山东大学学报（医学版）杂志
Journal of Shandong University (Health Science) 산동대학학보（의학판）
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MTHFR基因A1298C多态性与神经管畸形的关系
目的:分析神经管畸形患儿核心家庭MTHFR基因第1298位点的多态性分布,探讨其与神经管畸形发生的关系.方法:应用PCR扩增技术,其扩增产物经限制性核酸内切酶MboⅡ消化后,进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析MTHFR基因第1298位核苷酸基因型的分布情况.结果:26个核心家庭中(78个成员)未发现突变纯合型.经x2检验,患儿及其母亲基因型构成与对照组比较,差异均无统计学意义(分别为P＞0.30,P＞0.90).患儿父亲杂合突变型低于正常对照(P＞0.05).等位基因频率比较采用u检验,患儿与对照间差异无统计学意义(P＞0.50),患儿父母均高于正常对照(P＞0.01).结论:MTHFR基因A1298C多态性与神经管畸形发生无直接关系.
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GraVes眼病炎性活动期与静止期血清sICAM-1水平的研究
目的:研究可溶性细胞间粘附因子-1(sICAM-1)在Graves眼病(GO)炎性活动期与静止期的水平差异及其与各项甲状腺功能指标的关系.方法:将GO炎性活动期与静止期患者,Graves病(GD)无眼病患者及正常对照,分为A、B、C、D四组,抽取空腹静脉全血,测血清sICAM-1,各组间进行比较.并分析各组sICAM-1与FT3、FT4、TG、TM的相关关系.结果:①A、B、C组患者血清sICAM-1均明显高于正常对照组(P＜0.05).A组患者sICAM-1水平高,与B组及C组患者相比有统计学差异(P＜0.01);②前三组各组内sICAM-1与FT3、FT4成直线相关关系,与TG、TM成直线相关关系;③GO炎性活动期患者sICAM-1与GO评分成正相关.结论:血清sICAM-1水平可作为反映GO活动性评判的免疫指标,长期监测sICAM-1可预示GD进展为临床活动性眼病的可能性.
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阿奇霉素固态类脂纳米粒的制备及其体外释药特性的研究
目的:以硬脂酸为载体材料制备阿奇霉素固态类脂纳米粒(AZM-sLN),并考察其体外释药特性.方法:采用乳化蒸发-低温固化法制备AZM-SLN;并对其形态、粒径、包封率、结构和质量、体外释药特性等进行研究.结果:得到的硬脂酸固态类脂纳米粒为类球形实体,粒径分布比较均匀,平均粒径dav=(17.75±5.00)nm;三批载药纳米粒的包封率为(81.57±1.33)%;体外释药符合Higuchi方程;用DSC分析证明纳米粒确已形成.结论:硬脂酸纳米粒有可能成为一种新型药物载体.
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组织多普勒技术定量分析肥厚型心肌病患者左心室局部与整体舒缩功能
目的:应用多普勒组织成像技术(DTI)评价肥厚型心肌病患者(HCM)左心室局部与整体舒缩功能.方法:采用DTI技术测量HCM患者室间隔和左心室侧壁中段以及二尖瓣瓣环-室间隔和二尖瓣瓣环-侧壁交界处的收缩期、舒张早期和舒张晚期DTI速度峰值(Sm1～4Em1～4、Am1～4),并与正常组进行比较.结果:HCM患者室间隔和侧壁中段以及二尖瓣瓣环-室间隔和二尖瓣瓣环-侧壁交界处收缩期Sm1～4与正常组相比无显著差异,但舒张早期Em1～4明显低于正常,舒张晚期Am1～4明显高于正常,Em1～4/Am1～4明显减低;在正常人中,Em1/Am1和Em2/Am2无显著性差异(P＞0.05),但HCM患者Em1/Am1明显低于Em2/Am2(P＜0.05),且该组患者室间隔厚度明显大于侧壁厚度[(2.36±0.50)cm vs(1.20±0.23)cm,P＜0.05].结论:DTI技术测量的室壁运动速度可早期而准确反映HCM患者左心室舒缩功能的变化,为左心室舒缩功能的评价提供了一种新的方法.
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风湿性心脏病并发房颤患者在围手术期中的复律研究
目的:探讨风湿性心脏瓣膜病并发房颤患者围手术期电击结合口服胺碘酮在复律中的应用价值.方法:围手术期口服胺碘酮,术中瓣膜置换后,根据心脏自动复跳情况采用电击复律.结果:关胸后、术后3 d、10d、3个月分别有93.3%、80.0%、73.3%、66.7%的患者维持窦性心律.结论:该方法复律安全、效果好,可提高房颤的转复率,减少术后复发率.
