逆转录病毒介导多药抗性基因转导脐带血CD34+细胞

利用基因转移技术,将mdr1基因转导造血干细胞,利用P170的泵出功能,可以保护干细胞免受细胞毒性药物的损伤.这种方案已得到美国FDA的认可进入临床实验阶段[1].我们将脐带血CD34+细胞作为基因转移的靶细胞,探讨体外基因转移的技术和程序.

来源于骨髓和脐带血的基质细胞基本特性的比较

目的比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性,为基质细胞的选择应用提供依据.方法用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞,以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区(CAFC),长期培养起始细胞(LTC-IC)为指标,比较两者的生长特性、成分及功能.结果①细胞生长特性:出现贴壁细胞时间,骨髓细胞为培养3d,脐带血细胞为培养5～6d;细胞融合成片时间,骨髓细胞为培养10～14d,脐带血细胞为培养12～18d;第21天细胞增殖数,骨髓比脐带血细胞增殖少;②细胞成分:21d培养后细胞成分,骨髓来源者以成纤维细胞为主,其次是巨噬细胞与内皮细胞,脂肪细胞少;脐带血细胞来源者,以巨噬细胞为主,其次是内皮细胞、成纤维细胞,偶见脂肪细胞;细胞化学与上述结果基本一致;细胞表面抗原检测,CD14、CD45的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞;③细胞功能:骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的CAFC和LTC-IC明显多.结论①生长特征:形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短,骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短;②细胞成分特性:骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主,脐带血来源者以巨噬细胞为主;③细胞功能特性:骨髓细胞形成的贴壁细胞较脐带血细胞形成的贴壁细胞更利于CAFC、LTC-IC生长.

产妇及新生儿的脐血钙、磷及碱性磷酸酶测定的临床意义

近年来有关测定脐血各项生化值有很多报道,我们对200例产妇及新生儿脐带血的钙、磷及碱性磷酸酶进行了测定,同一测定值在不同生理环境中有很大差异,报告如下.

新生儿脐动静脉血微量元素含量的配对分析

已有的研究多注重于孕妇与脐带血之间微量元素含量的关系,而对脐动、静脉血配对的微量元素含量研究较少.我们对32例新生儿脐动、静脉全血中Se、Zn、Cu、Fe 4种微量元素含量进行了配对分析,报告如下.对象与方法1.一般资料:选择32例经产道自然分娩的足月新生儿,1min阿氏评分为10分,出生体重2 900～4 000g(平均3 450g),身长46～52cm(平均50.5cm),男女比例为14∶18.生后1周内Hb均在正常范围.母亲年龄23～33岁(平均26岁),妊娠38～41周,无心、肾、肝等重要器官疾病,无妊娠高血压综合征和营养不良.孕期未补充微量元素药物.其中14例分娩前有轻度贫血(Hb 90～109g/L),其余18例Hb正常.

新生儿脐带血血气分析对三种分娩方式的评价

目的 探讨新生儿脐带血血气分析评价顺产、硬膜外自控镇痛(PECA)顺产及剖宫产分娩的意义.方法 回顾性分析2016年1月至2017年10月来本院分娩的120例产妇,根据临床查体及产妇意愿分为3组,即顺产组(n=40)、PECA顺产组(n=40)、剖宫产组(n=40).在胎儿娩出后,抽取脐带血予以血气分析,对比3组氢离子浓度指数(pH)、氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)、缓冲碱(BB)、碱剩余(BE)、乳酸(Lac).结果 顺产组pH、PO2、BE低于PECA顺产组、剖宫产组,PCO2、BB、Lac高于PECA顺产组、剖宫产组,差异有统计学意义(P<0.05).在pH、PO2、PCO2、BB、BE、Lac方面,PECA顺产组与剖宫产组比较,差异无统计学意义.结论 PECA顺产与剖宫产可降低胎儿酸中毒、缺氧风险,然而,因为剖宫产母婴并发症较为严重,所以,临床建议采用PECA顺产,以此确保母婴安全.

新生儿脐带血乙肝两对半模式的比较

目的 对乙肝表面为阳性抗原的母亲所产下的婴儿,采集其脐带血,并对其乙肝两对半进行检查,通过对新生儿感染乙肝的情况以及乙肝两对半所具有的模式的观察,来对母婴之间乙肝的垂直传播进行有效控制,以降低感染乙肝概率.方法 对标本进行离心,并将血清分离出来,采用酶联免疫的吸附试验,对乙肝两对半进行检查.结果 脐带血616例新生儿乙肝两对半有352例为阴性乙肝两对半,为总数的57.14％,264例新生儿能够检测出至少1项为阳性,为总数的42.86％,选取同期对血清标本的乙肝两对半进行检测的2 786例新生儿,将该研究中的乙肝两对半具体模式列表之后进行对比和匹配,采用x2检验,结果显示P＜0.01,差异有统计学意义.结论 新生儿脐带血以及临床中血清标本当中各自的乙肝两对半模式存在着显著差别.大大降低了新生儿的乙肝感染概率.

