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病毒核酸定量测定方法及其存在的问题
随着科学技术的不断进步,人们不但能够对病毒核酸进行定性检测,如今发展到还能够定量检测病毒核酸分子.有关定量测定病毒核酸的方法已有学者作过总结和介绍[1],但病毒核酸定量测定过程中存在的问题,却很少有人总结报道.本文根据作者在实际工作中发现的问题和参考国外有关文献,着重在这方面进行总结.但为了更好的说明这个问题,首先对定量测定病毒核酸的方法作一简要介绍.
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心脏型脂肪酸结合蛋白在早期快速诊断急性心肌梗死中的应用研究
近年来,急性心肌梗死(AMI)的发病率持续升高,病死率高居不下,发病年龄渐趋年轻,严重威胁着人类的健康,对于AMI的早期诊断显得尤为重要.目前临床常用的检测指标如肌钙蛋白T(cTnT)、心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)等在AMI发病早期(2~4 h)的敏感性较低,而肌红蛋白(MYO)虽然在早期出现,但其特异性较差.近年来发现的一种新的心肌损伤标记物一心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)它是存在于心脏的低相对分子质量胞质蛋白,具有较高的组织特异性.本研究对胸痛早期的患者血液中的H-FABP水平定性检测,并与目前常用的心肌损伤标志物比较,分析H-FABP在AMI早期诊断中的临床价值.现报告如下.
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基层农残速测仪的选购
农药在我国种植业中普遍使用,农药残留的环境暴露可引起多种健康效应,如导致神经系统受损、影响生殖系统,干扰人体免疫系统和内分泌系统,甚至导致癌症等.戴慧峰等人对CL-BⅢ型八通道农残速测仪进行了农药检出限试验研究,结果证明仪器对有机磷类农药(如毒死蜱、三唑磷)和氨基甲酸酯类农药(如克百威)有较高灵敏度.陈兴江等人应用农残速测仪对烟草上有机磷和氨基甲酸酯类农药进行检测并与色谱检测结果比较,结果表明,农残速测仪定性检测到的乐果、辛硫磷、灭多威等3种农药残留,与色谱检测结果一致.戴笑敏对6类48个样品的农药残留速测结果用气相色谱法进行验证与比较分析,结果表明阳性结果符合率在80%以上.
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浙江食药局通报18批次均合格
5日,由浙江省食品药品监管局、杭州市市场监管局等单位主办的食品安全"你点我检进家庭"活动正式进入抽检阶段,首日抵达浙江杭州市西湖区、拱墅区,8位消费者家庭代表对家门口常光顾的超市、农贸市场等地进行抽检.记者从杭州市市场监管局获悉,截止今天下午四点,快速定性检测已有18批次出结果,均为合格.
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2014年赤峰市免疫人群HBsAg、抗-HBs水平监测报告
目的:跟踪赤蜂地区免后人群HBsAg携带情况及抗体水平。方法:将监测对象分为6岁、12岁两个年龄组,每个旗县采集血清标本每年龄组20份共计40份,采集血清送北京CDC免疫规划所进行实验室检测,采用化学发光法定性检测HBsAg,定量检测抗-HBs。结果:全市共监测6、12岁免疫人群480人,其中HBsAg阳性4人,阳性率0.83%,抗-HBs阳性257人,阳性率53.5%。结论:赤峰市调查人群HBsAg携带率低于全国平均水平,抗-HBs抗体阳性率有所下降,应该及时提高 HepB疫苗接种及时率和加强免疫接种率。
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食品微生物多轮次能力验证方案初探
目的 探讨微生物多轮次能力验证方案及其在考察参试实验室检测能力的持续满意情况和评价实验室整体检测水平中的作用.方法 通过食品微生物两轮次能力验证PTC-T013、9个微生物检测项目、11个检测样品分别进行5项定量检测和6项定性检测来考察参试实验室的检测水平;定量样品采用Z-比分数统计分析,定性样品直接与设定值比较,两轮次结果进行综合比较分析.结果 71.7%实验室取得了满意的结果,虽然两轮不满意的结果数相差不大(5.3%和4.3%),但是第2轮出现不满意结果的实验室数量明显减少(21.7%和8.7%).结论 多轮次能力验证方案为参试实验室提供更多的选择;其结果能更真实地反映出参试单位的持续满意状况及整体检测水平.
