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优化和验证人精浆miRNAs提纯方法
目的 优化精浆miRNAs提纯方法,为后续实验奠定基础. 方法 收集国家卫生计生委科研所生殖健康服务中心正常精液样本5例,非梗阻性无精子症(NOA)患者(经北京大学第三医院检查确诊)精液样本22例.根据不同RNA提取方法分为4组:Trizol LS组、蛋白酶K+Trizol LS组、miRNeasy Micro kit组及Trizol LS+miRNeasy Micro kit联合使用组(改良组).比较4组提纯NOA患者精浆RNA的OD260/280,使用Agilent2100生物分析仪检测改良法提纯精浆miRNAs的纯度和质量,采用实时定量PCR方法比较4组精浆miR-106b的溶解曲线,并比较精液参数正常组(n=5)和NOA患者组(n=10)精液样本中的miR-106b的表达量. 结果 改良组提纯精浆RNA的OD260/280为(1.90±0.03)显著高于其他3组(P<0.05);改良组提纯精浆miRNAs的完整数合格,色谱图位置特异性明显,峰值清晰;4组miR-106b的溶解曲线中,改良组曲线符合标准;NOA患者精浆中miR-106b的表达丰度显著低于参数正常组(P<0.01). 结论 Trizol LS与miRNeasy Micro kit联合使用提纯的精浆miRNAs质量好,能满足后续实时定量PCR、深度测序等实验要求.小样本分析发现NOA患者精浆miR-106b含量显著低于精液参数正常组,有待大样本验证其是否能作为临床诊断NOA的分子指标.
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miR-106b对宫颈癌SiHa细胞运动侵袭功能的影响
目的 研究miR-106b对宫颈癌SiHa细胞转移侵袭功能的影响及作用机制.方法 SiHa细胞转染miR106b inhibitors和mimics,实时定量PCR检测转染效率,Transwell及划痕法检测细胞运动侵袭功能,分析E-cadherin 、PTEN、p-AKT(Ser473)蛋白表达情况.结果 miR-106b inhibitors和mimics改变SiHa细胞中miR-106b表达.转染miR-106b inhibitors后,细胞迁移数、移动距离减少(P＜0.05)；PTEN及E-cadherin表达增强,p-AKT表达降低.转染miR-106b mimics后,细胞迁移数、移动距离增加(P＜0.05)；PTEN及E-cadherin表达降低,p-AKT表达增强.结论 miR-106b可能通过E-cadherin/AKT、PTEN/AKT信号通路影响SiHa细胞运动侵袭功能.
关键词： miR-106b 宫颈癌 转移 PTEN E-cadherin -
MiR-106 b通过靶向BTG3调控非小细胞肺癌的增殖与细胞凋亡
目的 探讨MiR-106b通过靶向BTG3调控非小细胞肺癌的增殖与细胞凋亡行为及其作用机制.方法 qPCR检测非小细胞肺癌和癌旁正常组织、不同细胞株中miR-106b的表达情况;双荧光素酶报告基因检测miR-106b与BTG3的相互作用;MTT细胞增殖实验检测miR-106b对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响;流式细胞术实验检测miR-106b对非小细胞肺癌细胞凋亡行为的影响;Transwell侵袭实验检测抑制miR-106b后非小细胞肺癌细胞侵袭能力的变化;免疫组化检测裸鼠瘤体内BTG3的表达情况.结果 与癌旁正常组织相比,非小细胞肺癌组织中miR-106b表达明显增高;非小细胞肺癌细胞A549中miR-106b的表达水平高;miR-106b能与BTG3的3'UTR特异性结合,调控BTG3的表达活性;抑制miR-106b的表达后非小细胞肺癌细胞增殖侵袭的能力相对减弱;抑制miR-106b的表达后,荷瘤小鼠的肿瘤体积和重量都明显减小,且BTG3蛋白的表达相应降低.结论 miR-106b在非小细胞肺癌的发生发展过程中起重要作用,可以通过靶向调节BTG3的表达影响非小细胞肺癌细胞的增殖和凋亡.
