脐带血AC133+细胞体外扩增及生物学特性的研究

目的研究脐带血(UCB)AC133+细胞体外扩增及其生物学特性,动态观察AC133+细胞的免疫表型变化,以了解AC133+抗原与CD34抗原的关系.方法将从新鲜UCB标本中纯化的AC133+细胞接种于无血清无基质的悬浮体系,分别于培养0、7、10、14天检测扩增潜能、免疫表型和集落形成等指标.结果①自早期的AC133+CD34-、AC133+CD34+、CFC-HPP、CFU-GEMM、AC133+及CD34+细胞群至各系定向祖细胞等各阶段造血干/祖细胞(HSPC)均得到持续显著的扩增;②AC133+和CD34+细胞的比例随培养时间的延长而迅速降低,AC133+细胞在CD34+细胞中的比例亦明显下降(从99%降至50%),但同一时点AC133/CD34亚群比例均呈现出AC133+CD34-＜AC133+CD34+＜AC133-CD34+＜AC133-CD34-的趋势.结论我们建立的短期培养体系能够有效支持UCB各阶段HSPC的有效扩增;AC133是较CD34更为原始的HSPC抗原标记.

冻存时间对脐血造血细胞体外增殖潜能的影响

目的:研究冻存时间对脐血造血细胞增殖潜能的影响.方法:在所分离的脐血有核细胞中加入联合低温保护剂Dextran-40+10%DMSO,经梯度降温后置液氮深低温保存.采用无血清造血细胞扩增液对冻存不同时间的脐血造血细胞进行体外扩增,动态监测扩增潜能.结果:将冻存1个月、4个月脐血造血细胞体外扩增5周,其总有核细胞分别被扩增了(1499.0±115.6)倍和(1513.0±110.4)倍,FCs均于体外扩增的第3周达到高峰,分别扩增了(53.8±6.3)倍和(54.8±6.7)倍,D34+造血细胞于体外扩增的第2周均达到高峰,分别扩增了(63.8±6.1)倍和(62.4±5.7)倍;统计分析冻存1个月与4个月后造血细胞扩增结果,不存在显著性差异,>0.05.结论:在适宜深低温条件下冻存脐血造血细胞,在一定时间内,冻存时间的长短不会导致其增殖潜能下降.

妊娠合并再生障碍性贫血自体脐血移植1例

患者，27岁，孕1产0。因孕38周合并再生障碍性贫血(再障)见红4小时，伴腹坠，于2000年11月6日入院。1992年患者曾患再障，经治疗后好转。孕3个月查白细胞(WBC)2.0×109/L,血红蛋白(Hb)85 g/L,血小板(Plt)45×109/L。孕期服补血药。孕5个月始间断成分输血，共输异体脐血1 600 ml，红细胞(RBC)1 600 ml。入院查体：血压14.7/9.3 kPa(1 kPa=7.5 mmHg),贫血貌，腹围110 cm，宫高30 cm，胎心120次/min，右枕前位，头浮。双下肢水肿(＋＋)。肛查：宫颈管消失，宫口未开，骨盆未见异常。实验室检查：WBC 2.9×109/L，Hb 87 g/L，Plt 8×109/L。入院输新鲜血800 ml、RBC 400 ml后，WBC 2.9×109/L，Hb 90 g/L，Plt 30×109/L。2日后因胎儿宫内窘迫，在局麻下行剖宫术。术前输血小板16 U。娩一男活婴，体重3 200 g，评分8分。断脐后立即取脐带血150 ml,交叉配血后输入母体。术中出血200 ml,术后至出院共输血1 200 ml。术后1日检验：WBC 3.2×109/L，Hb 72 g/L，Plt 1.5×109/L。术后7日检验：WBC 1.9×109/L，Hb 74 g/L，Plt 7×109/L。腹部伤口拆线一期愈合。术后1个月进行随访，检验WBC 2.8×109/L，Hb 85 g/L，Plt 20.0×109/L。术后3个月复查，检验：WBC 3.0×109/L，Hb 98 g/L，Plt 2.3×109/L。手术后半年随访检验：WBC 3.0×10９／L,Hb 100 g/L,Plt 30.0×10９／L。

胎盘收集额外脐带血对脐带血总量及造血干细胞总数的影响

目的 探讨采用胎盘灌注方法从胎盘收集额外脐带血对脐带血总量及造血干细胞总数的影响.方法 收集21例新生婴儿胎盘中的脐带血,采用两步脐带血收集方法.(1)在取下胎盘前,常规收集脐带中的脐带血.(2)取下胎盘后,向脐静脉注入抗凝血剂,挤压胎盘将胎盘中血液收集到消毒血袋中.评估从胎盘中收集的脐带血对脐带血总量、有核细胞总数、单核细胞数的贡献.结果 两步脐带血收集方法对脐带血总量、有核细胞总数、单核细胞数的贡献:脐带血的收集总量范围为90.0～ 161.0ml,平均(126.1±26.6)ml;有核细胞总数为(1.58±0.72)×109个;单核细胞数为(0.878±0.320)× 109个.从胎盘中收集的21例脐带血的有核细胞数和单核细胞数分别占有核细胞总数和单核细胞总数的(51.00±9.87)％和(52.00±9.60)％.结论 用胎盘灌注方法从胎盘收集脐带血能增加脐带血总量,并具有造血干细胞和体外造血潜能.

