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食源性致病菌定量检测方法研究进展
目前绝大多数检测机构所使用的食源性致病菌的定量检测方法仍然是传统的平板法和大可能数法,由于其检测周期长、程序复杂、所需试剂繁多等缺点已经远远不能满足现代检测的要求.随着现代科学技术的发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学的不断发展,人们已建立了不少快速、简便、特异、敏感、低耗且适用的检测方法.本文对国内外食源性致病菌的定量和半定量检测方法进行了综述.
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浙江省舟山市海产品中副溶血性弧菌的定量检测
目的 调查舟山市海产品中副溶血性弧菌(VP)的污染情况.方法 分3个季度,从舟山市不同的农贸市场采购鱼类、虾类等海产品作为检测对象,采用稀释培养计数(MPN)法对其中所含的VP进行定量检测,同时对分离到的VP进行毒力基因检测.结果 不同月份VP在鱼、虾等海产品中的含量呈明显的波动.分离到的33株VP中有2株副溶血性弧菌耐热溶血素阳性.结论 舟山市海产品中VP污染严重,应引起足够的重视.
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D-二聚体定量检测的临床应用价值
D-二聚体(D-Dimer)是交联纤维蛋白的降解产物,是纤维蛋白原和纤维蛋白降解的总产物(FDP)中特异性较高的一部分.作为交联纤维蛋白的降解产物,它是特异性反映体内高凝状态和继发性纤溶亢进的标志物之一.在弥漫性血管内凝血(DIC)、脑梗死、深静脉血栓时,D-Dimer有明显变化,是能够及时地反映疾病的严重程度、发展变化以及疗效和预后的有用指标.
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赛默飞针对“速生鸡”违禁添加药物提供检测解决方案
赛默飞针对鸡肉制品中兽药残留检测开发了一系列针对食品中多种抗生素、固醇类激素残留的检测方案.检测方案具体包含以下3个板块:1.在线萃取(自动化的样品制备)LC-MS/MS技术筛查食品中的多类抗生素LC-MS/MS是目前定量检测食品中抗生素残留的常用方法.但采用LC-MS/MS进行检测时,样品制备往往耗时长,操作繁琐,常常包括调节pH值、水解、液液萃取、固相萃取、溶剂蒸发和预浓缩等步骤.
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不同取样量对金黄色葡萄球菌定量检测准确率的影响
通过调整称样量这一变量,探讨其对金黄色葡萄球菌(以下简称"金葡菌")定量测定的影响.采用GB 4789.10-2016的方法,以金葡菌质控样加标到样品,称量不同质量的样品,测得数据并计算不同质量样品的检出率,通过检测结果比较进行方法评价.金葡菌质控样品测出结果为满意,A组(1 g)准确率为0;B组(5 g)准确率为6.3%;C组(10 g)准确率为29.2%;D组(25 g)准确率为33.3%;E组(50 g)准确率为39.6%.后可得出称样量越大,准确率会逐渐提高,但应根据实际操作情况来确定称样量[1-2].
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饮料中肌醇测定新方法探究
肌醇是一种水溶性维生素,是亲脂肪性的维生素,可促进细胞的新陈代谢,助长发育等,在大多数的功能性饮料中均有添加.本文对饮料中肌醇测定方法进行创新,并得到验证.
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金黄色葡萄球菌定量检测中四种培养基的比较
使用Baird-Parker平板、RPF平板、金黄色葡萄球菌显色培养基平板及3M PerifilmTM金黄色葡萄球菌测试片对金黄色葡萄球菌检测,浓度范围在103~104 CFU/mL,3M测试片、金黄色葡萄球菌显色培养基、RPF平板与BP平板结果相当.在实际检测中,选择适当的培养基辅助检测,结果更加准确可靠.
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近红外、拉曼光谱:实现定性定量检测的无损化——访必达泰克公司首席运营官Jack Zhou(Ph.D)
记者:首先请您为读者简单介绍必达泰克公司的恬况?Jack Zhou:必达泰克公司(B&W TEK)成立于1997年,总部位于美国特拉华州,是一家集光电产品开发、研制、生产于一体的高科技公司,在CCD、PDA、InGaAs、PbS等阵列光谱仪以及拉曼、荧光等光谱系统、高功率半导体激光器等方面均处于世界领先水平.