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乙醇慢性摄入对大鼠肝组织细胞因子TGF-β、TNF-α mRNA表达的影响
目的:观察乙醇慢性摄入对大鼠肝组织细胞因子TGF-β、TNF-αmRNA表达的影响.方法:选用30只体重(200±20)g的Wistar雄性大鼠,随机分为3组(每组10只),对照组为清水+普通饮食(A组),实验组为:①20%酒精饮料+普通饮食(B组);②20%酒精饮料+高脂饮食(C组).饲养3个月全部处死,分别进行血清酶学、血脂、组织病理学及细胞因子基因学测定.结果:A组无异常,B、C组均出现血脂升高及病理学变化,同时C组出现酶学变化,B、C组肝组织TGF-β、TNF-αmRNA表达水平增高.结论:乙醇慢性摄入上调大鼠肝组织细胞因子TGF-β、TNF-αmRNA的表达.
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促性腺激素释放激素用量对体外受精-胚胎移植影响的探讨
目的:探讨达必佳不同用量对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo trans-fer,IVF-ET)的影响.方法:将准备长方案促排卵行IVF-ET的214例患者随机分为2组,Ⅰ组每天肌肉注射达必佳0.1 mg,Ⅱ组每天肌肉注射达必佳0.05 mg,观察两组中促性腺激素用量情况、HCG日子宫内膜厚度、激素水平、获卵数、受精数和妊娠率.结果:Ⅰ组与Ⅱ组患者年龄、不孕年限、注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日子宫内膜厚度、激素水平、受精率、妊娠率无统计学意义,但Ⅱ组促性腺激素用量少,获卵数多.结论:达必佳减量后仍然可以达到充分的垂体抑制,减少促性腺激素的用量,不影响IVF-ET的成功率.
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霉酚酸酯与环磷酰胺治疗Ⅳ型狼疮性肾炎的疗效比较
目的:比较霉酚酸酯(MMF)与环磷酰胺(CTX)静脉冲击疗法治疗Ⅳ型狼疮性肾炎(LN)的近期疗效及对肾脏病理改变的影响.方法:28例患者均经临床和肾活检确诊为Ⅳ型LN,随机分为2组,MMF治疗组用糖皮质激素联合MMF(1.0～1.5 g·d-1)治疗;CTX组用糖皮质激素联合CTX治疗.结果:治疗12个月时MMF组蛋白尿及血尿下降程度大于CTX组.尿蛋白下降和尿红细胞减少超过基础值50%者,MMF组分别为78.6%和92.9%,CTX组分别为42.9%和57.1%.MMF组降低ANA及ds-DNA抗体的作用优于CTX组.治疗4～7个月时重复肾活检显示,MMF治疗组肾组织学活动性指数(AI)下降程度大于CTX组,MMF治疗组AI由16.9±6.4降至3.5±1.6,CTX组AI由15.2±3.8降至6.4±1.2.MMF组感染并发症发生率低于CTX组.结论:激素联合MMF控制Ⅳ型LN的疗效优于CTX且副反应低.
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小鼠轮状病毒EW株VP7基因的克隆及其在重组腺病毒中的表达
目的:构建表达小鼠轮状病毒(EDIM)EW株VP7基因的重组腺病毒,以在小鼠模型上研究轮状病毒的免疫保护机制.方法:用RT-PCR方法扩增EDIM VP7全长cDNA并进行基因序列分析,将所得的VP7基因片段插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,获得重组质粒pShuttleCMV-EVP7,将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183获得重组腺病毒质粒pAdCMV-EVP7,将该质粒线性化后转染293细胞包装重组腺病毒rvAdEVP7.以rvAdEVP7胛感染293细胞,并分别应用电子显微镜、PCR、RT-PCR和Western blot等方法观察rvAdEVP7的形态、VP7基因整合、遗传稳定性、VP7基因在细胞内转录及表达等有关生物学特性.结果:获得了小鼠轮状病毒的全长cDNA,重组腺病毒rvAdEVP7具有典型的腺病毒形态,PCR、RT-PCR和Western blot等分子生物学方法分析显示:rvAdEVP7中确有特异性的VP7基因稳定整合;有较好的遗传稳定性;感染293细胞后能有效转录;可表达轮状病毒主要结构蛋白VP7.结论:成功构建含VP7基因的重组腺病毒rvAdEVP7,为进一步研究轮状病毒的免疫保护机制打下了基础.