可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体在间充质干细胞微环境中对脐带血粒-单系造血前体细胞分化的影响

目的 探讨在间充质干细胞(MSC)微环境中可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体(soluble M-CSF receptor,sMR)对脐带血造血前体细胞增殖和分化的影响.方法 实验组[单纯细胞因子组(CK组)+sMR组]以MSC为基质层细胞,建立基于MSC的造血细胞体外扩增体系,接种脐带血单个核细胞,培养体系中加入外源性造血生长因子SCF、F1t3L、TPO和IL-6,同时加入sMR,培养1、2、3、4周对扩增的细胞进行细胞计数、集落培养,对照组为无sMR的CK组.结果 ①培养3、4周,细胞数量迅速增加,对照组和实验组分别达108.47倍和120.67倍,细胞数量差异无统计学意义(P＞0.05).②随体外培养时间延长集落形成细胞(colony forming cell,CFC)增加,对照组和实验组培养3周时每1×105细胞CFC分别达38.1×103和54.1×103,4周对照组逐渐下降至18.1×103,但实验组仍持续增加至84.0×103;从第3周开始,实验组扩增CFC的能力明显高于对照组(P＜0.01).③红系CFC于扩增1周后迅速达到高峰,对照组和实验组每1×105细胞CFC分别为5891.2和5635.6,此后红系CFC数迅速下降,3周时为0,两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).④粒单系CFC在体外扩增过程中逐渐增加,对照组和实验组培养3周时每1×105细胞CFC分别达31.5×103和54.1×103;对照组从第4周开始出现回落(18.3×103),但实验组培养4周时仍持续增加(80.8×103).结论 sMR能抑制脐带血造血前体细胞在间充质干细胞微环境中扩增时出现的分化,其作用体现在粒单系,对红系无明显影响.

非血缘关系脐血造血干细胞移植治疗28例恶性血液病患者

山东省脐带血造血干细胞库自1999年12月至今,已冻存脐血8000份,并为临床移植提供脐血110份.现将2001年8月至2002年12月为28例恶性血液病患者提供脐血进行非血缘脐血移植(UCBT)的长期随访结果报告如下.

人胎盘和脐带血巨核系集落形成细胞的辐射敏感性

产妇血清和新生儿脐带血中总IgE与特应性皮炎的关系及过敏原检测

目的：探讨产妇血清和新生儿脐带血中总IgE与儿童特应性皮炎（AD）的相关性及过敏原检测的临床意义。方法选取2009—2011年建立的出生队列中诊断为AD的儿童35例（AD组），随机抽取未患AD的35例儿童作为对照（对照组），ELISA法分别检测儿童出生前产妇血清和新生儿脐带血中的总IgE水平，定量免疫印迹法检测血清特异性IgE水平。结果 AD组中母亲血清和新生儿脐带血总IgE阳性率高于对照组(χ2分别为16.568和14.933，均P<0.01)。AD组中母亲血清过敏原中尘螨，屋尘，豚草花粉，蒿类花粉，杨、柳及榆树花粉，霉菌，虾，海洋鱼类特异性IgE阳性率高于对照组（均P<0.05）；AD组患儿脐带血过敏原中蒿类花粉，霉菌IgE阳性率高于对照组（均P<0.05）。结论母亲血清总IgE升高可能会对婴儿后期罹患AD起预测作用，母亲的过敏状态与婴儿的过敏状态无明显一致性。

胎儿颅缝早闭症超声表现1例

孕妇39岁,孕32周,孕3产1.孕妇夫妻双方平素身体健康,无家族遗传病史.产前超声检查发现胎儿头颅形态不规则,呈三叶草型,探头加压可变形,颅内结构异常清晰,前额突出,双眼眼距增宽,外眶间距56 mm,内眶间距24 mm,鼻梁扁平,舌微向外突出,胸腔狭小,脊柱骨化较差,羊水大深度120mm.50 d后超声复查时发现胎儿左侧侧脑室宽18 mm,右侧侧脑室宽21 mm.超声诊断:胎儿头颅及面部特征符合颅缝早闭症,不排除染色体异常可能,脑积水,羊水过多.孕妇要求终止妊娠,引出一男婴,X线片提示狭颅症,尖头畸形,脐带血染色体核型分析未见异常.尸检证实系颅骨双侧冠状缝过早闭合.