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甲状腺癌中miR-106b负性调控FAM129A基因表达的作用及机制
目的 研究甲状腺癌中miR-106b的表达及其调控靶基因FAM129A表达的作用及分子机制.方法 实时定量PCR法检测miR-106b及FAM 129A基因的表达.将miR-106b的前体(agomiR-106b)转染甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,Western blot法检测FAM129A蛋白表达,荧光素酶实验验证miR-106b与FAM 129A基因3'菲翻译区的特异性结合.结果 相对于癌旁组织,MiR-106b在甲状腺癌组织表达较癌旁组织下调明显,而FAM129A在甲状腺癌组织表达显著上调,二者呈明显的负性相关.AgomiR-106b能够显著抑制甲状腺癌TPC-1细胞中FAM 129A蛋白的表达,miR-106b能够特异性地结合FAM 129A基因的3'UTR,并抑制荧光素酶活性.结论 miR-106b与FAM129A基因的表达异常与甲状腺癌的发生相关,miR-106b在甲状腺癌细胞能靶向沉默FAM 129A基因.
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miRNA-106b失活可通过上调MMP2表达参与乳腺癌骨转移
目的:探讨基质金属蛋白酶2 (matrix metalloproteinase 2,MMP2)及其调控子has-miR-106b (miRNA-106b/miR-106b)在乳腺癌骨转移中的作用及机制.方法:采用定量PCR、免疫组织化学染色、Western印迹法测定乳腺癌骨转移患者MMP2、miR-106b的表达,并分析MMP2与乳腺癌骨转移患者临床特征的关系.细胞迁移和侵袭实验观察MMP2、miR-106b表达变化体外对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响.荧光素酶报告基因检测MMP2和miR-106b的靶向关系.Western印迹验证受调控的下游信号通路.结果:MMP2在侵袭能力较强的细胞如SUM1315-bo中表达较高,在侵袭能力较弱的乳腺癌细胞如MCF-7中表达较低;而miR-106b的表达与之相反.与未发生骨转移的乳腺癌患者相比,MMP2蛋白在乳腺癌骨转移患者原位肿瘤标本中表达较高;miR-106b的表达与之相反.MMP2促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭,miR-106b反之(P＜0.05).miR-106b可下调MMP2的表达,进而影响下游调控因子p-ERK/ERK的表达(P＜0.05).在SUM1315-bo中下调MMP2基因后,其培养基培养的骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stem cell,HMSC)定向分化为成骨细胞过程中,细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)轴失衡,即OPG含量增加、RANKL含量减少,导致破骨细胞分化减少(P＜0.05).结论:MMP2过表达是乳腺癌骨转移的危险因素,这可能与miR-106b失活有关;MMP2可能通过调节ERK信号通路而促进乳腺癌溶骨性骨转移;miR-106b-MMP2-ERK信号通路是乳腺癌骨转移潜在的预测因子及治疗靶标.
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男性不育症患者精浆miR-106b水平变化及意义
目的 检测男性不育症患者精浆全基因组微小核糖核酸(miRNAs)表达谱,筛选差异表达的miR-106b,探讨其作为男性不育症分子诊断指标的可行性.方法 收集163例男性不育症患者及126例正常生育男性精浆,分别混合;用Solexa测序技术分别检测弱精症、非梗阻性无精症和正常生育男性的混合精浆中692种miRNAs的表达,用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)对表达异常的miR-106b在单个样本中逐一进行验证.结果 Solexa测序结果显示,19种miRNAs在不育症患者精浆中的表达量与健康男性相比变化＞2倍,miR-106b在弱精症和无精症患者中分别上调了6.89倍和2.61倍.qRT-PCR结果表明,弱精症组miR-106b含量[中位数(四分位数)]为719.35(518.49,1 183.39) fmol/L,与正常生育组的291.35(148.83,421.56) fmol/L比较,明显升高(U =91.00,P＜0.01);无精症患者miR-106b的含量则明显降低,为60.07(18.38,292.52))fmol/L(U=195.00,P＜0.01).ROC曲线分析显示,miR-106b诊断弱精症和无精症的曲线下面积(AUCROc)分别为0.844 (95％ CI,0.734～0.954)和0.720 (95％ CI,0.575～0.864);鉴別弱精症和无精症的AUGROc为0.902 (95％ CI,0.822 ～0.982).结论 男性不育症患者精浆miR-106b表达水平与正常生育男性存在明显差异,有望成为男性不育症诊断和鉴别诊断的辅助指标.