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大鼠骨髓间充质干细胞体外分化为神经元样细胞的研究
目的:研究大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)体外扩增不同诱导剂向神经元样细胞诱导分化的潜能.方法:采用贴壁筛选法分离Wistar大鼠股骨rMSCs,体外扩增5～10代后,分别用2-巯基乙醇、硫代甘油等无血清的DMEM培养液诱导hMSCs分化为神经元.用流式细胞仪鉴定rMSCs特异抗原表达,免疫组化鉴定诱导后神经元样细胞的神经元烯醇化酶(NSH)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP).结果:大鼠MSCs体外扩增传至5代后,流式细胞仪显示rMSCs CD27、CD44、CD90呈阳性表达;将rMSC加入2-巯基乙醇和硫代甘油等诱导剂3 h后,rMSC胞体收缩,突起伸出;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF表达阳性,GFAP阴性.结论:大鼠骨髓间充质干细胞在体外一定条件下可以分化为神经元样细胞.
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滤泡状甲状腺癌转移灶131Ⅰ的代谢速率
目的:研究治疗剂量条件下,滤泡状甲状腺癌转移灶的131Ⅰ代谢规律.方法:采用γ照相机对滤泡状甲状腺癌患者癌转移灶行1～8 d、16 d、24 d的图像采集,观察转移灶内每个象素放射性计数随时间变化的规律,并通过曲线拟合求解代谢参数.结果:滤泡状甲状腺癌转移灶131Ⅰ代谢均呈单指数代谢规律.分化型滤泡状甲状腺癌不同部位的骨转移灶代谢速率相近;不同器官(肺、骨)的转移灶代谢速率有差异,骨转移灶快于肺转移灶.低分化的滤泡状甲状腺癌转移灶131Ⅰ代谢速率快,主要表现为生物代谢.结论:转移灶的131Ⅰ代谢速率能够反映病灶的生物学特性,是定量研究甲状腺癌转移灶较好的指标;也可作为病灶治疗疗效的参考指标.
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肝硬化患者血浆转化因子TGF-β1测定的意义
目的:探讨肝硬化患者血浆转化因子β1(TGF-β1)的变化及其意义.方法:经病史、临床生化、B超检查确诊的72例乙肝后肝硬化患者,依据child-pugh分级分为3级,其中A级23例,B级29例,C级20例.健康志愿献血者6例做为正常对照组.ELISA法测定血浆TGF-β1的变化.并同时检测血透明质酸酶(HA)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、血浆白蛋白、凝血酶原时间及其活动度、胆红素改变.结果:随着肝硬化的进展,血浆TGF-β1、血HA、CⅣ、PCⅢ逐渐增加.child B、child C级患者血浆TGF-β1与血HA、PCⅢ均明显增加.血浆TGF-β1与血HA呈正相关(child B组r=0.51,P＜0.01;child C组r=0.67,P＜0.01),与血PCⅢ呈正相关(child B组r=0.63,P＜0.05;child C组r=0.74,P＜0.01).结论:血浆TGF-β1可反映肝纤维化程度,联合HA、PCⅢ检测可用作肝硬化诊断、追踪观察的有意义指标.
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肺动脉高压检测对甲亢性心脏病的早期诊断价值
目的:探讨肺动脉高压对甲状腺功能亢进(甲亢)性心脏病的早期诊断价值.方法:应用彩色多普勒超声诊断技术评价了75例甲亢患者的肺动脉压,其中单纯甲亢患者34例,甲亢性心脏病(甲亢心)患者41例,92例为健康对照组.用放射免疫法测定了所有受试者治疗前后的甲状腺功能、血浆内皮素(ET1)、血管紧张素Ⅰ(A1)及血管紧张素Ⅱ(A2)的含量.结果:34例甲亢组患者检出肺动脉高压12例(32.4%),41例甲亢心患者检出肺动脉高压39例(94.5%)(P＜0.05).单纯甲亢组中12例肺动脉高压患者有4例在2～6月之内发生了心房颤动.甲亢患者血浆中ET1、A1及A2水平显著高于对照组(P＜0.01).结论:用彩色多普勒超声诊断技术检出的肺动脉高压,是甲亢心的早期诊断指标,其敏感度为81%,特异度为92.59%,阳性预测值为96.23%,阴性预测值为67.57%.是一个实用的无创早期诊断方法.肾素-血管紧张素-醛固酮系统被激活可能参与了肺动脉高压的形成过程.
