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D-二聚体定量检测的临床应用价值
D-二聚体(D-Dimer)是交联纤维蛋白的降解产物,是纤维蛋白原和纤维蛋白降解的总产物(FDP)中特异性较高的一部分.作为交联纤维蛋白的降解产物,它是特异性反映体内高凝状态和继发性纤溶亢进的标志物之一.在弥漫性血管内凝血(DIC)、脑梗死、深静脉血栓时,D-Dimer有明显变化,是能够及时地反映疾病的严重程度、发展变化以及疗效和预后的有用指标.
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D-二聚体与纤维蛋白原检测在冠心病诊断及治疗中的应用
冠心病(CHD)是一种严重危害中、老年人生命健康的常见病,日益得到全社会的重视,而心绞痛、心肌梗死是冠心病常见的临床类型.血浆D-二聚体(D-Dimer)是交联纤维蛋白(Fbg)的特异性降解产物,是血栓形成和溶解的标志物,它的生成或增高反映了机体纤溶系统被激活的状况.
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食品中丙酸钙(钠)含量的测定
采用气相色谱仪,用氢火焰检测器、非极性交联键合毛细柱(RTX-1)检测食品(糕点、调味品)样品中的丙酸钙或丙酸钠含量,突破了食品卫生检验方法GB/T 5009.120-2003中使用玻璃柱易碎的特点,该方法使用的色谱柱具有通用性和广泛性的特点,工作曲线线性好、检测的结果回收率高、定性和定量准确,适用于各种不同工作条件的具有非极性交联键合毛细柱的实验室.
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一种新的DNA-DNA交联检测法--改良单细胞凝胶电泳法
DNA交联是细胞内发生的严重事件,它影响DNA的正常复制功能,从而导致突变或肿瘤.多种致癌物质和抗肿瘤药物可引起DNA-DNA交联,如砷、镍、铬、顺铂、丝裂酶素C等[1~4].因此,检测外环境因素所导致的DNA-DNA交联是判断其是否为诱变剂或致癌因素的有效手段.传统检测DNA交联物的方法是碱洗脱法,但该法昂贵、耗时、操作复杂,并涉及到同位素[5].发展新的DNA-DNA交联物检测方法实有必要.
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D-二聚体检测及其主要临床应用
二聚体(D-Dimer,D-Dj)是交联纤维蛋白经纤溶酶水解后产生的特异性降解产物.它的生成或增高反映了凝血和纤溶系统的激活.
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X-射线交错互补修复基因2 C41657T、G4234C多态与卵巢上皮性癌发病风险的关联研究
X-射线交错互补修复基因2(X-ray repair crosscomplementing gene 2,XRCC2)在细胞分裂过程中通过参与同源重组修复DNA链的断裂和交联损伤,具有维持遗传物质稳定性的重要作用[1].XRCC2定位于人体染色体的7q36.1[2].
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人参糖肽对糖尿病大鼠尾腱胶原交联的改善作用
目的:观察人参糖肽对大鼠尾腱胶原交联的影响.方法:用ELISA分析人参糖肽对体外大鼠尾腱胶原交联的抑制效果;在体内给链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠腹腔注射人参糖肽12周后,检测其尾腱胶原在酸溶液中的溶解性、对限制性胃蛋白酶降解性能、SDS-2-巯基乙醇的可溶性以及人参糖肽对胶原交联的改善作用.结果:在体外人参糖肽能明显抑制胶原交联,人参糖肽可明显提高尾腱胶原在上述溶液中的溶解性,提示人参糖肽能减轻胶原交联的程度.结论:人参糖肽对胶原交联具有明显的改善效果.
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D-二聚体的检测及其与心血管疾病的关系
凝血过程中,凝血酶水解纤维蛋白原,成为纤维蛋白肽A、纤维蛋白肽B和纤维蛋白单体等物质,在因子XⅢ作用下,可溶性纤维蛋白单体转变为纤维蛋白,血液凝固.经过交联后的纤维蛋白不再溶解,而纤溶酶可使交联的纤维蛋白降解,生成许多碎片,其中简单的产物之一是D-二聚体(D-dimer,DD),它是交联纤维蛋白的特异性降解产物,是证实体内存在继发性纤溶的特异性指标之一[1].本文就DD的检测与心血管疾病的关系作一综述.
