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MHC-Ⅱ类分子与hTSH受体共表达系统的建立

田竹芳;雒文田;吴晓燕;朱本章

摘要: 目的:应用电击基因导入法,建立MHC-Ⅱ类分子与hTSHR共表达体系(hMl2),为GD发病机制的研究奠定基础.方法:采用电击基因导入法将质粒pCRTM3-hTSHR转染于M12细胞(H-2d),应用G418筛选出阳性细胞,经有限稀释获得单克隆细胞株.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测单克隆细胞内hTSHR胞外段mRNA的表达;用甲亢病人血清粗提IgG及bTSH刺激后测定上清中cAMP值以检测单克隆细胞株表达的hTSHR是否具有天然hTSHR功能.结果:应用有限稀释法获得14株单克隆细胞.RT-PCR结果显示:3号、5号、6号、8号、11号细胞内有高水平的hTSHR胞外段mRNA的转录.应用甲亢病人血清粗提IgG及bTSH刺激后,6号、8号细胞上清中cAMP值明显升高,与对照组之间存在显著差别(P<0.05).结论:应用电击基因导入法成功地建立了MHC-Ⅱ类分子与hTSH受体共表达体系.

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