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2385件餐饮具卫生状况分析
如何加强餐饮具卫生管理,减少餐饮具对食品的污染,已成为食品卫生监测部门当前迫切需要解决的问题。我们于2001年5月和11月,先后2次对城内餐饮行业使用的各类餐饮具卫生状况做了卫生学监测。现将监测情况报告如下。 1 材料和方法 1.1 采样方法 现场随机抽取各类餐饮具样品,用纸片法作无菌采样。 1.2 检测指标 大肠菌群定性检测。 1.3 检测材料 采用大肠菌群快速检验纸片(1件/25cm2×2)由南京市三爱实业有限公司制造,卫生部卫生监督检验所监制。……
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蓝谱Loopamp?沙门氏菌检测试剂盒
可对食品中沙门氏菌进行定性检测,并包含前处理试剂,简单的处理即可用于反应,能在1小时内完成检测,具有快速、高灵敏度和特异性的优点,将于今年在国内上市。
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蓝谱Loopamp?沙门氏菌检测试剂盒
针对沙门氏菌属的保守基因invA进行定性检测,特异性检测食品中的存在的沙门氏菌。该试剂盒包含前处理试剂,增菌后进行简单的核酸提取即可用于LAMP?反应,可在1小时内完成检测,反应结果无需电泳,加入荧光染料即可通过肉眼观察反应结果。具备简单、快速、高灵敏度和高特异性等优点。
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定性检测体外诊断试剂临床试验方案的设计策略
作为体外诊断试剂产品批准上市前重要的验证及评价工作之一,体外诊断试剂临床试验的质量直接关系到产品在临床使用中的安全有效性.文章以定性体外诊断试剂为例,就临床试验方案设计中需要遵循的基本原则以及重要的关注点进行了介绍.
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定性检测性能评估方法研究
目的:建立一种评估定性检测性能的科学方法.方法:采用比较分析的方法,当诊断明确时,分别将检测方法和可比较方法与明确诊断的检测性能进行比较;当诊断不明确时,比较检测方法和可比较方法的一致程度.结果:以实例的方式将检测方法、可比较方法进行了比较,得出了性能较好的定性检测方法.结论:定性检测是临床实验室一种很重要的检测方法,其检测性能如何直接决定患者的检测结果,该评估方法的提出为临床实验室引入一种新的检测方法提供了指南.
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输卵管妊娠破裂后穹窿穿刺血HCG定量检测临床应用研究
输卵管妊娠是妇产科常见急症,如果不能及时诊断和治疗将给患者带来生命危险,本文总结了2001年11月至2004年2月,本院收治的32例资料完整的输卵管妊娠破裂后穹窿穿刺血HCG(人绒毛膜促性腺激素)水平定量分析,结果证明该检测可以提高宫外孕的确诊率,大大降低了此类患者的生命危险.目前国内有关妊娠HCG的检测多为定性检测,定量检测报道较少,本文将其方法及结果报道如下.
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实时荧光定量PCR的应用体会
对于病毒的监测和疾病的诊断,定性检测已不能满足临床需要,实时荧光定量PCR技术(realtime quantitative PCR)于1996年由美国Aplied Biosystems公司推出.
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微流控蛋白印迹杂交与传统Western blot对目的蛋白的检测效果比较
目的 借助微流控蛋白印迹实验实现对目的蛋白省时、省力和省试剂的定性以及相对定量分析.方法 选取O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)蛋白为目的蛋白,选用高表达MGMT蛋白的MCF7细胞为细胞模型,用传统蛋白印迹杂交和纸芯片蛋白印迹杂交实验法对经过药物MGMT阻断剂(lomeguatrib)处理后MCF7细胞的MGMT蛋白表达量做定性以及相对定量分析.结果 纸芯片蛋白印迹杂交可以成功进行MGMT的定性、相对定量分析,而且上样检测量可低至10~25 pg.这相比于传统Western blot的上样检测蛋白检测限1~5 ng,提高了3个数量级.整个操作流程只需要1h,所用试剂量少,实验成本更低.而且,纸芯片的多通道构造可以实现如同反向蛋白杂交分析(RPPA)一样的,对组织蛋白表达量进行高通量的系统检测.结论 微流控蛋白印迹杂交相较于传统Western blot可以检测到更微量级的蛋白,节省试剂和样品,省时和省力,并可进行高通量的定性以及相对定量分析.