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交联剂对脱细胞膀胱基质生物力学性能的影响
目的 研究不同交联剂对猪脱细胞膀胱基质的组织结构影响,并比较其生物力学性能,为盆底修复替代材料的选择提供依据.方法 采用表面活性剂+酶消化法去除新鲜猪膀胱的细胞成分,将脱细胞膀胱基质随机分为3组,A组经0.25%戊二醛交联,B组经0.625%京尼平交联,C组未交联.对各组材料进行HE染色,观察纤维的变化情况.使用生物力学性能测试系统检测抗拉强度、断裂伸长率、弹性模量,并进行统计学分析.结果 京尼平交联脱细胞膀胱基质后呈深蓝色,保持了天然组织构架的完整,纤维更加致密.戊二醛交联脱细胞膀胱基质后呈浅黄色,纤维排列紊乱且有断裂.新鲜猪膀胱经上述三种方法处理后,其弹性模量增大、断裂伸长率减小,而其中京尼平交联处理的脱细胞膀胱基质力学性能与新鲜膀胱组织更为相近.结论 京尼平交联的脱细胞膀胱基质组织结构的形态佳,同时较大限度地保留膀胱组织的力学性能,可能是较理想的盆底重建材料.
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聚羟乙谷氨酰胺膜的制备与性能研究
本文报告了由聚谷氨酸苄酯(PBLG)薄膜与乙醇胺和脂肪族二胺反应制备聚羟乙谷氨酰胺(PHEG)交联膜.对材料的溶胀实验发现,交联剂用量越多或交联剂的碳链越长,其交联密度越大,水溶胀度就越小.拉伸试验结果也证明,氨解交联后干膜的抗张强度有所减少,交联膜的抗张强度随交联剂用量的提高而略有增加.PHEG湿交联膜比干膜有很好的弹性和更弱的强度.体外酶解实验表明,水溶胀度越大的样品,其半量酶解时间也越大,生物降解性就越小.因此,PHEG交联膜的生物降解性可以通过改变交联剂种类和交联剂用量的方法来控制.
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聚乙二醇改性去细胞猪主动脉瓣膜构建复合支架及其体外细胞毒性试验
目的 对去细胞猪主动脉瓣膜进行聚乙二醇(PEG)化改性,并评价改性后复合支架的细胞毒性.方法 合成功能基团为丙烯酰基的枝化状聚乙二醇衍生物,在去细胞猪主动脉瓣膜引入巯基,通过迈克尔加成反应完成PEG对去细胞猪主动脉瓣膜的交联,并作PEG改性前后瓣膜的生物力学测定.制作去细胞瓣膜的浸提液,浸提液分为单纯去细胞瓣膜组、PEG改性去细胞瓣膜组和阴性对照组(培养液),采用CCK-8法检测复合支架的浸提液对人脐静脉内皮细胞增殖率的影响,评价其细胞毒性.结果 PEG改性去细胞瓣膜反应条件温和,改性效果确切.复合瓣膜支架的抗拉强度明显高于去细胞瓣膜[(7.53±0.29)MPa比(5.65±0.24)MPa,P<0.05],但与天然瓣膜[(7.68±0.20)MPa]差异无统计学意义(P>0.05).复合支架和去细胞瓣膜毒性评级均0级,与阴性对照组差异无统计学意义(P>0.05).人脐静脉内皮细胞经各浸提液的培养液培养后形态良好,增殖旺盛.结论 PEG改性能明显改善去细胞猪主动脉瓣膜的力学性能,且改性后的复合支架无细胞毒性,为进一步研究提供依据.