母血及脐带血中胰岛素水平与胎儿宫内生长发育的关系及意义

目的：探讨母血及脐带血中胰岛素水平与胎儿宫内生长发育的关系及意义。方法选取来我院分娩的单胎妊娠且足月正常产妇及其新生儿各120例，在分娩前抽取母亲空腹静脉血5 ml，在分娩时立即抽取胎儿脐带血5 ml。根据新生儿体重不同分为（正常体重婴儿） AGA 组、（超重婴儿）LGA 组、（轻质体重婴儿）SGA 组，检测母血、脐带血中的胰岛素水平，再测算分析新生儿出生时体重、身长、体质指数、胎盘质量等指标。结果AGA 组脐带血中胰岛素含量低于 LGA 组（ P ＜0．01），高于 SGA 组（ P ＜0．01）；LGA 组脐带血中胰岛素含量高于 SGA组（ P ＜0．01）。三组母血中胰岛素含量差异无统计学意义（ P ＞0．05）。脐带血中胰岛素含量水平升高时，新生儿出生时体重、身长、体质指数、胎盘质量也会随之上升。结论脐带血中胰岛素水平与胎儿的生长发育关系密切，可以作为评价胎儿生长发育情况的关键指标之一。

脐带血干细胞移植的应用与研究进展

造血干细胞(HSC)在治疗白血病、恶性肿瘤、重症非恶性血液系统疾病以及某些遗传性疾病中有肯定的疗效,是某些白血病和恶性淋巴瘤的唯一根治手段[1].HSC移植包括异基因骨髓移植(Allo-BMT)、自体骨髓移植(Auto-BMT)、外周血干细胞移植(PBSCT)及脐带血(UCB)移植.但不论是异基因或自体骨髓移植,还是外周血干细胞移植,都存在一些不足,而UCB移植则可以弥补这些不足.1972年,Ende等首次报道1例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者进行小量血型相合的UCB输注后获得短期植入.尽管未广泛应用于临床,但为UCB移植奠定了一定的临床基础.1988年,法国医生Gluckman等[2]首先应用HLA相同的同胞UCB干细胞移植治疗范科尼(Fanconi)贫血患儿获得成功.近年来,很多学者对UCB干细胞移植进行了广泛的研究.UCB干细胞不仅可以替代骨髓HSC,甚至在一些方面更优于骨髓HSC而被临床所认可.本文就此作一综述.

不同胎龄足月新生儿25-羟基维生素D水平比较

25-羟基维生素D是维生素D在血循环中的主要存在形式,含量较多且稳定,可作为反应维生素D水平的指标[1].本研究采集本院出生的5598例足月新生儿脐带血,检测血清25-羟基维生素D水平,旨在了解不同胎龄足月新生儿维生素D的水平,为临床预防维生素D佝偻病提供实验依据.

脐血胆红素水平及排便干预对新生儿病理性黄疸的影响

目的 探讨脐血胆红素水平测定对新生儿病理性黄疸的预测及早期排便干预效果. 方法 选取河北省胸科医院和河北医科大学第二医院2012年6月—2014年6月出生的足月新生儿196例,分为观察组92例和对照组104例,观察组给予排便干预,对照组未给予排便干预. 观察病理性黄疸的发生情况及排便干预对病理性黄疸的效果. 结果 本组发生病理性黄疸79例(40. 31%). 发生病理性黄疸者脐血胆红素水平高于未发生病理性黄疸者.观察组病理性黄疸的发生率低于对照组(P<0. 05). 结论 脐血胆红素水平可有效预测高胆红素血症的发生风险,排便干预可降低病理性黄疸的发生率.

脐带血血清总胆红素检测在新生儿ABO溶血病早期诊治中的临床价值

目的:探究脐带血血清总胆红素检测在新生儿ABO溶血病早期诊治中的临床价值,为临床诊治提供经验和借鉴.方法:选取2015年10月至2017年10月我院320例母婴ABO血型不相符的新生儿作为研究样本,对新生儿ABO溶血三项指标进行检测,采用全自动生化分析仪对患儿脐带血血清总胆红素水平进行测定,进而分析脐带血血清总胆红素和母婴血型、黄疸出现时间及溶血三项试验结果的关系.结果:母婴O-A血型与母婴O-B血型在新生儿ABO溶血病发病率、高胆红素血症发生率、脐带血血清总胆红素、抗人球蛋白试验、放散试验上差异无统计学意义(P>0.05),而母婴O-A血型、母婴O-B血型在新生儿ABO溶血病发病率、脐带血血清总胆红素、放散试验、游离试验上明显高于母婴O-O血型,差异具有统计学意义(P<0.05).不同时间发生高胆红素血症在溶血三项试验上差异无统计学意义(P>0.05),而高胆红素血症日龄≤3d的新生儿的脐带血血清总胆红素明显高于高胆红素血症日龄大于3d的新生儿,差异具有统计学意义(P<0.05).抗人球蛋白试验阳性患儿的脐带血总胆红素明显高于抗人球蛋白试验阴性患儿,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在临床上对 ABO 血型不合的新生儿进行脐带血血清总胆红素及溶血三项检测在早期诊断和治疗新生儿 ABO 溶血病有着十分重要意义.