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hsa_circ_RNA0023397和miR-106b在活动性克罗恩病肠黏膜组织中的表达及意义
目的:检测hsa circ 0023397和miR-106b在克罗恩病(Crohn's disease,CD)中的表达及其与自噬的关系,为CD的分子诊断和靶向治疗提供新思路.方法:在环状RNA芯片检测的基础上,收集活动期CD患者及健康体检者各40例,采用实时定量PCR检测肠黏膜组织中hsa circ 0023397和miR-106b的表达情况,并用Western Blot检测自噬相关蛋白ATG16L1及LC3-II/LC3-I的表达情况.结果:与健康体检组相比,活动期CD患者肠黏膜组织中hsa circ 0023397明显下降(P<0.01),而miR-106b显著升高(P<0.01).West-ern Blot检测发现,活动期CD肠黏膜组织中ATG16L1及LC3-II/LC3-I比值均下降(P<0.05).结论:活动期CD患者肠黏膜组织中可能存在着由于 hsa circ 0023397下调引起 miR-106b 过度表达,继而导致ATG16L1表达下调并降低CD患者自噬功能的新机制,有待进一步研究.
关键词： 克罗恩病 hsacirc0023397 miR-106b ATG16L1 自噬 -
Hsa-miR-106b-25簇的靶基因预测及生物信息学分析
目的 Hsa-miR-106b-25簇涉及肿瘤的多种生物学过程,文中对hsa-miR-106b-25簇:miR-106b、miR-93、miR-25进行靶基因的预测及功能分析,为进一步研究这3个miRNAs的功能及他们之间的相互作用调节机制提供线索. 方法 应用miRBase数据库获取miR-106 b、miR-93及miR-25的序列信息,选择TargetScan、PicTar、miRanda 3种在线靶基因预测软件分别预测它们的靶基因,取交集并结合miRTarbase数据库中3种及3种以上实验验证过的靶基因作为进一步生物信息学分析的基因集合;分别对基因集合进行生物过程的功能富集分析,pathway 分析及蛋白互作分析. 结果 hsa-miR-106b-25簇的预测靶基因富集于多个生物学过程及功能,其生物过程主要集中于:大分子新陈代谢调节、代谢过程的调节、细胞周期;KEGG通路主要富集于:胶质瘤、黑色素瘤、前列腺癌、胆囊癌等肿瘤相关通路,蛋白互作显示基因簇中3个成员miRNA的预测靶基因编码蛋白质间存在复杂的相互作用,靶基因KAT2B、PTEN、TP53、CDH1、MDM2、E2F1、RB1、SMAD7编码蛋白在互作网络中具有核心地位. 结论 miR-106 b-25簇中的3个成员通过调控细胞周期的转换作用于肿瘤通路过程进而调节下游靶蛋白参与肿瘤的发生过程.
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MiR-106b在2型糖尿病db/db小鼠骨骼肌中的表达及生物信息学分析
目的 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类小分子单链非编码RNA,广泛参与各种生物学过程,与肿瘤、糖尿病、心血管疾病关系密切,miR-106b与胰岛素抵抗糖尿病密切相关.文中检测miR-106b在2型糖尿病db/db小鼠骨骼肌中的表达,并对其靶基因进行预测及相关生物信息学分析,为 miR-106b靶基因的实验验证提供数据支持,并为深入研究miR-106b的生物学功能和调控机制提供理论指导.方法 利用实时PCR 技术检测miR-106b在糖尿病db/db小鼠骨骼肌中表达.利用miRBase、NCBI、UCSC Browser等在线工具分析miR-106b序列.把利用TargetScan和StarBase 2种计算方法预测的miR-106b靶基因的交集作为分析的基因集合,分别进行基因本体(gene ontology,GO)注释描述、GO富集分析和生物通路富集分析.结果 ①miR-106b在2型糖尿病db/db小鼠骨骼肌表达显著升高;②miR-106b在各物种之间具有高度保守性;③预测靶基因集合分别富集在代谢调节、生物合成、细胞增殖与凋亡等基本生物学过程和蛋白结合、转录调控等分子功能上(P＜0.001).经典miR-106b预测靶基因集合显著富集于KEGG通路数据库中的Wnt 信号通路、mTOR信号通路、TGF-β信号通路和胰岛素信号通路等12个信号转导通路,以及前列腺癌、慢性髓细胞性白血病、黑素瘤等12个疾病通路中(P＜0.05).结论 MiR-106b在db/db小鼠骨骼肌表达升高.miR-106b与多种肿瘤的发生和细胞周期调节有关.miR-106b参与物质代谢等过程的调控,可能在胰岛素抵抗、2型糖尿病的发病中起重要作用.