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静电纺胶原/丝素复合微纳米纤维的制备及细胞相容性研究
采用静电纺丝技术制备胶原/丝素复合微纳米纤维,对其理化性能进行表征并观察其细胞相容性.以六氟异丙醇(HFIP)为溶剂,将胶原和丝素以100∶0、70∶30、50∶50、30∶70、0∶100的质量比共混进行电纺.制备的五种材料经戊二醛蒸汽交联12 h.采用扫描电镜、红外光谱、X射线衍射、热重分析和拉伸力学性能测试等方法对其理化性能进行表征.材料种植成纤维细胞后,通过扫描电镜和噻唑兰(MTT)比色法观察其细胞相容性.结果显示制备的纤维平均直径在550 ~1 100nm之间,随着丝素含量的增加纤维平均直径增加.交联后纤维的β化程度、结晶度和热稳定性均有一定提高,且随着丝素含量的增加提高越明显;交联后材料的力学性能优于交联前;当丝素含量为70%时,纤维膜的平均断裂强度为(8.70±1.05) MPa,高于其它配比的纤维膜.细胞在材料表面生长状态良好;丝素含量为70%组的细胞粘附和增殖高于其它组,与细胞培养板相比无显著性差异,表明其细胞相容性良好,可望成为一种新型的组织工程支架材料.
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以水为溶剂的电纺丝明胶纤维的制备及性能研究
本研究以水为溶剂通过静电纺丝制备一种明胶纤维.通过调节明胶水溶液浓度和静电纺丝环境温度,采用SEM研究了不同浓度、温度条件下纤维的微观形貌及直径分布.并对采用戊二醛交联后明胶纤维的形貌变化、热力学及力学性能变化进行了研究.结果表明:优化后的纺丝液浓度为33%(质量分数),温度为加℃.得到的明胶纤维的直径在120nm~210nm之间.交联后的纤维发生溶并,焓值降低,力学性能提高,在水中能够充分溶胀.该体系采用水为溶剂改善了采用有机溶剂的纤维残留潜在毒性问题,可以以更具生物安全性的方式负载多肽类药物或生长因子,在医药及组织工程支架领域具有潜在的应用价值.
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生物可降解交联剂对PVP膜性能的影响
本研究在制备了一系列可降解的三乙烯基交联剂的基础上,利用偶氮二异丁氰(AIBN)引发该交联剂与N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)交联.重点研究了交联剂含量及分子量对材料的吸水率、接触角利降解性能的影响.结果表明交联膜材料的接触角随着交联剂含量的增加而逐渐增加,而吸水率和材料的降解速率却逐渐减小;随交联剂分子量的增加,材料的吸水率是逐渐增加但对接触角的影响不大,材料的降解速率随交联剂分子量的增加而增大.
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双功能螯合剂与鼠IgG1 Fab′片段的点特异性交联方法改进
同完整IgG分子相比,单价抗体片段在免疫组织化学及核医学免疫显像中有明显优点.由胃蛋白酶消化制备的F(ab′)2抗体片段经温和还原可生成单价含活性基团-SH的Fab′片段.此片段的优点之一是可利用其铰链区的-SH基团与其它分子行点特异性交联.
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交联抗人DR5单抗诱导的Jurkat细胞凋亡的信号转导
目的 探讨抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单抗--YM366EC对Jurkat细胞增殖的影响,阐明抗DR5抗体的抗肿瘤效应机制.方法 MIT方法检测抗体对Jurkat细胞存活率,FITC-Annexin V/PI标记流式细胞仪检测交联YM366EC对Jurkat细胞凋亡率影响.交联YM366EC作用于Jurkat细胞2、4、6、8、10、12 h收集细胞,提取蛋白Western blot检测Bcl-2、Cyt-C、Caspase-8、Caspase-3、Bax、Caspase-9的变化.结果 抗DR5抗体单独应用不能抑制高表达DR5分子的Jurkat细胞增殖,但应用抗小鼠IgG交联DR5抗体后可直接诱导TRAIL敏感的Jurkat细胞凋亡改变.并且Western blot检测到随着抗体诱导时间的延长Jurkat细胞Bcl-2蛋白表达减少;Cyt-C、Bax,有活性的Caspase-8、Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达增加.结论 交联抗DR5抗体YM366EC对Jurkat细胞增殖有明显的抑制作用,诱导的Jurkat细胞凋亡的分子机制涉及到Cyt-C、Bax、Caspase-8、Caspase-3、Caspase-9.