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SARS冠状病毒M基因片断在大肠杆菌中表达及其抗原性的研究
目的:获得纯的重组SARSCoV M蛋白,并初步测定重组蛋白的抗原性.方法:软件分析SARSCoV M蛋白富含免疫表位的片断,体外合成编码SARSCoV M蛋白15-170aa序列的DNA片段,利用DNA重组技术,将该合成DNA克隆至表达载体pGEX-5X-1,构建重组质粒pGEX-SARSCoV M.在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-SARSCoV M重组融合蛋白,分离纯化GST-SARSCoV M蛋白,利用纯化蛋白作为抗原,建立ELISA试验检测抗SARSCoV M抗体.结果:GST-SARSCoV M蛋白分子量为43kD,纯化的GST-SARSCoV M蛋白作为抗原检测血清中SARSCoV M抗体,53例正常成人献血者血清未检出SARSCoV M抗体.结论:SARSCoV M蛋白表达成功,在健康人血清中未检出SARSCoV M抗体.
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米非司酮对人卵巢癌3AO细胞体外增殖和性激素受体ER、PR的影响
目的:研究米非司酮对人卵巢上皮癌细胞株3AO体外增殖和性激素受体ER、PR表达的影响.方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢上皮癌细胞株3AO体外增殖活性,以流式细胞间接荧光技术检测肿瘤细胞ER、PR蛋白表达率.结果:米非司酮以剂量和时间依赖方式抑制3AO细胞体外增殖活性,3AO细胞在不同浓度米非司酮(5、10、20、40、80μmol/L)和不同时间(24、48、72、96、120h)培养下,生长抑制率从1.7%增加至85.2%(P＜0.05),米非司酮和地塞米松联合应用与相同浓度的米非司酮单独应用比较,细胞增殖抑制率差异无统计学意义(P＞0.05).米非司酮浓度为10μmol/L,培养48 h,3AO细胞PR表达率为(12.7±1.4)%,明显低于对照组(44.9±1.4)%,(P＞0.01);3AO细胞ER表达率为(55.1±1.7)%,与米非司酮组ER表达率(52.3±0.8)%比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:米非司酮以剂量-时间依赖方式抑制人卵巢上皮癌3AO细胞体外增殖活性,其对3AO细胞的抑制作用与PR变化相关.
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碳酸氢钠等治疗小鼠经口河豚毒素中毒的效果观察
目的:探讨碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风对小鼠河豚毒素经口中毒的拮抗作用.方法:用小鼠死亡时间和死亡率评价碳酸氢钠等化合物拮抗河豚毒素效果.结果:碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风可使小鼠50%～100%存活(P＜0.01).氢氧化钠拮抗效果比碳酸氢钠、活性炭和中药防风明显.中药与氢氧化钠、中药与碳酸氢钠、氢氧化钠与碳酸氢钠混合后,小鼠存活率均低于单独使用.结论:碳酸氢钠、氢氧化钠、活性炭和中药防风对小鼠河豚毒素经口中毒均有明显的拮抗作用.混合使用不如单独使用拮抗效果明显.
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颅脑手术后发生颅内感染的危险因素探讨
目的:探讨颅脑手术后发生颅内感染(intracranial infections,ICI)的危险因素及预防措施.方法:回顾性分析1994年1月至2002年12月我科4 877例颅脑手术患者临床资料.结果:术后发生颅内感染141例,感染率2.89%.术后有脑脊液漏、刀口皮下积液及术后急症再次手术者,术后颅内感染的发生率分别为35.34%、24.60%及15.78%,明显高于平均感染率(P＜0.05);有颅脑手术史者术后ICI发生率为5.10%,幕下手术后为6.40%,手术时间4～8 h为4.40%,8 h以上为7.09%,术前使用糖皮质激素者为4.80%.结论:术后脑脊液漏、局部皮下积液及急症再次手术是术后ICI发生的危险因素.
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牙科全瓷修复材料-GC陶瓷的肌肉埋植实验研究
目的:进一步检验GC牙科全瓷材料的生物相容性.方法:选用兔龄3个月左右,体重2～3kg纯种新西兰大白兔8只,进行肌肉埋植实验.结果:实验动物均未出现局部及全身不良反应.组织学观察与阴性对照无显著性差异.结论:GC牙科全瓷材料有良好的组织相容性.
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职业性铅接触与尿绒毛膜酶活性的关系
目的:探讨铅接触者尿绒毛膜酶活性的变化及其意义.方法:对147例铅作业工人采用免疫吸附比色法测定尿绒毛膜酶(LAP、ALP)活性.结果:铅接触者尿绒毛膜酶活性增加[LAP(16.16±3.18)μg/L、ALP(30.83±4.91)μg/L],且随接触时间延长而升高,铅接触史≥5年者尿绒毛膜酶活性[LAP(18.94±5.22)、ALP(33.45±5.13)μg/L]较铅接触史＜5年者[LAP(14.12±2.76)、ALP(28.6±3.82)μg/L]为高(P＜0.05).结论:尿绒毛膜酶活性升高是铅致早期肾损害的敏感指标.