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血浆miR-106b表达水平对乳腺癌的诊断价值
目的：探讨miR-106b对乳腺癌的诊断价值。方法荧光定量PCR检测正常乳腺细胞系MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435的miR-106b表达水平。收集30例乳腺癌患者临床病例资料，采集患者血浆，以健康人血浆作为对照，应用RT-PCR方法分析血浆miR-106b相对表达量与乳腺癌临床特征的关系，评估血浆miR-106b对乳腺癌的诊断效能。结果MCF-10A细胞miR-106b相对表达量为（1.00±0.08），MCF-7细胞为（5.15±0.45），MDA-MB-231细胞为（6.86±0.57），MDA-MB-435细胞为（3.86±0.29）。乳腺癌患者血浆及健康人血浆miR-106b相对表达量分别为（4.13±2.47）和（1.00±0.75）（P﹤0.05）。乳腺癌患者血浆miR-106b相对表达量与患者年龄、肿瘤大小无相关性（P﹥0.05），而与肿瘤分化程度、临床分期相关（P﹤0.05）。经ROC曲线分析，miR-106b对乳腺癌患者和健康对照者诊断乳腺癌的AUC为0.831（95％CI：0.719~0.942），敏感性和特异性分别为86.67％和76.67％。结论乳腺癌患者血浆miR-106b异常高表达可能成为乳腺癌诊断的新靶点。
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miR-106b对脂多糖诱导活化的人单核巨噬细胞分泌TNF-α的影响及机制研究
目的 研究miR-106b对脂多糖(LPS)诱导活化的人单核巨噬细胞(THP1)分泌TNF-oα的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 体外培养人THP1,予LPS刺激剂诱导其活化.重新取THP1细胞,分为LPS组、NC对照组和miR-106b组3组;LPS组,THP1细胞不转染,单用LPS(1 iμg/ml)刺激24h;NC对照组,每孔细胞中加入NC mimic(与靶基因序列不相符)100nmol转染后,LPS(1μg/ml)刺激24h;miR-106b组,每孔细胞中加入miR-106b mimic 100nmol转染后,LPS(1 μg/ml)刺激24h.随后检测各组THP1细胞上清液TNF-α的表达量.利用生物信息学分析系统预测miR-106b可能作用的靶蛋白.采用荧光抗体标记靶蛋白,流式细胞仪检测过表达miR-106b对靶蛋白的影响.结果 LPS可以诱导体外培养的人THP1活化并分泌TNF-α.与LPS组和NC对照组比较,miR-106b组THP1上清液TNF-α表达量明显增多(均P＜0.05);NC对照组与LPS组相比无统计学差异(P＞0.05).生物信息学预测miR-106b作用的靶蛋白可能为信号调节蛋白α(SlRPα).流式细胞检测结果显示,与NC对照组和Lps组比较,miR-106b组的THP1细胞SIRPα表达量明显下降(均P＜0.05).结论 miR-106b可通过抑制靶基因SIRPα的表达,进而促进人THP1分泌TNF-α,进一步阐明了miRNA对人THP1炎症反应的调控机制,为冠心病的诊断、治疗提供了新的生物学靶点.
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miR-106 b在卵巢浆液性癌发生发展中的作用
目的：研究miR-106 b在卵巢浆液性癌中的表达及其对卵巢癌细胞增殖、侵袭的影响,并对其可能机制进行初步分析。方法：运用原位杂交和RT-PCR技术检测输卵管上皮和卵巢浆液性癌组织中miR-106 b表达情况；转染miR-106 b的mimics作用于SK-OⅤ3细胞,应用生长曲线、克隆形成、侵袭实验检测miR-106 b对细胞增殖和侵袭的影响。结果：原位杂交实验显示,miR-106b在卵巢浆液性癌组织中的表达明显高于输卵管上皮。Real time-PCR结果证实,miR-106b在多数卵巢浆液性癌患者(n=30)组织中的表达明显高于输卵管上皮( n=8)；生长曲线和克隆形成试验显示,过表达miR-106 b明显促进卵巢癌细胞的增殖和转化；侵袭实验显示, miR-106 b明显促进卵巢癌细胞的侵袭力。结论：miR-106b在卵巢浆液性癌组织中高表达,miR-106b促进卵巢癌细胞的增殖、克隆形成和侵袭,miR-106b在卵巢浆液性癌发生发展中可能发挥重要作用。
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MiR-106b对非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡影响的研究
目的 探讨miR-106b对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖及凋亡的影响,以探索肺癌的特异性新靶标.方法 通过qRT PCR检测miR-106b在NSCLC细胞及正常支气管上皮细胞的表达水平;细胞转染后利用MTT方法及流式细胞术检测细胞增殖及凋亡水平.结果 在NSCLC细胞株A549中miR 106b的表达明显高于正常支气管上皮细胞16HBE.MTT结果显示,转染了miR-106b模拟物后细胞的增殖能力明显增高,而转染了miR-106b抑制物后细胞增殖能力降低(P＜0.05).流式细胞术检测到miR-106b明显抑制凋亡(P＜0.01).结论 MiR-106b可以在非小细胞肺癌的发生过程中发挥促进增殖及抑制凋亡的作用,可以为非小细胞肺癌早期诊断及治疗提供新的理论基础.