胎儿染色体产前诊断临床分析

目的 探讨胎儿染色体分析在产前诊断中的价值.方法 选取2010年1月―2015年8月在该医院进行胎儿染色体产前诊断的198例孕妇,对脐带血进行核型分析.结果 198例孕妇中染色体异常检出率为11.6%,其中染色体数目异常16例,染色体结构异常7例,脐带穿刺并发症发生率为2.5%.结论 对胎儿进行染色体分析在产前诊断中的意义重大,可以明显提高新生儿的健康质量,值得在临床上广泛应用.

上海等地叫停脐带血干细胞采集引发争议等

脐带血高敏肌钙蛋白T的研究

目的：建立新生儿脐带血高敏肌钙蛋白t参考范围上限。同时研究高敏肌钙蛋白t与出生时体重、性别、apgar评分、呼吸状态及分娩方式之间的关系。方法收集并检测了239名新生儿的脐带血高敏肌钙蛋白t水平。同时记录出生时孕周，出生时体重、性别、apgar 评分、呼吸状态与分娩方式。结果239份标本中，213例没有呼吸窘迫的新生儿数据被用来建立95%的可信范围上限，为0.050ng/ml。与健康新生儿相比，这些新生儿的脐带血高敏肌钙蛋白 t 水平显著升高， P <0.001。结论脐带血中高敏肌钙蛋白水平不受出生时孕周、出生时体重、新生儿性别或分娩方式影响。有呼吸窘迫的新生儿其脐带血高敏肌钙蛋白 t 水平显著提高，提示对新生儿心肌损伤来说，肌钙蛋白 t 可能是一个有用的标志物。

脐带源性和脐血源性间充质干细胞分离培养方法的比较

目的 建立分离培养人脐带间充质干细胞(UC MSCs)和脐带血间充质干细胞(UCB MSCs)的方法,并比较其效果.方法 无菌条件下采集健康足月新生儿脐带及脐血各30份,分别通过原代贴壁培养法、酶消化法培养UCMSCs,及淋巴细胞分离液法、羟乙基淀粉沉降与淋巴细胞分离两步分离法获得脐血中单个核细胞培养UCB MSCs.应用含10%胎牛血清的DME/F12培养基,比较UC MSCs和UCB MSCs分离培养的效果与生长形态.流式细胞术检测其表面标志及诱导分化鉴定其分化能力.结果 UC MSCs原代贴壁培养法8 d左右可见成纤维样细胞从组织块边缘爬出且成簇生长,酶消化法培养UC MSCs 5 d左右均匀生长;UCB MSCs分离培养用羟乙基淀粉沉降与淋巴细胞分离两步法得到的细胞数量较淋巴细胞分离法明显增多.两种来源MSCs培养方法相比较,UC MSCs原代培养的时间短,培养成功率明显增高.流式细胞仪检测两种来源的MSCs具有MSCs表面标志特征.定向诱导分化结果表明MSCs具有被诱导为成骨细胞、脂肪细胞的分化能力.结论 人脐带来源间充质干细胞原代培养周期短,培养效率更高;脐血间充质干细胞的分离方法中羟乙基淀粉沉降与淋巴细胞分离两步法效率更高.

脐带血间充质干细胞的研究进展

近年研究结果表明,除了造血干细胞外,脐带血中还存在与骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)相似的细胞群,这类细胞在特定诱导条件下可向多种组织细胞分化.由于脐带血具有资源丰富、采集简单且无损伤等优势,如果对脐带血MSC进行开发和应用,将能为组织工程提供新的种子细胞,对干细胞组织工程及其应用具有深远意义.现就目前相关研究做一综述.

间充质干细胞的免疫调节作用

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)起源于中胚层间充质,形成于发育中的骨髓腔,分布于骨髓、骨外膜、肌肉、滑膜、滑液、肝脏、外周血、脐带血以及脂肪等组织中.

脐带血干细胞移植治疗肝硬化的研究进展

肝硬化是一种常见病、疑难病,由多种原因引起,常见的是由慢性乙型肝炎、丙型肝炎、脂肪肝和酒精中毒发展而来.失代偿期肝硬化是各种肝纤维化疾病的终末期,平均存活时间仅为5～7年.干细胞移植已成为肝病治疗研究的热点,脐带血干细胞移植为肝硬化治疗开辟了一条新途径.该文就脐带血干细胞的特点、治疗肝硬化的理论基础、在肝硬化方面的应用、植入途径以及问题、展望等方面进行综述.

