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微波消毒口腔石膏模型的实验研究
目的 评价微波消毒法对口腔石膏模型的消毒效果.方法 用细菌定量检测和基因扩增荧光定量技术,对微波照射消毒口腔石膏模型的效果进行了观察.结果 用输出功率120 W微波炉对染菌口腔石膏模型进行照射消毒.照射5 min,可完全杀灭污染在口腔石膏模型上的枯草芽孢杆菌,并可完全灭活污染在口腔石膏模型上的乙型肝炎病毒DNA.结论 普通家用微波炉在满功率条件下照射5min,可有效杀灭污染在口腔石膏模型上的细菌和病毒.
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高灵敏度乙肝核酸定量与乙肝血清标志物的相关性分析
目的 探讨高灵敏度的荧光定量PCR检测的乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)与乙肝血清免疫标志物(HBV M)之间的相关性及临床意义.方法 选取234例患者标本,同时检测HBV DNA载量和HBV M.根据HBV M模式将结果分为五组,并对HBV DNA载量和HBV M之间的关系进行分析.选取177例乙肝患者,分析HBV DNA载量水平与HBeAg之间的关系.结果 Ⅰ组HBV DNA阳性率为77.4％;Ⅱ组HBV DNA阳性率为70.4％,两者之间差异无统计学意义(χ2=0.617,P ＞0.05).HBeAg表达水平与HBV DNA载量之间存在正相关关系(γ=0.812,P＜0.01).结论 高灵敏度HBVDNA与经典化学发光法的检测结果之间有很好的相关性.提高HBV DNA的检测灵敏度对于乙型肝炎患者,尤其对小三阳患者的病情和疗效评估具有重要的临床意义.
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干扰素抗体的检测及临床研究
] 目的探讨干扰素抗体(NA)对干扰素疗效的影响.方法用ELISA法检测58 例慢性乙型肝炎(CHB)患者干扰素治疗前后血清的NA,同时用荧光定量PCR技术检测干扰素治疗前后血清HBV DNA的含量.结果 58例接受干扰素治疗的CHB患者中26例患者检出NA(44.8%),治疗前后的血清HBV DNA含量在NA阳性组无差异(p>0.05),在NA阴性组有差异(p<0.05).26例NA阳性者治疗结束时2例(7.69%)患者血清中HBV DNA被清除,32例NA阴性者在治疗结束时10例(31.25%)患者血清中HBV DNA被清除,二者比较p<0.05.结论 NA能影响干扰素的疗效.
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慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因含量与临床的相关性研究
目的 探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者病毒复制水平与HBV标志物(HBV-M)模式及肝损害程度的关系.方法 360例慢性乙型肝炎(轻度160例、中度140例、重度60例)患者血清HBV DNA含量采用荧光标记(AmpliSensor)定量PCR方法检测,HBV-M检测采用ELISA法.结果 血清HBV DNA含量与HBV-M模式有关,血清HBeAg阳性组HBV DNA含量(106.35±1.84)显著高于HBeAg阴性组(104.73±1.88) (P ＜0.01),慢乙肝轻度、中度患者HBV DNA含量[(105.58±1.92),(106.27 ±2.05)]与慢乙肝重度患者HBV DNA含量( 105.73±1.90)相比较无显著性差异(P＞0.05),且不同HBV DNA水平患者的TBil、ALT、AST差别无显著性(P＞0.05).结论 血清HBeAg的存在影响HBV DNA的水平变化,随着肝损害程度的加重,慢性乙型肝炎轻度、中度、重度患者血清HBV DNA基因含量未发生显著变化,同时血清HBV DNA含量与TBil、ALT、AST水平无明显关系.
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慢性乙型肝炎患者HBV低水平复制状态与临床的相关性研究
目的 探讨HBV低水平复制状态下慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者的临床表现.方法 采用荧光定量PCR方法 检测180例各型慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量,按照HBV DNA水平的高低进行分组,对不同组别患者的临床表现进行分析,探讨HBV低水平复制对病情的影响.结果 HBVDNA含量≤103 copy/ml组的总胆红素(TBil)为(43.00±57.79)μmol/L,与其他各组比较无明显差异(P＞0.05);丙氨酸氨基转移酶(ALT)为(223±344)U/L、门冬氨酸氨基转移酶(AST)为(138±221)U/L,均低于HBV DNA含量为108组(P＜0.05),而且HBV DNA含量≤103 copy/ml组中慢性乙型肝炎轻、中、重度患者的发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 慢性乙型肝炎患者的病情轻重与血清中HBV DNA含量无明显相关性,HBV的低水平复制也不能代表患者的病情较轻.
