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先天性巨细胞病毒感染白细胞介素-2及γ干扰素动态观察
目的研究先天性巨细胞病毒(cylomegalovirus,CMV)感染患儿外周血白细胞介素-2(interleukin 2,IL-2)、γ干扰素(Interferon,IFN γ)水平的变化与CMV病毒负荷的相关关系. 方法用荧光定量聚合酶链反应(fluorogenic quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)定量测定外周血CMV-DNA,31例足月新生儿CMV-DNA阳性为感染组,并同时检测CMV-IgM.选取同期非感染新生儿(外周血CMV-DNA及抗CMV-IgM均阴性)29例为对照组.2组患儿应用ELISA法检测IL-2及IFN γ水平,并于4周后复查. 结果感染组患儿外周血CMV-DNA定量中位数为2.75×104 copy/μl,IL-2和IFN γ水平明显降低,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01);IL-2、IFN γ水平与CMV-DNA基因定量值呈负相关,r分别为-0.7882、-0.6751(P<0.01);4周后复查30例患儿CMV-DNA转阴,其IL-2、IN γ水平上升,与CMV-DNA阳性时比较,差异有显著性(P<0.01),与对照组比较,差异无显著性(P>0.05) 结论先天性CMV感染时机体外周血IL-2、IFN γ水平明显降低,其水平与机体病毒负荷有一定关系.
关键词: 先天性巨细胞病毒感染 定量聚合酶链反应 白细胞介素-2 γ干扰素 -
荧光探针定量聚合酶链反应检测结核分支杆菌比较研究
关于结核病的实验室诊断,近年来报道了一些新的快速诊断方法:如荧光探针定量聚合酶链反应,连接酶链反应,基因探针扩增检测结核分支杆菌复合物等新技术方法,提高了结核分支杆菌(MTB)的检出率.
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乙型肝炎病毒基因定量聚合酶链反应的临床应用
乙型肝炎病毒(HBV)感染时,外周血中HBV DNA是反映病毒复制活动直接和可靠的标志,其含量直接代表患者病毒血症水平.近年来,随着聚合酶链反应(PCR)的不断发展,在HBV DNA定性检测基础上建立了定量检测方法,灵敏度和特异性不断提高,在研究病毒感染量与临床病情的关系,进一步评价HBV感染的自然史和HBV血清标志物的临床意义及鉴定抗病毒药物疗效等方面具有重要意义.我们采用PCR-微孔板酶联杂交法定量检测102例乙型肝炎患者血清HBV DNA含量,以探讨病毒复制水平与血清标志物表现模式之间的关系,以期为广大乙肝患者的诊治及预测临床转归提供参考.
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Excel散点图用于定量聚合酶链反应室内质控的动态分析
Excel有格式化数值与图表功能,可作回归分析、预测趋势、拟合曲线等,还可作柱状图、散点图等二、三维图表.本研究用Excel 2000散点图的功能[1],进行定量聚合酶链反应(PCR)室内质控动态分析,简捷实用,取得满意的结果.
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用统计学方法解释和处理定量聚合酶链反应试验结果
定量聚合酶链反应(PCR)具有高敏感性和特异性,并在抗病毒药物疗效观察方面发挥着其他方法不可替代的作用.但在结果报告方式上,由于按试剂说明书规定,将小于检测限的报告为<500拷贝/ml或<1 000 拷贝/ml,而将无Ct值的报告为0拷贝/ml,该方法的临床界定预值标准的价值,不仅受到医生和患者的质疑,而且也受到检验工作者的异议.实际上,这种报告方式值得商榷.
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定量聚合酶链反应测定技术
聚合酶链反应(PCR)现已广泛用于涉及到核酸的科学研究以及临床疾病的诊断和治疗监测.由于PCR是对原始待测模板核酸的一个扩增过程,任何干扰PCR指数扩增的因素都会影响扩增产物的量,使得PCR扩增终产物的数量与原始模板数量之间没有一个固定的比例关系,通过检测扩增终产物很难对原始模板进行准确定量.近年来,研究人员为克服上述影响因素,研究了各种相对准确的定量PCR方法[1-3].
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干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎血清HBV DNA含量变化及临床意义
为探讨干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎(CHB)的疗效与血清HBV DNA含量之间的关系,我们应用定量聚合酶链反应(PCR),检测了26例慢性乙型肝炎患者干扰素α-2b治疗前后血清HBV DNA含量(干扰素α-2b 300万U肌注,1次/d,共14d.
