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持续压力对离体培养兔椎体终板内Wnt/β-catenin信号通路及VEGF的影响

展嘉文;冯敏山;王尚全;朱立国;韩涛;尹逊路;魏戌

摘要: 目的 研究持续压力对椎体终板内血管内皮生长因子(VEGF)及β-catenin表达的影响,进一步探讨VEGF与椎间盘退变之间的分子作用机制.方法 将16只新西兰白兔处死后在无菌条件下取出脊柱运动节段,随机分为对照组与压力组,每组各8只,均放入离体加载和培养装置中进行培养,其中压力组予持续3 kg压力,对照组不予压力,于培养前及培养3、7及14 d时,两组各取10个样本,应用免疫组化、Western blot、Real-time PCR检测 VEGF及β-catenin的表达情况.结果 免疫组化检测结果显示,持续压力下培养7d时,终板内VEGF强度显著下降(0.182±0.063),与对照组(0.237±0.051)比较,差异有统计学意义(P<0.05);培养14 d时染色强度进一步降低,压力组(0.156±0.035)与对照组(0.211±0.038)比较,差异有统计学意义(P<0.05);相反,持续压力上调了终板内β-catenin的表达,培养期间与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示,压力组与培养前及对照组比较,上调了β-catenin的表达,差异均有统计学意义(P<0.05).Real-time PCR结果显示,持续压力导致VEGF基因相对表达量减少(0.842±0.002),与对照组(0.965±0.005)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 持续压力导致离体培养兔脊柱运动节段内椎体终板VEGF表达下降、β-catenin表达上调,提示持续压力可能通过Wnt/β-catenin信号通路调节椎体终板内VEGF表达.

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