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小分子RNA干扰Smad3基因对人增生性瘢痕的作用
近年来对于增生性瘢痕形成机制的研究较多,TGF-β信号转导的中介分子Smad家族,位于TGF-β家族配体-受体信号转导系统的下游,通过调控核内靶基因的转录控制创面愈合和病理性瘢痕形成[1-2].本研究中,笔者利用小分子RNA干扰技术特异性抑制Smad 3基因的表达,观察其对瘢痕增生和Ⅰ、Ⅲ型胶原合成等的影响,为进一步临床应用基因治疗瘢痕提供理论依据和实验基础.
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bFGF和TGF-β对原发性骨关节炎软骨间充质祖细胞增殖调控作用
目的：观察bFGF和TGF-β1对原发性骨关节炎（ OA)关节软骨间充质祖细胞（ MPCs)的促增殖作用，为通过调控关节软骨MPCs以防治原发性OA提供理论依据。方法采用MTT法测定不同浓度bFGF和TGF-β1单独或联合作用下对原发性OA关节软骨MPCs的增殖作用。结果10.0~50.0 ng/mL的bFGF、0.1~1.0 ng/mL的TGF-β1单独作用于传代培养原发性OA关节软骨MPCs时，其培养细胞的增殖速率显著增加（P<0.05)，而随着二者浓度的进一步增加，其增殖速率无显著变化（P>0.05)；bFGF 10.0 ng/mL+TGF-β11.0 ng/mL联合作用时，对原发性OA关节软骨MPCs具有明显促增殖作用（P<0.05)。结论 bFGF、TGF-β1对原发性OA关节软骨MPCs增殖具有重要作用，不同浓度的bFGF、TGF-β1及bFGF+TGF-β1促增殖作用不同，提示通过适宜浓度的bFGF、TGF-β1对原发性OA关节软骨MPCs的作用，可能具有促进原发性OA关节软骨损伤修复的效果。
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人早孕滋养细胞通过分泌CXCL16促进蜕膜γδT细胞增殖
目的:探讨人早孕期滋养细胞分泌的CXCL16对蜕膜γδT细胞增殖的影响.方法:收集正常非孕妇女、正常早孕妇女及自然流产妇女的外周血及蜕膜组织各10例,体外分离外周血单核淋巴细胞及蜕膜免疫细胞,使用流式细胞仪检测γδT细胞的比例；采用磁珠分选技术纯化得到的人早孕蜕膜γδT细胞,流式细胞术检测其胞内细胞因子的表达；建立人早孕蜕膜γδT细胞与滋养细胞的共培养体系,流式细胞仪检测γδT细胞中Ki67的表达.结果:正常早孕妇女外周血及蜕膜局部γδT细胞比例明显高于非孕妇女及自然流产妇女,且正常早孕组和自然流产组蜕膜局部γδT细胞比例均高于外周血.人早孕蜕膜γδT细胞内的细胞因子表达依次为IL- 10＞TGF-β1＞TNF-α≥IFN-γ.人早孕滋养细胞或者人重组的CXCL16 (rhCXCL16)均能促进γδT细胞的增殖,而在共培养体系中加入CXCL16的中和性抗体后则抵消了此效应.结论:早孕妇女体内γδT细胞数量增多可能与正常妊娠的维持有关,母-胎界面的滋养细胞通过分泌CXCL16促进蜕膜γδT细胞的增殖,蜕膜γδT细胞可能通过分泌IL-10及TGF-β1等细胞因子有利于正常妊娠的维持.
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睾丸局部溶脲脲原体感染对支持细胞锌指蛋白265表达的初步研究
目的:研究睾丸局部感染后支持细胞免疫调节功能与锌指蛋白265(zinc finger protein 265,ZNF265)的变化情况.方法:以溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)体内感染支持细胞后,分别在感染1、2、3周时间段运用RT-PCR、免疫组化和流式细胞术(FCM)方法比较感染组与对照组间ZNF265、IL-1α、IL-6、TGF-β和FasL的mRNA及蛋白水平的表达变化情况.结果:与对照组相比,体内感染处理后2周后支持细胞的ZNF-265表达下降,3周后又升高;TGF-β和FasL从感染2周开始表达上升,一直至3周仍处于上升趋势;感染2周IL-1α和IL-6表达分别上升;3周后则分别下降.结论:ZNF265在支持细胞被UU感染后会产生表达变化.
关键词： 锌指蛋白265(ZNF265) TGF-β 支持细胞 免疫调节 -
TGF-β1在早孕妇女外周血和蜕膜组织中诱导生成T调节性(Treg)细胞
目的:研究TGF-β1是否能在人母-胎界面诱导生成T调节性(Treg)细胞.方法:早孕妇女外周血和蜕膜CD4+CD25T细胞中加入不同浓度的TGF-β1(0 ng/ml、2 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml)分别于培养后第2日、第4日和第6日用流式细胞仪检测培养Foxp3的表达情况,随后将诱导生成的CD4+Foxp3+T细胞与CD8+T细胞混合培养,观察后者凋亡因子CD95配体(CD95L)的表达情况.结果:体外培养中,TGF-β1可诱导早孕妇女的外周血和蜕膜CD4+CD25 T细胞生成诱导性Treg细胞,随着培养时间增加而增强诱导效应,且在TGF-βl浓度为5 ng/ml时诱导功能强；诱导生成的CD4+Foxp3+T细胞具有促进效应细胞CD8+T细胞凋亡的功能.结论:体外培养中,TGF-β1能将人外周血和蜕膜诱导生成Treg细胞,且具有免疫抑制功能,有良好的免疫治疗前景.