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沙土鼠全脑缺血再灌流时不同脑区聚胺代谢变化的动态观察
目的:观察全脑缺血后再灌流时不同脑区聚胺代谢动态变化,并探讨其临床意义.方法:采用高效液相色谱法检测脑缺血再灌流后海马、脑皮质及脑白质中腐胺(Puc)、精脒(Spd)和精胺(Spm)的水平.结果:脑缺血再灌流1 h Puc水平明显升高,1 d时达峰浓度,3 d仍维持较高水平.Spd水平随再灌流的时间延长逐渐降低.缺血再灌流1 h Spm水平轻微升高,2h达峰水平,3d后恢复正常.结论:全脑缺血再灌流后存在聚胺水平异常变化,其中Puc水平变化是反映缺血性脑损伤严重程度的理想生化指标.
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增殖细胞核抗原在上颌窦鳞状细胞癌的表达
目的:探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuc1ear antigen,PCNA)在上颌窦鳞癌中的表达及其与上颌窦鳞癌发生发展的关系.方法:应用免疫组化SABC法检测了35例上颌窦鳞癌和15例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的PCNA表达.结果:PCNA染色阳性细胞为细胞核染色.PCNA指数上颌窦鳞癌为86.94±9.83,鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤为46.14±2.66,二者差异有统计学意义(P＜0.001).随上颌窦鳞癌的分化程度的降低,PCNA指数增加,不同分化间PCNA指数差异有统计学意义(均为P＜0.05).结论:PCNA的表达与上颌窦鳞癌的发生及分化程度相关.
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连续性肾脏替代疗法联用贺斯临床疗效观察
目的:探讨连续性肾脏替代疗法联合应用贺斯在心肺复苏术后发生肾前性肾功能衰竭及部分水肿合并胸腔积液的危重病人中的应用价值;方法:25例心肺复苏术后发生肾前性肾功能衰竭和24例水肿合并胸腔积液的危重病人接受连续性肾脏替代疗法,前稀释法输入置换液,治疗过程中联合应用贺斯,观察治疗前后心率、血压、生化指标、肾功能、升压药用量、临床症状体征及胸片的变化,观察上述治疗方案的临床疗效;结果:心肺复苏组25例患者平均治疗(45.2±8.7)小时,经治疗后尿素氮、肌酐、血清钾水平明显下降,差异有显著性(P＜0.05).治疗前后心率、血压变化不明显,多巴胺用量下降(P＜0.05).低蛋白血症组24例患者平均治疗(24.7±6.9)小时,治疗前后心率、血压、生化指标变化不明显,治疗后临床症状明显改善,复查胸片胸水减少,有效率100%;结论:危重患者应用连续性肾脏替代疗法联用贺斯可以有效改善血流动力学,促进肾功能恢复,纠正高血钾;同时能清除患者体内多余的水分,不会导致生化指标的异常.
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葛根汤颗粒喷雾干燥工艺条件试验研究
目的:优选葛根汤颗粒喷雾干燥的佳工艺条件.方法:应用正交设计法,以每小时药粉产率及有效成分含量为考察指标,对影响葛根汤喷雾干燥过程的因素进行考察.结果:正交试验法设计的三个因素中,浸膏的相对密度影响显著,入塔风温影响较显著.结论:颗粒佳工艺条件为:入塔风温:170℃,气流量:700L/h,浸膏相对密度:1.22,在此条件下,葛根汤颗粒有效成分中葛根素及芍药苷的含量明显高于原湿法制粒制剂.
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急性心肌梗死患者PAI-1、sVCAM-1及hsCRP水平与溶栓抵抗的关系
目的:寻找急性心肌梗死(AMI)患者出现溶栓抵抗的预测因子.方法:将68例急性心肌梗死患者分为溶栓再通组和溶栓未通组,比较两组患者溶栓前的纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)及超敏C-反应蛋白(hsCRP)水平的不同.结果:溶栓未通组PAI-1、sV-CAM-1水平均显著高于再通组,P＜0.05;溶栓未通组和再通组hsCRP水平差异无统计学意义,P＞0.05.结论:PAI-1、sVCAM-1有可能成为溶栓抵抗的预测指标.