关键词: 微流控纸芯片 Westernblot MGMT 定性检测 相对定量检测 -
西方马脑炎病毒抗体快速检测试纸条的研制
目的 研制一种快速检测西方马脑炎病毒(WEEV)抗体的试纸条.方法 利用胶体金标记和免疫层析技术,用25 nm胶体金标记葡萄球菌A蛋白,并用硝酸纤维膜包被WEEV抗原及羊抗兔IgG作为检测带和质控带,研制出WEEV抗体快速检测试纸条.对该试纸条的敏感性、特异性和稳定性做出评价,并拟合检测曲线进行半定量检测.在健康人血清、兔血清和鼠血清中添加WEEV抗体模拟污染样品,评价该方法的检测能力.结果 该试纸条可在20 min内完成定性和半定量检测,灵敏度为120 ng/ml,模拟样品的检测灵敏度也相同.线性范围120~1200 ng/ml.对发病症状相似以及近缘的其他病毒进行检测,均无非特异反应.试纸条在37℃下保存1个月,检测结果不变.结论 该试纸条具有快速、简便、灵敏、特异、稳定的特点,适用于现场检测.
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乙型肝炎病毒基因定量聚合酶链反应的临床应用
乙型肝炎病毒(HBV)感染时,外周血中HBV DNA是反映病毒复制活动直接和可靠的标志,其含量直接代表患者病毒血症水平.近年来,随着聚合酶链反应(PCR)的不断发展,在HBV DNA定性检测基础上建立了定量检测方法,灵敏度和特异性不断提高,在研究病毒感染量与临床病情的关系,进一步评价HBV感染的自然史和HBV血清标志物的临床意义及鉴定抗病毒药物疗效等方面具有重要意义.我们采用PCR-微孔板酶联杂交法定量检测102例乙型肝炎患者血清HBV DNA含量,以探讨病毒复制水平与血清标志物表现模式之间的关系,以期为广大乙肝患者的诊治及预测临床转归提供参考.
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两种方法检测乙型肝炎病毒血清标志物的对比
目的 比较酶联免疫吸附实验(ELISA)和时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)在乙型肝炎病毒血清标志物检测中的临床价值.方法 用ELISA法和TRFIA法对156例患者HBV血清标志物5项指标同时检测,然后进行结果分析.结果两种方法 结果比较,HesAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb结果符合率分别为95.6%、90.6%、97.3%、94.0%、95.7%.两种检测方法 结果无显著性差异(P>0.05),而TRFIA法阳性率高于ELISA法;其常见模式平均符合率为87.45%,结果无显著性差异(P>0.05),e抗体和c抗体阳性、c抗体阳性模式符合率差.两者对乙肝表面抗原的检测灵敏度均达到了0.2ng/ml.对HBcAb的测定,ELISA为低.结论 TRFIA法是一种灵敏、特异、准确的定量检测方法 ,对评估HBV感染后病情转归及抗病毒治疗的疗效考核具有重要的临床意义,比ELISA检测方法 更灵敏和准确.
关键词: 时间分辨荧光免疫分析技术 酶联免疫吸附实验 乙型肝炎 定性检测 定量检测 -
检测尿液红细胞的几种方法及临床应用分析
正常人尿中排出红细胞甚少, 偶然一次离心尿内可不见或偶见红细胞,24h尿中排出的红细胞数不超过100万.离心后的尿液,每高倍视野平均可见到1~2个红细胞为异常表现[1].病理性血尿对诊断泌尿系统疾病均有临床诊断参考价值.目前,检测尿红细胞的方法有尿红细胞定性检测、尿红细胞定量检测及尿红细胞的形态鉴别.
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Taqman技术定性检测主要性病病原体的临床评价
目前对性传播疾病主要病原体淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)的病原检测,主要采用培养法和常规PCR技术.本试验采用Taqman技术对临床标本中NG,CT及UU进行定性检测,并与培养法和常规PCR方法比较,评价Taqman技术在性病病原体定性检测中的临床应用价值.
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一致-简并杂交寡核苷酸引物设计用于未知病原微生物检测的进展
近年研究发现,暴发的"非典型性肺炎",禽流感及四川发生的猪链球菌感染等要么是已发现的病原微生物家族中的新成员,要么是原来不感染人的动物病原体.因此,快速、及时、准确定性检测这些病原体,对防治疾病具有重要意义.