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乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂性能评价要点
目的 阐述乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的分析性能评价要点.方法 结合体外诊断试剂现行法规和此类试剂自身的特点,对其标准品建立及分析性能评估中检测限、特异性、准确度、线性范围评估等方法进行了详细解析.结果与结论 乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的分析性能评估应从试剂本身的定量特点出发,重点针对试剂定量的检测限、准确性、特异性等性能进行科学合理的评估.
关键词： 乙型肝炎病毒核酸 荧光定量聚合酶链反应 定量试剂性能评价 -
血清标志物与HBV-DNA含量的关系及临床检测意义
目的 观察乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒血清标记物(HBsAg、抗-HBs、HBsAg、抗-HBe、抗-HBc)与乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)的关系,探讨乙肝血清标记物及HBV-DNA测定在乙型肝炎诊断、治疗和预防中的临床价值.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测232例乙肝五项指标,利用PCR法测定不同模式血清中HBV-DNA水平,将两者作对比分析.结果 在各种组合模式中,均能不同程度地检出HBV-DNA,在HBsAg阳性标本中HBV-DNA含量明显高于HBsAg阴性的标本,差异有显著性(P＜0.05).其中以HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)模式病毒含量高,HBV-DNA阳性率为99.5%;HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)次之,HBV-DNA阳性率为45.7%,;抗-HBc(+)、HBsAg阴性或阳性低,HBV-DNA阳性率仅1 5.0%.结论 HBV血清学标志物不同模式与HBV-DNA水平存在一定的关系,综合分析两者检测结果,更能准确地判断HBV是否复制及有无传染性.
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乙型肝炎血清免疫标志物、乙型肝炎病毒核酸水平变化与HBV的关系及临床意义
目的：探讨乙型肝炎血清免疫标志物、乙型肝炎病毒核酸水平变化与HBV的关系及临床意义。方法选取本院2013年2月~2014年2月收治的108例乙型肝炎患者为研究对象,按HBV DNA含量高低分为A(<103拷贝/ml)、B(103~105拷贝/ml)、C(106~108拷贝/ml)3组,分别检测3组的乙型肝炎血清免疫标志物(HBV M)与乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)含量。结果 A组的HBeAg为(3.971±14.47)S/CO,B组为(446.7±785.8)S/CO,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)；A组的抗-HBe、HBeAg、HBsAg与C组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)；B组的HBeAg与C组比较,差异有统计学意义(P<0.05)；3组的抗-HBs、抗-HBc比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。HBV M阳性标本中抗-HBs、抗-HBc与HBsAg含量与HBV DNA无相关性,抗-HBe与HBV DNA呈负相关,HBeAg与HBV DNA呈正相关。结论定量检测HBV DNA可真实反映HBV的复制情况,对于传染性评价、乙型肝炎诊治及疗效观察均具有指导意义；定量检测HBV M虽在HBV复制程度的判断及传染性评价方面无明显价值,但可为乙型肝炎数据管理奠定基础。
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慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA与病毒复制水平相关性分析
目的:通过检测180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA和HBV-M含量,探讨不同类型慢件乙型肝炎患者病毒复制水平与HBV标志物(HBV-M)模式及肝损害程度的关系.方法:2000年8月～2003年8月我院传染科收治住院的慢性乙型肝炎180例.采用荧光定量PCR方法检测HBV DNA血清含量,同时检测HBV血清标志物及TBil、ALT、AST.结果:血清HBeAg阳性组HBV DNA含量(106.35±1.84)显著高于HBeAg阴性组(104.73±1.88)(P＜0.01),而不同HBV DNA水平患者的TBil、ALT、AST差别无显著性(P＞0.05).结论:血清HBeAg的存在影响HBV DNA的水平变化,血清HBV DNA含量与TBil、ALT、AST水平无明显关系.
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慢性乙型肝炎血清HBV DNA水平与血清ALT的关系
目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)复制水平与丙氨酸氨基转移酶(ALT)之间的关系.方法 对180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量采用荧光标记(AmpliSensor)定量PCR方法检测,并比较HBV DNA含量与ALT的关系.结果 慢性乙型肝炎轻度、中度患者HBV DNA含量(105.58±1.92,106.27±2.05)与慢性乙型肝炎重度患者HBV DNA含量(105.73±1.90)相比较差异无统计学意义(P＞0.05),且不同HBV DNA水平患者的ALT差异无统计学意义(P＞0.05). 结论随着肝损害程度的加重,慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA基因含量未发生显著变化,同时血清HBV DNA含量与ALT水平无明显关系.