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人早孕绒毛膜匀浆和脐静脉内皮细胞对早期鼠胚体外发育的影响
目的:观察人早孕绒毛膜匀浆(UPHC)和人脐静脉内皮细胞(ECHUV)对早期鼠胚体外发育的影响.方法:观察早期鼠胚在UPHC培养液及ECHUV联合培养液中的发育情况;用ELISA法检测两培养系统上清液中表皮生长因子(EGF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和血管内皮生长因子(VEGF)的含量.结果:在UPHC培养系统和ECHUV联合培养系统中,早期鼠胚的桑葚胚形成率分别为79.5%和81.2%,囊胚形成率分别为60.2%和61.2%,囊胚孵出率分别为41.0%和42.1%,均明显高于对照组(P＜0.05).早期鼠胚A和B级桑葚胚形成率,在UPHC培养系统中分别为45.2%和32.3%,在ECHUV培养系统中分别为44.6%和27.7%,均显著高于对照组(P＜0.05).UPHC培养系统和ECHUV联合培养系统中,EGF的浓度分别为(52.65±7.37)pg/ml和(58.14±3.03)pg/ml;GM-CSF的浓度分别为(11.81±3.76)pg/ml和(9.20±2.59)pg/ml;VEGF的浓度分别为(61.43±11.38)pg/ml和(256.54±9.15)pg/ml,均显著高于对照组(P＜0.05);ECHUV培养系统的VEGF浓度又显著高于UPHC培养系统(P＜0.01).结论:UPHC和ECHUV培养系统促进早期鼠胚体外发育,提高桑葚胚和囊胚形成率、囊胚孵出率和胚胎质量,其作用与EGF、GM-CSF及VEGF有关.
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人源化BPVL1-GFP融合基因的构建以及在哺乳动物细胞中的瞬时表达
目的:构建牛乳头瘤病毒晚期基因L1-GFP融合基因真核表达质粒,自细胞水平探讨优化密码对晚期基因L1蛋白瞬时表达的影响.方法:用PCR方法扩增获得优化密码人源化BPVL1(hL1)基因.TA克隆后,酶切释放hL1基因,定向插入质粒pET30a/NM-GFP的BamHI、SacII位点,获得正确框架的hL1-GFP融合基因.再用BamHI、NotI酶切释放hL1-GFP融合基因,与pcDNA3载体定向重组构建真核表达质粒pcDNA3/hL1-GFP.同法克隆获得含野生型BPVL1-GFP融合基因的表达质粒pcDNA3/wL1-GFP.用质粒DNA分别在体外转染哺乳动物细胞COS-1细胞和Wish细胞,荧光显微镜下观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况.结果:酶切鉴定表明成功构建了含wL1-GFP、hLI-GFP的真核表达载体,与pcDNA3/wL1-GFP相比,pcDNA3/kL1-GFP在COS-1细胞、WISH细胞中获得有效表达.结论:优化密码能提高乳头瘤病毒L1基因在哺乳动物细胞内的蛋白表达.
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照射脾脏治疗小儿难治性原发血小板减少性紫癜(附15例临床报告)
目的:探讨脾脏放射治疗小儿难治性原发血小板减少性紫癜(RITP)的临床应用价值.方法:采用直线加速器的高能X线对患者脾脏进行放射治疗,放疗前后观察外周血血小板的数量,临床症状及体征.统计学采用配对计量资料t检验.结果:放疗后血小板数量较放疗前显著增加(P＜0.001),临床症状及体征明显好转.放疗结束2月后临床评价,有效率86.7%.1年后复查,有效率66.7%.3年后随诊,有效率60%.未发现与放射治疗有关的并发症.结论:采用脾脏照射是治疗小儿难治性原发性血小板减少性紫癜安全有效的方法,且可避免脾脏切除.
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缺血预处理的次数对兔缺血心肌电生理活动的影响
目的:观察缺血预处理(IPC)的次数对缺血-再灌流过程中兔心脏电生理活动的影响,探讨IPC的抗心律失常作用机制.方法:家兔24只,随机分为对照组(C)、缺血组(IR)、一次预处理组(SPC)和两次预处理组(BPC).应用心外膜单相动作电位(MAP)探针记录技术检测缺血-再灌流过程中MAP幅度(MAPA)、复极50%时程(MAPD5o)、零相大上升速度(Vmax)及心律失常发生率.结果:各预处理组中缺血后5 min时的MAPD5o、MAPA、Vmax迅速缩短或降低(P＜0.05).SPC组与IR组相比,促进了缺血20min之后MAPA、Vmax的恢复,改善了缺血20 min MAPD50的过度缩短,限制了复灌时MAPD50的过度延长(P＜0.05).SPC完全抑制了缺血-再灌中室颤的发生率(0%,P＜0.05).BPC组中,缺血-再灌注中室颤发生率及在缺血30 min末及再灌注末上述参数与缺血组比较均无显著差异.结论:①SPC在在体家兔心脏上具有好的抗心律失常作用,随IPC次数增加,其抗心律失常作并不增强;②缺血早期sPC迅速缩短MAPD,抗早期心律失常的机制可能是缩小了造成单向阻滞的窗口;③改善缺血晚期电生理参数,抗晚期心律失常的机制可能是减小不应期离散度;④限制复灌时MAPD过度延长,抗再灌注心律失常可能与减少内向离子流及触发活性有关.