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2009年检测新品推介:POSI±IVE SystemTM高通量快速筛查检测系统解决方案
目前对于目标化合物的定量检测,国内外的食品法规均是采用三重四极串联质谱.三重四极串联质谱不仅具有多样性的功能和先进的定量分析能力,而且在灵敏度和选择性方面也非常出色,但是它只能检测设定的目标化合物,对非目标化合物的检测和未知物的定性分析则不能完全胜任,并且无法对样品进行筛查检测存档.
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北京市售即食熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌定量污染水平研究
目的 了解北京市售即食熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌污染情况及污染来源.方法 采用MPN法定量检测即食熟肉制品中的单核细胞增生李斯特菌,在对分离菌株正确鉴定的基础上,对单核细胞增生李斯特菌分离株进行脉冲场凝胶电泳分型研究.结果 197份即食熟肉制品中有14份检出单核细胞增生李斯特菌,检出率为7.11%,平均污染水平为14.31 MPN/g.其中农贸市场采集的样品单核细胞增生李斯特菌污染率(13.89%)高于熟肉专卖店(8.57%)、超市(5.75%)和饭馆(2.56%).而超市采集样品中该菌的平均污染水平高,为22.78 MPN/g.共发现13种单核细胞增生李斯特菌PFGE型,其中从同一农贸市场采集的样品中分离到两株同一个PFGE型别的单核细胞增生李斯特菌,提示加工环境存在单核细胞增生李斯特菌的污染或加工过程的交叉污染.结论 北京市售即食熟肉制品中存在单核细胞增生李斯特菌污染,农贸市场出售产品污染状况高于超市、熟肉专卖店和饭馆.
关键词: 单核细胞增生李斯特菌 即食熟肉制品 定量检测 脉冲场凝胶电泳 -
用AIA-600Ⅱ检测β-HCG时好先做定性试验
1方法用AIA-600Ⅱ全自动免疫发光分析仪定量检测β-HCG(人促绒毛膜性腺激素)时,好先将被检标本做HCG定性试验,如定性结果为阳性,要吸取蒸馏水500 mL加被检血清10 mL,充分混匀后再进行定量检测.
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多孔注液清洗瓶的制作及临床应用
2009年10月,我科引进了LUMO型化学发光免疫分析仪,用于乙肝两对半及C-肽、胰岛素等项目的定量检测.为了配合该仪器的使用,我们在实际工作中总结、发明制作了多孔注液清洗瓶,应用于实验室,经过两年多的临床应用,收到了良好的效果.现介绍如下.
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免疫胶体金技术在医学检验领域的应用与进展
免疫胶体金技术是临床上一种新兴的免疫检验技术,由于其具有操作简单、检验迅速等优点,近年来广泛应用于医学检验领域中的定量检测或定性检测中,且效果已获广大临床检验医师的认可.本研究就近年来医学检验领域对免疫胶体金技术的应用情况进行分析,探讨该技术的应用进展.
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定量检测血清降钙素原对细菌性肺炎的诊断价值
目的 探讨定量检测血清降钙素原(PCT)对细菌性肺炎的诊断价值.方法 选取2016年1月至2017年8月收治的85例肺炎患者,其中细菌性肺炎28例(细菌性肺炎组),支原体肺炎28例(支原体肺炎组),病毒性肺炎29例(病毒性肺炎组);选取同时期未感染的健康者31名作为对照组,观察各组白细胞(WBC)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、PCT水平.结果 细菌性肺炎组WBC明显高于病毒性肺炎组(P<0.05),其余各组WBC比较,差异无统计学意义(P>0.05);细菌性肺炎组CRP明显高于病毒性肺炎组、支原体肺炎组及对照组(P<0.05),病毒性肺炎组、支原体肺炎组的CRP比较,差异无统计学意义(P>0.05),但病毒性肺炎组、支原体肺炎组的CRP均高于对照组(P<0.05);细菌性肺炎组PCT明显高于病毒性肺炎组、支原体肺炎组及对照组(P<0.05),其余组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);细菌性肺炎组、病毒性肺炎组、支原体肺炎组ESR比较,差异无统计学意义(P>0.05),但细菌性肺炎组、病毒性肺炎组、支原体肺炎组ESR均高于对照组(P<0.05);细菌性肺炎组PCT阳性率明显高于病毒性肺炎组、支原体肺炎组及对照组(P<0.05).结论 定量检测血清PCT对细菌性肺炎具有较高的鉴别诊断价值.