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快速杂交法定量检测HBV DNA及临床应用
目的:介绍一种快速定量检测HBV DNA的方法及临床初步应用.方法:对40例乙型肝炎病毒表面抗原阳性的慢性乙型肝炎患者共79份血清标本,采用Digene第二代杂交捕获试验(Hybrid Capture Ⅱ, HC Ⅱ,v2.0)定量检测HBVDNA,并与分枝链DNA信号扩增试验(bDNA,v1.0)作比较.结果:79份HBsAg阻性血清中,HCⅡ检出HBV DNA 57份(72.2%),bDNA法为45份(57%),HCⅡ敏感性略高于bDNA法;2种方法定量检测HBVDNA的符合率为85.9%,相关性良好(r=0.95);19例抗病毒治疗乙肝患者,治疗后平均HBV DNA载量下降2(Log10)数量级,6例发生e抗原血清转换的患者平均HBVDNA载量下降3(Log10)数量级以上,且HBVDNA阴转早于e抗原血清转换.结论:HCⅡ比bDNA更为简便、经济、快速,可用于临床HBV DNA水平的定量检测、监控及抗病毒药物的筛选、考核.
关键词： 核酸杂交 分枝DNA信号放大系统 乙型肝炎病毒核酸 -
肾组织中乙型肝炎病毒抗原及核酸的检测在诊断中的意义
目的:分析肾组织中乙型肝炎病毒抗原、核酸的检出率,探讨二者在乙型肝炎病毒相关性肾炎诊断中的意义.方法:52例尿检异常的乙型肝炎病人肾组织标本,(1)免疫组织化学检测HBsAg和HBcAg;(2)巢式PCR定性检测HBV-DNA.结果:52例免疫组织化学25例阳性(48.1%),52例巢式PCR 28例阳性(53.8%).结论:肾组织中HBV核酸标志物检出率高,应该作为主要诊断依据之一.
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实时荧光定量PCR与酶联定量PCR技术在 HBV-DNA载量检测中的比较研究
目的:比较实时荧光定量PCR(RQ-PCR)与酶联定量PCR(ELQ-PCR)技术在检测HBV感染血清HBV-DNA载量的灵敏度,精确性.为乙型肝炎临床抗病毒治疗和评价药物疗效提供可靠的依据.方法:应用RQ-PCR方法检测212例(4组)HBV感染者血清,ELQ-PCR方法检测228例(4组)HBV感染者血清.结果:RQ-PCR和ELQ-PCR方法检测HBV-DNA,其阳性检出率分别为HBsAg,HBeAg,HBcAb-IgG(+)组100%和82.61%;HBsAg,HBeAb,HBcAb-IgG(+)组90.63%和73.21%;HBsAg,HBcIgG,HBcAb-IgM(+)组80.00%和57.58%;HBsAg,HB-cAb-IgG(+)组70.15%和51.43%.HBV-DNA载量的阳性检出率,经统计学处理有显著性差异(P＜0.05).结论:RQ-CPR方法检测HBV-DNA载量在实时监测,节时快速,高灵敏,高精确度等方面都更优于ELQ-PCR.
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病毒载量在乙肝肝硬化中的意义探讨
探讨乙肝肝硬化患者中,病毒载量与肝功生化指标、周围血象及临床转归的相互关系.采用实时荧光定量PCR、全自动生化分析及全自动血球计数技术,对169例乙肝肝硬化患者血标本进行检测,在169例肝硬化患者中,ALT/AST＜1,80例,ALT/AST＞1,69例(t=2.52,P＜0.05);白蛋白正常者53例,白蛋白异常者116例(t=2.80,P＜0.01);总胆红素≥171.1μmol/L者,10例,总胆红素＜171.1μmol/L者,159例(t=3.71,P＜0.01);HCC发生率39.58%(19/48),HCC发生率9.52%(4/42),x2=4.24,P＜0.05;WBC、PLT变化差异无显著性;在乙肝肝硬化中HBV DNA呈较高水平复制者,肝功能损害明显比低水平复制者为重;HCC发生与一定范围HBV复制水平相关.
关键词： 乙型肝炎病毒核酸 乙肝肝硬化 实时荧光定量聚合酶链反应 肝功能指标 原发性肝癌 -
285例HBV-DNA感染者的血清学检测情况分析
目的 通过检测285例HBV-DNA感染者血清中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,探讨加强对隐匿性肝炎检出的重要性.方法 收集285例HBV-DNA感染者的血液样本,用酶联免疫吸附法检测其乙型肝炎五项血清标志物.结果 285例HBV-DNA感染者中,大三阳感染率为56.14％;小三阳感染率为7.02％;HBsAg、HBcAb(+)感染率为8.77％;HBsAg(+)感染率为3.16％.结论 应联合检测患者HBV-DNA和乙肝五项血清标志物,制定出合理的检验程序,以此来提高隐匿性肝炎的检出率,尽量避免漏诊现象,减少医疗纠纷的发生.