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慢性肝病患者血清HBV DNA含量与e系统关系的探讨
[摘要]目的 探讨慢性肝病患者血清HBV DNA含量与e系统的关系.方法 分别用定量聚合酶链反应(PCR)法和酶标法(ELISA),检测207例乙型肝炎病毒慢性感染者血清HBV DNA含量与乙肝病毒血清标记物(HBVM).
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脑梗死患者外周血巨噬细胞移动抑制因子的表达
应用酶联免疫吸附(ELISA)法和定量聚合酶链反应(PCR)技术,观察脑梗死患者不同期血浆巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)的浓度和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)MIF mRNA的表达水平,探讨MIF在脑梗死病理过程中的变化.
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慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因含量与临床的相关性研究
目的 探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者病毒复制水平与HBV标志物(HBV-M)模式及肝损害程度的关系.方法 360例慢性乙型肝炎(轻度160例、中度140例、重度60例)患者血清HBV DNA含量采用荧光标记(AmpliSensor)定量PCR方法检测,HBV-M检测采用ELISA法.结果 血清HBV DNA含量与HBV-M模式有关,血清HBeAg阳性组HBV DNA含量(106.35±1.84)显著高于HBeAg阴性组(104.73±1.88) (P <0.01),慢乙肝轻度、中度患者HBV DNA含量[(105.58±1.92),(106.27 ±2.05)]与慢乙肝重度患者HBV DNA含量( 105.73±1.90)相比较无显著性差异(P>0.05),且不同HBV DNA水平患者的TBil、ALT、AST差别无显著性(P>0.05).结论 血清HBeAg的存在影响HBV DNA的水平变化,随着肝损害程度的加重,慢性乙型肝炎轻度、中度、重度患者血清HBV DNA基因含量未发生显著变化,同时血清HBV DNA含量与TBil、ALT、AST水平无明显关系.
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腺病毒-阴离子脂质体复合物的制备和体外表征
为了制备腺病毒-阴离子脂质体复合物(AL-Ad5),首先利用HEK 293细胞大量扩增了带有绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒,并以氯化铯两步密度梯度离心法进行纯化,再通过细胞病变效应(CPE)法、壳蛋白免疫法和定量聚合酶链反应(Q-PCR)法分别测定腺病毒滴度.以中心组合设计法优化处方和制备条件,通过钙离子融合法制备目标复合物AL-Ad5,以透射电镜和动态光散射法分别对其外观形态、粒径和zeta电位进行考察;并制备双色荧光标记的复合物,通过激光共聚焦技术观察该复合物被MDCK细胞摄取后的胞内定位,以考察阴离子脂质体对腺病毒的包合情况.结果表明,目标复合物分布均匀,粒径和zeta电位分别为(211±10) nm和(-41.2±2.2) mV.激光共聚焦实验结果表明,红色荧光标记的腺病毒和绿色荧光标记的脂质体在MDCK细胞内的定位一致.由此说明,阴离子脂质体能够较好地包裹腺病毒以形成腺病毒-阴离子脂质体复合物.
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慢性乙型肝炎患者HBV低水平复制状态与临床的相关性研究
目的 探讨HBV低水平复制状态下慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者的临床表现.方法 采用荧光定量PCR方法 检测180例各型慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量,按照HBV DNA水平的高低进行分组,对不同组别患者的临床表现进行分析,探讨HBV低水平复制对病情的影响.结果 HBVDNA含量≤103 copy/ml组的总胆红素(TBil)为(43.00±57.79)μmol/L,与其他各组比较无明显差异(P>0.05);丙氨酸氨基转移酶(ALT)为(223±344)U/L、门冬氨酸氨基转移酶(AST)为(138±221)U/L,均低于HBV DNA含量为108组(P<0.05),而且HBV DNA含量≤103 copy/ml组中慢性乙型肝炎轻、中、重度患者的发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 慢性乙型肝炎患者的病情轻重与血清中HBV DNA含量无明显相关性,HBV的低水平复制也不能代表患者的病情较轻.
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酶联免疫吸附试验法检测的乙肝两对半结果分析
目的:探讨酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测乙肝两对半的应用价值。方法将我院2013年12月至2015年1月就诊时做过乙肝两对半检测疑似有乙肝的128例患者作为研究对象,分别对患者采取酶联免疫吸附试验法和定量聚合酶链反应(Q-PCR)方法实施检测,比较两种方法检测的结果。结果采用定量聚合酶链反应检测方法检出率为94.53%(121/128),采用取酶联免疫吸附试验法检出率为88.28(113/128),两种检出率比较,无明显差异(P<0.05)。结论酶联免疫吸附试验法与定量聚合酶链反应检测方法在乙肝两对半的检测中检出率无明显差异,检出率均高,但是采用定量聚合酶链反应检测相对聚合酶链反应检测方方法来说,具有操作简单的优势,更适用于急诊中的检测。
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肺结核实验室诊断的研究进展
肺结核是由结核分枝杆菌感染引起的肺部变态反应性疾病,严重威胁人类健康,是各级检验机构重点关注和检测的传染性疾病之一.近年来该病在我国发病率呈现上升趋势,虽然一经确诊后治疗手段比较成熟和固定,但早期检查和早期发现对于疾病的病程及预后有重大的影响.该文就近期肺结核在诊断技术方面的进展作一综述,为临床治疗提供指导.