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白血病患者TGF-β1及其受体表达的意义
目的:探讨白血病患者TGF-β1及其受体表达在白血病发展过程中的意义.方法:用免疫组织化学或ELISA法检测白血病患者不同病程时期外周血、骨髓以及骨髓基质细胞的结合型TGF-β1,TGFRⅡ和可溶性TGF-β1.结果:初诊患者外周血结合型TGFRⅡ和可溶性TGF-β1含量明显下降,缓解后又升高至接近正常,结合型TGF-β1表达无明显异常.骨髓有核细胞的结合型TGFRⅡ表达情况与外周血基本一致,初诊患者明显下降,缓解后又升高.初诊患者的骨髓基质细胞生长不良,结合型和可溶性TGF-β1含量均明显低下,缓解后又趋于升高,但骨髓基质细胞TGFRⅡ未见明显异常.结论:白血病骨髓基质细胞的TGF-β1表达低下,可能是其外周血和骨髓中TGF-β1含量下降的重要原因,而白血病患者TGF-β1下降及TGFRⅡ表达低下,可能是白血病细胞得以大量增生的重要原因.
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TGF－β在肺癌患者化疗前后外周血中的表达
目的：通过检测TGF－β在肺癌患者化疗前后外周血中的浓度，探索其作用。方法：选取2015年10月至2016年5月非小细胞肺癌住院患者30例，化疗前后均为同一患者，选取30例正常健康者作为对照组；根据实验要求入选对象空腹，分别用促凝管采集肺癌患者化疗前组、肺癌患者化疗后组、对照组静脉血7 mL，收集血清，并用ELASA检测TGF－β浓度．结果：非小细胞肺癌患者化疗前浓度明显高于正常组（P＜0．05）；化疗后浓度与正常组相比，无统计学意义（P＞0．05）；化疗后浓度低于化疗前浓度（P＜0．05）。结论：非小细胞肺癌患者经过化疗可降低TGF－β表达，为进一步研究非小细胞肺癌发病机制奠定基础。
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细胞因子在腹腔粘连形成中的作用
腹腔粘连是腹部外科手术后常见的并发症,并可导致肠梗阻、慢性腹痛及不孕不育等并发症.术后腹腔粘连形成机制仍尚未明确,但是近期研究显示细胞因子在粘连形成发挥关键的作用,并且已发现部分与术后腹腔粘连形成相关细胞因子,本文就主要的细胞因子与腹腔粘连的关系作一综述.
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研究异丙托溴铵联合乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血清中转化生长因子和基质金属蛋白酶9水平的影响
目的 讨论研究异丙托溴铵联合乙酰半胱氨酸(NAC)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者血清中转化生长因子(TGF-β)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平的影响.方法 现随机选取2017年1月-2017年12月我院收治慢性阻塞性肺疾病稳定期患者62例,按随机数字表法分成实验组31和对照组31例,对照组进行常规治疗,实验组进行异丙托溴铵、乙酰半胱氨酸联合治疗,观察对照组和实验组患者TGF-β、MMP-9水平.结果 治疗后实验组患者TGF-β、MMP-9水平优于对照组,组间差异明显,具有临床统计意义(P<0.05).结论 在慢性阻塞性肺疾病稳定期患者治疗中可采取异丙托溴铵、乙酰半胱氨酸联合治疗方式,可有效的降低TGF-β、MMP-9水平,提高治疗效果.
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丹皮酚对人肝星状细胞α-SMA表达的影响
目的 研究丹皮酚对肝星状细胞活化及胶原合成的影响,进一步阐明其抑制肝纤维化的机制,为抗肝纤维化提供新的成分明确的中药单体.方法 采用TGF-β刺激培养的人肝星状细胞,观察丹皮酚在上述条件下对肝星状细胞表型转化、胶原合成的影响,以探讨丹皮酚在体外抗纤维化作用并初步研究其机制.实时荧光定量PCR、Western Blotting检测肝星状细胞α-SMA mRNA及蛋白水平表达,明确丹皮酚对TGF-β刺激下肝星状细胞表型转化的影响.羟脯氨酸法检测细胞培养上清总胶原的表达.结果 在TGF-β刺激作用下,α-SMA基因表达明显上调,加入不同浓度的丹皮酚后,α-SMA基因表达下调,并且具有丹皮酚剂量依赖性.在TGF-β刺激作用下,肝星状细胞培养上清中的羟脯氨酸含量明显上升,加入不同浓度的丹皮酚后明显下降.结论 TGF-β刺激使得α-SMA基因表达上调,加入丹皮酚表达下调,丹皮酚对肝星状细胞表型转化有促进其纤维化作用.TGF-β刺激作用下,肝星状细胞培养上清中的羟脯氨酸含量明显上升,提示肝星状细胞胶原合成增加.