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二种分子杂交技术定量检测临床标本中HBV DNA的比较
目的第2代核酸杂交捕获系统(HCⅡ)与分枝链DNA信号放大系统(bDNA)定量检测HBV DNA的临床应用比较.方法40例乙型肝炎病毒表面抗原阳性的慢性乙型肝炎患者临床血清标本共79份,采用2种杂交方法定量检测HBV DNA.结果HCⅡ与bDNA定量检测HBV DNA的阴阳性符合率为85.9%,相关系数r=0.96,P＜0.001;经敏感性比较,HCⅡ灵敏度较bDNA提高101拷贝/ml～102拷贝/ml.HCⅡ与bDNA定量检测HBV DNA结果的换算方程为:HCⅡ(HBV DNA拷贝/ml)=1.014×[bDNA(HBV DNA Eq/ml)]0.9632;或bDNA(HBV DNA Eq/ml)=4.034×[HCⅡ(HBV DNA拷贝/ml)]0.9574.在操作上HCⅡ比bDNA更为简便、快速.结论HCⅡ与bDNA法检测HBV DNA具有较好的相关性,可用于临床HBV DNA水平的定量检测、监控及抗病毒药物的筛选、考核.
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乙型肝炎病毒核酸两种PCR定量方法的比较
目的选用PCR-杂交酶免疫法和荧光能量转换PCR法,对它们在乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量分析中的灵敏度、特异性及稳定性进行比较研究,以便寻求一种较为精确的定量PCR法.方法分别用上述两种方法测定20份正常人和30份慢性乙型肝炎病人血清中HBV DNA的含量,在检测过程中,用罗氏Amplicor法作为阳性参照,衡量实验体系的稳定性.结果1灵敏度:两种方法的灵敏度很接近,PCR-杂交酶免疫法为4×103拷贝/ml,而荧光能量转换PCR法为3×103拷贝/ml.2.特异性:所有HBsAg、HBeAg、抗-HBs和抗-HBc均为阴性的血清,用两种PCR方法比较,结果相同,血清中HBV DNA均为阴性.3.稳定性:重复实验结果表明,PCR-杂交酶免疫法优于荧光能量转换PCR法,它们的变异系数分别为31.33%和52 06%,两种PCR方法均显示出良好的线性关系.结论PCR-杂交酶免疫法是一种较为精确的定量PCR方法,可用于检测病毒DNA的复制情况,并对评价药物的疗效和疾病的转归,均有一定的帮助.
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ELISA检测干扰素抗体及临床意义
目的了解干扰素抗体对干扰素疗效的影响.方法用ELISA检测64例慢性乙型肝炎(CHB)患者干扰素治疗前后血清的干扰素抗体,同时用荧光定量PCR技术检测干扰素治疗前后血清HBV DNA的含量.结果 64例接受干扰素治疗的CHB患者中的28例患者检出干扰素抗体(43.8%),治疗前后的血清HBV DNA含量在干扰素抗体阳性组无显著性差异(P＞0.05),在干扰素抗体阴性组有显著性差异(P＜0.05).28例干扰素抗体阳性者治疗结束时,2例(7.14%)患者血清中HBV DNA被清除,36例干扰素抗体阴性者在治疗结束时,12例(33.33%)患者血清中HBV DNA被清除,二者比较P＜0.05.结论干扰素抗体能影响干扰素的疗效,对其检测可作为预测干扰素疗效的指标.
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Amplisensor PCR定量测定血清中乙型肝炎病毒核酸
我们用信号引物能量转移法(Amplisensor PCR)定量检测了乙型肝炎患者血清中HBV DNA,并与HBV血清标志物(HBV M)关系作一比较.
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不同血清学模式乙肝患者的血清病毒水平及其临床意义
目的:探讨乙肝患者的不同血清学模式与血清乙肝病毒核酸(HBV DNA)含量关系及其临床意义.方法:采用ELISA和定量PCR方法检测78例乙肝患者的血清乙肝病毒标志物(HBVM)和HBV DNA含量,并将HBV DNA含量和患者肝功能中的主要指标进行相关性分析.结果:78例乙肝患者的HBV DNA阳性率为83.3%(65/78),65例阳性患者的血清HBV DNA含量平均为5.78±1.12(对数值);慢性乙型肝炎和活动性乙型肝炎肝硬变患者的血清HBV DNA含量显著高于急性乙型肝炎患者(P<0.01);HBeAg或HBsAg阳性组的HBV DNA含量均显著高于HBeAg或HBsAg阴性组(P<0.01或P<0.05);在出现HBeAb血清转换组中,HBV DNA阳性率高达77.8%～78.6%;血清HBV DNA含量与血清谷丙转氨酶(ALT)水平无相关性(r=0.025,P>0.05),但与血清总胆红素水平呈正相关(r=0.303, P<0.05).结论:HBV慢性持续感染可能与病毒复制活跃及病毒变异等因素有关;慢性乙肝患者在出现HBeAb血清转换时,并不表示病毒复制停止,而只是病毒复制水平降低;乙肝患者的肝损害与HBV复制有一定关系.