脐带血的研究现状及其临床应用进展

脐带血是胎儿娩出后残留在脐带和胎盘中的血液。新生儿脐带血中含有丰富的造血干细胞。近年来，随着医学理论及技术的日臻完善和成熟，脐带血的研究及临床应用也得到长足的发展。目前，脐带血作为公认的造血干细胞的重要来源之一，已被广泛应用于治疗儿童及成人的各种良、恶性血液系统疾病。

混合脐血干细胞移植的研究进展

自1988年Gluckman等[1]用脐血代替骨髓对1例小儿Franconi贫血患者进行抑制并重建其造血功能以来,脐带血移植(umbilical cord blood transplant,UCBT)已应用于数十种疾病的治疗[2-4].UCBT的成功率取决于输入脐血单个核细胞(MNC)的数量,对于人组织相容性白细胞抗原(HLA)相匹配的供者脐血MNC至少需2×107/kg以上,低于这一剂量,植入率降低,不足1×107/kg则难以植入[5,6].

脐带血检测在变态反应性疾病预防中的应用

目的：探讨脐带血检测在变应性疾病预防中的作用。方法选择2014年1~4月在首都医科大学附属北京同仁医院分娩的新生儿300例为研究对象,出生后随访42 d,根据是否发生新生儿皮疹将105例发生新生儿皮疹的新生儿作为过敏组,195例未发生新生儿皮疹的作为未过敏组。收集脐带血,检测脐带血中T淋巴细胞亚群及其相关细胞因子如白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)。分析变态反应性疾病与脐带血中T淋巴细胞亚群及其相关细胞因子的相关性。结果单因素分析结果显示,新生儿出生42 d是否发生过敏反应与母亲是否有过敏史、新生儿性别、母亲IgE、抑制T细胞(Ts)%、IL-4/CD4%、IFN/CD4%和Th1/Th2有关(P<0.05或P<0.01)；相关性分析结果显示,母亲IgE、总T淋巴细胞、Ts%、IL-4/CD4%、IFN/CD4%、Th1/Th2、喂养方式与生后42 d出现过敏具有相关性(P<0.05或P<0.01)。多因素回归分析结果显示,母亲有过敏史是危险因素,IFN/CD4、母乳喂养是保护因素(P<0.01)；IL-4/CD4、IFN/CD4之间ROC曲线下面积分别为0.589和0.433。结论发生变态反应性疾病的新生儿脐带血T淋巴细胞亚群及其相关细胞因子(IL-4、INF-γ、IL-10、IL-12)水平与未发生变态反应性疾病的新生儿存在差异。 IL-4/CD4的诊断准确性高于IFN/CD4。

剖宫产与顺产新生儿脐血血气分析结果的比较

目的：评价脐血分析在新生儿窒息评价中的应用价值。方法选择剖宫产术者104例，纳入剖宫产组，选择顺产者101例，纳入顺产组，对比脐动脉血血气分析结果。结果剖宫产术组 pH、PCO2、PE、HCT、HCO3-浓度高于顺产组，血红蛋白水平低于顺产组，差异具有统计学意义（P ＜0.05）。结论以脐动脉血指标评价新生儿窒息水平， pH 检测简便、快捷。

脐带血间质干细胞生物学特性研究

本文旨在探讨从人脐带静脉血是否可分离出基质干细胞,如果可以,确定它们的特性,方法是采用不支持造血干细胞生长的培养基培养脐血单个核细胞,对其生物学特性进行研究.1 资料与方法1.1 12份脐血采至厦门市中山医院,每份30～60 ml.1.2 基质细胞的分离与培养经新生儿父母同意,于厦门市中山医院采集正常足月新生儿脐带血12份,用L-DMEM培养液悬浮制备好的细胞,接种于25 cm2培养瓶中培养.细胞达到70%汇合时进行传代.

脐带帆状附着4例报告

脐带帆状附着是妊娠中脐带异常的一种,即脐带附着于胎膜上,脐带血管通过羊膜与绒毛膜间进入胎盘,对胎儿危害大,死亡率高.我院自2002年1月～2004年6月,共发现4例脐带帆状附着病例,现报告如下.

脐带血与新生儿外周血血型鉴定和抗体效价检测结果比较

目的：探讨脐带血替代新生儿外周血进行 A、B、O 血型及 Rh（D）血型鉴定及抗体效价的可行性。方法采用试管法及微柱凝胶技术对200例母体胎盘脐带血与新生儿外周血进行血型鉴定，用抗人球蛋白检测卡进行两者抗体效价的检测，并对两者结果进行比较分析。结果通过微柱凝胶技术能检测出的新生儿血及脐带血抗体152例（76.0%），AB 型RH 阳性30例（15.0%）；18例（9.0%）无法检测出相应抗体，不能排除因新生儿及脐带血中尚未产生抗体以及标本量太少而无法检测。132例标本采用反定型法检测显示脐带动静脉血和新生儿外周血抗体效价完全一致，20例脐带动静脉抗体效价与新生儿外周血抗体效价相近。结论脐带血可替代外周血进行A、B、O、Rh（D）血型的鉴定和抗体效价的检测。