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Tricine-SDS-PAGE电泳定量检测人体泪液中溶菌酶含量
目的 建立一种定量检测人体泪液中溶菌酶含量的方法 .方法通过改进的Tricine-SDS-PAGE电泳,分析正常人体天然泪液中分子量在3~30 kDa的蛋白质分布,使泪液溶菌酶与其它泪液蛋白有效分离,用Image J软件对溶菌酶电泳条带进行灰度分析,定量测定其中溶菌酶的含量.结果 泪液溶菌酶和其它小分子蛋白可用改进的Tricine-SDS-PAGE电泳有效分离,对于人体泪液中的溶菌酶检测专属性良好;上样量10~30μg范围内,溶菌酶含量和电泳条带灰度面积线性关系良好(r=0.9934);分析17例人体泪液的样本,其中溶菌酶的含量在1.38~3.07 mg/mL.结论 改进的Tricine-SDS-PAGE电泳法简单直观,并能批量性的一次分析多个样本,可用于科研及临床上人体泪液中溶菌酶的含量检测.
关键词: 人体泪液 溶菌酶 Tricine-SDS-PAGE电泳 定量检测 -
结核分支杆菌mRNA定量检测作为活菌标志及其用于利福平敏感性分析的研究
目的:探讨结核分支杆菌mRNA作为活菌检测分子标志的可行性,评价mRNA定量法进行结核分支杆菌利福平敏感性分析的应用价值.
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嗜肺军团菌的环介导等温扩增检测技术研究
目的 建立一种简便、快速和高灵敏度的嗜肺军团菌的检测方法.方法 利用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,根据嗜肺军团菌mip基因的特征性保守序列,设计LAMP检测引物,建立LAMP检测方法,用常规PCR检测平台和其他21种致病菌评估该方法的特异性、灵敏度、重复性及实用性,同时以荧光法建立反应阈值与模板初始浓度之间的线性标准曲线.结果 建立的LAMP方法检出限为1.0×1 02copies/μl,与其他致病菌无交叉反应,反应阈值与初始模板浓度有良好的线性关系(R2=0.9843),LAMP检测结果与传统分离培养方法具有良好的吻合性.结论 环介导等温扩增技术检测嗜肺军团菌简便、快速、敏感度高,具有广阔的应用前景.
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胶体金免疫层析快速定量检测西尼罗病毒抗体方法的建立
目的 建立一种胶体金免疫层析快速定量检测西尼罗病毒抗体的方法.方法利用胶体金免疫层析技术,建立快速检测西尼罗病毒抗体的方法,评价其特异性和敏感性,进行定量检测并拟合标准曲线.结果该法可在15min内完成定性和定量检测,定量检测灵敏度为1:104/test,线性范围1:101/test~ 1:10/test、回收率86.5%~ 122.7%.结论建立的检测西尼罗病毒抗体的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地对样本中的西尼罗病毒抗体进行定性、定量检测.
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利用胶体金免疫层析技术快速定量检测单增李斯特菌方法的建立
[目的]建立胶体金免疫层析技术快速定量检测单增李斯特菌方法.[方法]利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立单增李斯特菌的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合标准曲线进行定量检测;在牛奶、橙汁、果冻等即食食品样品中添加单增李斯特菌模拟污染样品,评价该方法对半固体、液体等即食食品、可疑生物恐怖样品的检测能力.[结果]该法可在10min内完成定性和半定量检测,定量检测灵敏度为3.5×103cfu/ml,线性范围3.5×105~3.5×108cfu/ml,回收率在99%~101.7%之间.[结论]建立的检测单增李斯特菌的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地对样品中的单增李斯特菌进行定性、定量检测.
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悬浮芯片法与生物素-亲和素ELISA法检测炭疽杆菌芽孢比较研究
[目的]建立快速、敏感、特异、高通量、同时检测多种病原体的技术方法.[方法]建立基于双抗体夹心免疫学检测的编码微球悬浮芯片和生物素-亲和素ELISA方法,比较2种方法对炭疽芽孢杆菌定量检测以及直接从"白色粉末"样品中检测的能力.[结果]悬浮芯片对炭疽杆菌芽孢检测具有很好的敏感性和特异性,低检出限为4.2×103cfu/ml,动态范围为103~107cfu/ml;生物素-亲和素ELISA低可以检测到1.4×104cfu/ml,线性范围为104~107cfu/ml.[结论]悬浮芯片方法检测炭疽杆菌芽孢比ELISA方法具有更高的灵敏度和更宽的动态检测范围,在病原菌的早期识别、快速诊断、应对生物恐怖威胁、控制传染病爆发中具有广阔的应用前景.
关键词: 悬浮芯片 生物素-亲和素ELISA 芽孢杆菌 炭疽 定量检测