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葡萄籽原花青素抗兔动脉粥样硬化形成的实验研究
目的:观察葡萄籽原花青素(GSPE)对兔动脉粥样硬化(AS)形成的影响并探讨其作用机制.方法:30只雄性新西兰兔随机分为正常对照(A)组、高脂模型(B)组、GSPE(C)组,分别饲喂:标准、标准+1%胆固醇、标准+1%胆固醇+1%GSPE的颗粒饲料.于实验前1天和实验第1、2、4、8、12周末取空腹血,检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)和血浆氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL).12周末动物取血后处死,取主动脉作病理形态学观察.所有数据经SAS 8.2混合模型方差分析.结果:与高脂模型组相比,GSPE能显著降低血清TC(P＜0.0001)、LDL-C(P＜0.0001)、TG(P＜0.0001)、TG/HDL(P＜0.0001),升高HDL-C(P＜0.05);GSPE能显著降低血清MDA、血浆ox-LDL(P＜0.0001);病理分析显示GSPE组兔主动脉壁厚度和泡沫细胞数量较高脂模型组明显减轻、减少(P＜0.01).结论:GSPE具有预防AS的作用,该作用的发挥与其能调节血脂、抗LDL氧化修饰有关,并能改善胰岛素抵抗.
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肾上腺皮质激素对心肌炎小鼠肌钙蛋白Ⅰ的影响
目的:研究肾上腺皮质激素治疗病毒性心肌炎时血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)的变化.方法:对不同时期应用激素治疗的心肌炎小鼠采用化学发光法检测血清cTnI水平,并同正常对照组及病毒对照组比较,同时与心肌病理积分进行相关分析.结果:病毒性心肌炎小鼠血清cTnI显著升高,并与病理变化呈直线正相关(r=O.70).病毒性心肌炎早期和中期使用肾上腺皮质激素可明显降低cTnI水平,中期使用肾上腺皮质激素疗效尤为明显.结论:中期应用激素治疗CVB3心肌炎小鼠可明显阻止炎细胞浸润心脏组织,降低血清cTnI水平,保护心肌细胞,控制心肌炎病情发展,改善预后.
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低温洗涤红细胞肺保护液对体外循环术后肺保护作用的研究
目的:探讨体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)术中采用低温洗涤红细胞肺保护液实施肺动脉灌注对肺的保护效果.方法:随机选取20例风湿性单纯二尖瓣病变合并中度肺动脉高压的患者,分为肺动脉灌注组和对照组(每组各10例).灌注组在主动脉阻断后,经肺动脉根部间断灌注低温洗涤红细胞肺保护液,测定两组患者围术期的机械通气时间、肺血管阻力、白细胞比值(静脉血/动脉血)、肺循环血浆MDA含量.结果:体外循环术后灌注组机械通气时间显著低于对照组(P＜0.05);各时点肺血管阻力、白细胞比值(静脉血/动脉血)、肺循环血浆MDA含量均显著低于对照组(P＜0.01).结论:低温洗涤红细胞肺保护液肺动脉灌注对体外循环术后肺损伤有明显的保护作用.
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人嗅粘膜内细胞色素P450 2A6的发育表达
目的:探讨细胞色素P450 2A6(cytochromeP450 2A6,CYP2A6)在不同胎龄胎儿嗅粘膜内的发育表达.方法:应用免疫组化法观察CYP2A6在胚胎发育16、18、22、28和38周胎儿嗅粘膜内的表达情况.结果:CYP2A6的表达始于孕18周,在支持细胞核上区胞浆顶端阳性着色,彼此相连呈一条带状,上皮中、下层个别支持细胞核下区也呈现稍弱的免疫阳性反应.到孕22周时,固有层Bowman腺细胞浆内开始出现CYP2A6阳性着色,但此时Bowman腺体数量较少,腺细胞仅单层排列围成腺腔.随胎儿发育CYP2A6表达强度不断增大,孕28周时整个支持细胞的阳性着色更加清晰,固有层内Bowman腺数量明显增多,并且腺细胞呈多层排列,胞浆内CYP2A6阳性强度开始超出上皮层内的支持细胞.孕38周时免疫反应达峰值,其中支持细胞的染色勾画出其独特的极性结构:细胞核上区宽阔,胞浆内CYP2A6染色清晰,而核下区逐渐缩窄,以足状突的形式附着于基膜上.结论:人胎儿发育时期嗅粘膜内有CYP2A6酶表达,并且与嗅感受神经元发育基本同步,二者可能存在共同的调控因子.固有层Bowman腺细胞内CYP2A6的开始表达时间晚于上皮层支持细胞,但却是嗅粘膜内CYP2A6表达的主要部位以及嗅素代谢转化的主要场所.