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人体自由基与衰老的关系
在众多的涉及衰老的学说中,与自由基有关的是交联学说,交联学说(cross linkage theorr)认为体内甲醛、自由基(free radicals)等物直接影响DNA分子双链间、蛋白胶原纤维间等大分子间的交联.DNA双链的交联可在DNA解链时形成"Y"形结构,使转录不能顺利进行.胶原纤维间的交联可使纤维结缔组织在正常交联的基础上过度交联,对小分子物质的通透性降低,可能与结缔组织变性有关,从而影响了结缔组织的张力及韧性.故这种交联可能引起各种不良后果而导致衰老,其与衰老的确切关系尚待进一步证实.有关自由基与衰老的关系目前依旧是衰老研究的重点[1].
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慢性丙型肝炎抗病毒治疗的研究进展
慢性丙型肝炎目前为有效的治疗方法就是重组干扰素α(IFNα),但疗效不很满意.临床上应用IFNα治疗病毒性肝炎遇到2个困难,一个是IFNα在血清中的半寿期太短,只有5.1 h,决定其半寿期的因素主要是机体免疫系统对于干扰素的识别以及此后的代谢过程,因此须要不断地重复用药.另一个就是引发抗体的产生.重组蛋白药物的一个缺点就是常常因为具有抗原性而影响其疗效.当与聚乙二醇(PEG)交联以后,就不易被机体的免疫系统所识别,从而降低了重组蛋白药物的免疫原性,延长了在血液循环中存在的时间,降低其毒性,提高药物的稳定性,增加药物的可溶性,显著提高重组蛋白药物的疗效.为了改进IFNα制剂,制备了IFNα与PEG的交联物.与PEG交联,IFNα用药以后吸收很快,在血清中的清除速度显著减慢,因而可以维持长时间的有效血药浓度,提高IFN α的疗效,减少用药次数.目前临床正在试用的长效干扰素有2种,即Schering-Plough公司的PEG-Intron和Roche公司的Pegasys.
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衰老的因素及其相互关系
长期以来,为了解释衰老的原因,老年病医学专家们提出了许多衰老理论,如遗传程序学说、体细胞突变学说、错误成灾学说、交联学说、自由基学说、神经内分泌学说、代谢失调学说和免疫紊乱学说等[1].这些学说归纳起来可分为两大类:第一类是遗传因素学说,有研究发现,细胞核内DNA的某个片段控制着衰老的程序,从分子水平探索基因与长寿、基因与衰老的关系,是认识衰老本质的一个重要方面.第二类是损伤学说,这一学说认为,人体的内环境和外环境中存在有许多有害因子,不断对人体进行损伤,从而导致人体的衰老.这些损伤因子包括自由基、大分子交联、代谢失调、内分泌和免疫紊乱以及营养过剩、吸烟、环境污染、不合理用药、不良的社会心理因素等.这里着重探讨各种损伤对人体衰老的影响及其相互作用,为制定抗衰老对策提供可靠的依据.
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细胞间直接接触对促新生血管生成调控作用的研究
目的:研究并探讨血管内皮细胞增殖、交联形成新生血管网的相关机制,以促进缺血性心脏病(IHD)病人的心肌再血管化。
方法:体外分离原代小鼠内皮细胞(ECs)、心肌细胞(CMs)及心肌成纤维细胞(CFs),分别进行相应各组的三维细胞培养,引入血管内皮生长因子(VEGF),建立体外血管生成的三维模型并行免疫荧光染色检测,观察了解血管网状结构的形成情况。