脐带血干细胞治疗脑梗塞后遗症近期疗效观察

目的:分析脐带血干细胞治疗脑梗塞后遗症近期疗效.方法:将62例脑梗塞后遗症患者分为研究组(30例)和对照组(32例),研究组给予脐带血干细胞治疗,对照组采用常规康复训练方法,比较两组治疗前后运动功能和肌张力改善情况.结果:研究组治疗后Fugl-Meyer评分从(52.2±17.6)升至(69.5±20.4),Ashworth评分从(2.4±1.2)降至(1.3±0.8);对照组治疗后Fugl-Meyer评分从(51.8±18.2)升至(58.2±20.5),Ashworth评分从(2.3±1.0)降至(1.5±1.0),组间差值比较差异显著(P＜0.05).结论在常规康复训练基础上联合脐带血干细胞治疗脑梗塞后遗症,效果更为理想,可有效改善患者运动功能和肌张力障碍,且安全性较高,值得在临床上加以推广.

脐带血中性粒细胞CD64指数检测在胎膜早破新生儿的应用

目的：探讨脐血中性粒细胞C D64指数在胎膜早破新生儿感染的早期诊断学意义。方法：将64例患儿分为病例组（胎膜早破组）32例、对照组（非胎膜早破）32例，对所有入选新生儿出生时在产房内即留取脐血，应用流式细胞技术测定中性粒细胞表面分子C D64的表达，并留取病例组新生儿外周血查血培养。结果：和对照组相比，胎膜早破新生儿C D64明显升高，且血培养阳性患儿CD64指数明显升高。结论：脐血中性粒细胞CD64指数对胎膜早破新生儿感染的早期诊断有明确提示意义。

移植有效地分离和冷冻保存脐带血中的造血干细胞

目的：探讨临床移植有效冷冻保存和分离造血干细胞方法。方法：采取普通、改进两种不同采血袋，采取两步离心法将脐带血的有核细胞分离、浓缩，采取常规程控降温进行冷冻，温度为-196℃的液氮之中，使用细胞培养法、流式细胞术对脐带血里C D34+细胞、造血组织分别进行检测。结果：使用改进采集方法分离，红细胞、有核细胞的回收率为86.6%、45.2%，普通采集袋中为78.5%、50.2%；可见其方法可有效提高红细胞、有核细胞回收率。结论：改进采集袋可有效将有核细胞的回收率提高。两步离心法、两种冷冻保存方法，可有效将保存脐带血的造血干细胞。

世界首例胎盘干细胞移植成功

解放军307医院宣布,经过16个月的术后观察,由全军造血干细胞研究所所长、该院造血干细胞移植科主任陈虎教授领衔的团队,率先开展的世界首例胎盘造血干细胞联合脐带血造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血获得成功.据主治医生扈江伟介绍,2013年12月30日,河北迁安一位9岁女童患再生障碍性贫血入院治疗.患者为重型再障,如果不采取移植治疗,将因反复出血、感染而导致死亡,结局和白血病患者一样.2014年3月14日,在征得患者父母同意后,307医院从女童新诞生的妹妹胎盘中提取造血干细胞联合脐带造血干细胞进行移植治疗,患儿康复出院.目前造血功能恢复正常,情况稳定.

脐带血——为孩子做一个生命的备份

我军专家成功移植世界首例胎盘干细胞

本刊讯(通讯员 鲁江 董夏)7月底,经过近16个月的术后观察,由解放军307医院陈虎团队率先开展的世界首例胎盘造血干细胞联合脐带血造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血,获得成功.据307医院主治医生扈江伟介绍,2013年12月30日,河北迁安市农村9岁女童王樱学因患再生障碍性贫血入院治疗.患儿病史已经长达5年,为重型再障,情况严重,如果不采取移植治疗,将因反复出血、感染而导致死亡,结局和白血病患者一样.2014年3月14日,在征得患儿父母同意后,307医院从女童新诞生的妹妹胎盘中提取造血干细胞联合脐带造血干细胞进行移植治疗,患儿康复出院.目前造血功能恢复正常,情况稳定.