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慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA与病毒复制水平相关性分析
目的:通过检测180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA和HBV-M含量,探讨不同类型慢件乙型肝炎患者病毒复制水平与HBV标志物(HBV-M)模式及肝损害程度的关系.方法:2000年8月~2003年8月我院传染科收治住院的慢性乙型肝炎180例.采用荧光定量PCR方法检测HBV DNA血清含量,同时检测HBV血清标志物及TBil、ALT、AST.结果:血清HBeAg阳性组HBV DNA含量(106.35±1.84)显著高于HBeAg阴性组(104.73±1.88)(P<0.01),而不同HBV DNA水平患者的TBil、ALT、AST差别无显著性(P>0.05).结论:血清HBeAg的存在影响HBV DNA的水平变化,血清HBV DNA含量与TBil、ALT、AST水平无明显关系.
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慢性乙型肝炎血清HBV DNA水平与血清ALT的关系
目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)复制水平与丙氨酸氨基转移酶(ALT)之间的关系.方法 对180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量采用荧光标记(AmpliSensor)定量PCR方法检测,并比较HBV DNA含量与ALT的关系.结果 慢性乙型肝炎轻度、中度患者HBV DNA含量(105.58±1.92,106.27±2.05)与慢性乙型肝炎重度患者HBV DNA含量(105.73±1.90)相比较差异无统计学意义(P>0.05),且不同HBV DNA水平患者的ALT差异无统计学意义(P>0.05). 结论随着肝损害程度的加重,慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA基因含量未发生显著变化,同时血清HBV DNA含量与ALT水平无明显关系.
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慢活肝和肝硬化患者乙肝血清标志物与HBV-DNA含量的关系
目的探讨慢性活动性乙型肝炎(慢活肝)和肝硬化患者病毒复制指标HBV-DNA与HBeAg的关系.方法 HBV-DNA基因含量测定采用荧光定量PCR方法,乙肝血清标志物测定用ELISA法,肝功能检验用常规法.结果慢活肝患者中大三阳HBV-DNA基因含量明显高于小三阳者(χ2=11.43,P<0.01),肝硬化患者二者无差异(P=2.04,P>0.05),肝功能慢活肝ALT异常高于肝硬化(χ2=4.10,P<0.05),血清总胆红素(TBIL)异常肝硬化高于慢活肝(χ2=9.28,P<0.01).结论 HBeAg的存在影响HBV-DNA的水平.在临床治疗上,应以ALT、TBIL等肝功能检查为依据.
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单纯慢性乙型肝炎病毒感染者HBV DNA水平与临床
乙型肝炎病毒(HBV)感染慢性化主要是因为乙型肝炎病毒在体内持续复制引起.近年作者运用定量聚合酶链反应(PCR)方法测定不同类型慢性HBV感染患者的血清HBV DNA拷贝数,报告如下.
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丙型肝炎病毒感染者血清病毒含量与肝细胞损伤关系的研究
目的探讨HCV RNA含量与丙型肝炎的临床分型及丙氨酸转氨酶(ALT)的关系.方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测了104例HCV感染者血清HCV RNA含量.结果104例HCV感染者血清HCV RNA含量为103~107拷贝/ml之间.慢性肝炎中度和轻度患者血清HCV RNA含量为(3.2±9.5)×106和3.9×105±1.1×106拷贝/ml(P<0.05).血清HCV RNA水平高者ALT异常率显著高于低水平患者.结论血清HCV RNA含量与肝细胞损伤程度有一定相关性,进一步证明HCV对肝细胞有直接损害作用.
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肝病患者HBV-DNA定量与e系统对肝功能的影响(附546例观察)
目的:本文采用定量聚合酶链反应(PCR)检测了546例乙型肝炎及肝硬化患者血清HBV-DNA含量,并研究了乙肝标志与肝功能中转氨酶和黄疸的关系.结果显示,血清HBV含量及HbeAg与转氨酶无关,随胆红素的上升,HBV-DNA含量逐渐下降,HBeAg(-)组黄疸明显高于HBeAg(+)组,表明:乙肝肝损伤的重要因素为免疫损伤.