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动脉粥样硬化靶向适配子的亲和力筛选

钟文飞;汪江波;吴仲洪;胡华钟;朱秋连;林彩燕;严鹏科

摘要: 目的:筛选动脉粥样硬化高亲和力适配子,为动脉粥样硬化靶向引导物的体内应用提供实验基础。方法将前期研究获得的一组巨噬细胞源性泡沫细胞适配子中的12个适配子进行生物素标记,采用酶联寡聚核苷酸吸附试验(ELONA)方法测定其亲和力(Kd),采用高脂方法建立载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)动脉粥样硬化模型,将亲合力高的适配子Cy5进行荧光标记,激光共聚焦显微镜下观察其与动脉粥样硬化病变组织的结合能力。结果12个巨噬细胞源性泡沫细胞的适配子均具有较好的亲和力,解离平衡常数(Kd值)范围在4.33~39.58 nmol/L之间,其中9号适配子(Apt9)的亲和力高,Kd值为(4.33±0.33)nmol/L,体内亲和力检测发现Apt9能特异性结合ApoE-/-动脉粥样硬化血管斑块病变组织。结论筛选的Apt9适配子能与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变血管组织特异性结合,可以用于进一步的体内研究。

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