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RT-PCR检测非小细胞肺癌骨髓CEA mRNA的表达
目的:应用RT-PCR法检测Ⅲ期非小细胞肺癌患者骨髓的微转移.方法:用逆转录PCR(reverse transcriptase polvmerase chain reaction,RT-PCR)技术检测41例Ⅲ期非小细胞肺癌患者及10例肺良性病变患者肋骨骨髓中癌胚抗原(carcinoma embryonic antigen,CEA)的表达情况.结果:41例肺癌患者骨髓中CEA mRNA阳性率为46.3%(19/41),肺良性病变患者骨髓中未见表达,两者差异显著(P=0.005).CEA mRNA的表达与肺癌患者年龄、性别、肿瘤分化程度无明显关系.鳞癌中CEA mRNA表达阳性率为21.7%(5/23),腺癌为66.7%(8/12),鳞癌中的表达低于腺癌(P=0.013).结论:以CEA mRNA为分子标记,用RT-PCR法检测Ⅲ期非小细胞肺癌患者肋骨骨髓微转移具有较高敏感性和特异性,有助于发现亚临床转移灶,指导临床治疗.
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单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D酵母表达载体的构建
目的:构建含有单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白D全基因片段的克隆载体及酵母表达载体,为进一步真核表达重组gD蛋白奠定基础.方法:应用PCR方法从HSV-Ⅰ基因组中扩增糖蛋白D的全长基因,产物回收后与pMD-18T载体连接,并转化,经氨苄筛选及测序,建立克隆载体pMD18T-gD;克隆载体与表达载体双酶切后,产物连接、转化大肠杆菌JM109,筛选、测序后确定构建了酵母表达载体pGAPZαA-gD.结果:重组质粒pMD18T-gD和pGAPZαA-gD经PCR和酶切均出现相应长度的片段,测序结果证实为gD基因,序列分析同源性为99.66%.结论:成功构建了含有单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D全基因的克隆载体及酵母表达质粒.
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反相高效液相色谱法测定注射用盐酸氨溴索的含量
盐酸氨溴索(ambroxol hydrochloride),化学名反式-4-[(2-氨基-3,5-二溴苄基)氨基]环己醇盐酸盐,临床用于治疗多种原因引起的痰多、咳嗽,是某些祛痰药的主要成份[1,2].
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组织多肽特异性抗原在胰腺癌诊断中的意义
组织多肽特异性抗原(TPS)是一种酸性蛋白质,分子量为45 000,血清中TPS含量的高低是衡量肿瘤细胞分裂和增殖活性的一个较为特异的指标[1].为探讨TPS在胰腺癌诊断中的意义.我们用酶联免疫方法对52例胰腺癌患者血清中的TPS进行了术前测定,并与糖抗原19-9(CA19-9)进行对比,现报告如下.
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后腹腔镜手术治疗肾囊肿22例
1997年5月～2001年2月,我院采用水囊扩张建立腹膜后腔的方法,施行后腹腔镜泌尿外科手术治疗肾囊肿22例,手术全部成功,均未出现并发症,现报告如下.
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保留半月板的胫骨近端骨巨细胞瘤切除及膝关节重建的围手术期处理
1990年1月～2002年2月,我们共收治13例胫骨近端单侧髁骨巨细胞瘤患者,疗效良好,报告如下.
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复发性翼状胬肉三种治疗方法比较
复发性翼状胬肉历来是眼科治疗的棘手问题.自1999年7月～2001年7月,我院采用三种方法共施行手术治疗80例(81眼),收到较好的效果,现报告如下.
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三棱镜适应在内斜视治疗中的应用
内斜视患者手术前使用三棱镜做三棱镜适应(Prism Adaptation,PA),可以提高手术成功率,对预测获得性内斜视患者手术后的感觉和运动融合有效.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 02 03 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 z2 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
