伴外膜孔道蛋白大量缺失和(或)外排泵过量表达,或产生碳青霉烯酶引起.而产碳青霉烯酶是碳青霉烯类药物耐药的主要原因,包括KPC酶、金属酶以及部分OXA酶,编码此类酶的基因大多位于可移动基因元件上,通过质粒或转座子在不同菌种间传播,从而导致耐药基因的迅速播散[1].碳青霉烯类药物是临床治疗重症感染的后选择,如果患者对其耐药,几乎无药可医.因此,对碳青霉烯酶的快速检测已迫在眉睫.然而,单独的药敏试验并不能筛查所有的产碳青霉烯酶菌株,因此预防和控制产酶菌株的播散就必须依赖实验室的诊断.
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四川省艾滋病免疫细胞表型检测实验室质量控制及分析
目的 了解四川省各相关的艾滋病实验室免疫细胞表型检测质量,分析各实验室之间检测差异及原因,提高全省检测水平.方法 制定2014年四川省HIV免疫细胞表型检测质控考核方案;按照仪器类型分组统计及评价.结果 全省总体评价:62家参加免疫细胞表型检测实验室总体合格率在96.77%,优秀率62.9%,良好率22.58%,合格率11.29%,不合格率3.23%;不同系统评价:疾控系统有2家实验室不合格,司法系统的优秀率较低于50%;实验室级别评价:确证实验室比筛查实验室总体优秀率高出1倍(95.45%/42.5%),2个筛查实验室不合格;实验室运行时间评价:建立2年以上的实验室优秀率为77.78%,不合格为0%,2年以下实验室合格率为42.31%,不合格率为7.69%;不同仪器评价:BDFACScount CV值在10%以下,其他仪器的CV值为27.16% ~ 37.03%,变异较大.结论 四川省各相关的艾滋病实验室免疫细胞表型检测质量稳定,但实验室的等级、建立时间和使用的检测仪器对检测质量有较大影响.
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米西宁联合阿糖胞苷治疗急性非淋巴细胞白血病的临床观察
我院于1998年2月~1999年7月用MA方案治疗非淋巴细胞白血病26例,取得较好的疗效.1 病例与方法1.1 病例选择 26例均经形态学、细胞化学或细胞免疫表型检测,根据<血液病诊断及疗效标准>确诊.(男14例,女12例)年龄15~64岁.M0例,M14例,M210例,M46例,M54例,初治12例,用其它方案化疗2疗程以上未缓解复治者14例.