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miR-106 b对 HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响
目的：探讨miR-106 b对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法：采用实时定量PCR检测转染miR-106b抑制剂和类似物后HeLa细胞中miR-106b的表达，MTT法及流式细胞仪检测转染后HeLa细胞对顺铂的敏感性和凋亡，Western blot检测细胞中Twist1、PTEN、p-AKT（Ser473）蛋白的表达。结果：miR-106b抑制剂可减少HeLa细胞中miR-106b的表达；而miR-106b类似物可增加HeLa细胞中miR-106b的表达。转染miR-106b抑制剂后，细胞对顺铂的敏感性增强、凋亡及PTEN蛋白表达增加，Twist1、p-AKT表达降低（P＜0．05）；转染miR-106b类似物后，细胞对顺铂的敏感性减弱，凋亡及PTEN蛋白表达降低，Twist1、p-AKT表达增加（P＜0．05）。结论：miR-106 b可能通过调节Twist1、PTEN和p-AKT的表达影响HeLa细胞对顺铂耐药。
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MicroRNA-106b在肾细胞癌中的表达及临床意义
目的:比较microRNA-106b(miR-106b)在肾癌及癌旁正常组织之间和肾癌细胞系和正常肾细胞系之间的表达水平,并分析其表达水平与临床病理资料之间的关系.方法:采用RT-qPCR方法检测miR-106b表达量在35对肾癌组织和癌旁正常组织中的差异,并运用秩和检验方法分析肾癌组织中miR-106b表达量与患者临床病理特征之间的相关性.培养肾癌细胞系(786-O和ACHN)和正常肾上皮细胞系(HK-2)并采用RT-qPCR方法检测细胞miR-106b表达量.结果:miR-106b在肾癌组织中的表达量明显高于癌旁正常组织(P＜0.01),且肾癌组织中miR-106b表达量与肾癌的组织类型有相关性(P=0.049),未发现与其他临床病理资料如年龄、性别、T分期、Fuhrman分级和AJCC临床分期有明显相关关系(P＞0.05).同时,miR-106b表达量在肾癌细胞系中也明显高于正常肾上皮细胞系(P＜0.01).结论:miR-106b在肾癌组织和细胞系中均高表达,且其在肾癌组织中的表达水平与肾癌组织类型相关,提示miR-106b与肾癌的发生和发展相关.
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miR-106b的免疫调节及其与自噬和凋亡关系的研究进展
microRNAs (miRNAs)是一类长度为21～25个核苷酸的内源性非编码小RNAs,在转录后水平上负向调控基因的表达.microRNA-106b (miR-106b)作为miRNAs的一员,其免疫调节功能可通过影响细胞因子和转录因子的表达和TGF-β信号通路来实现.此外,miR-106b还影响细胞的自噬和凋亡途径.现就近年来miR-106b的研究进展作一综述.
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miR-106b及EZH2对HepG2细胞生长的影响及机制
目的 探讨miR-106b及核心亚基基因增强子的人同源基因2(EZH2)对HepG2细胞生长的影响及其作用机制.方法 qRT-PCR法检测不同肝癌细胞miR-106b的表达;用miR-106b抑制物(inhibitor)及模拟物(mimic)和siEZH2转染肝癌细胞,CCK8法检测细胞增殖,细胞凋亡用Annexin V-FITC/PI双染法和WB法检测凋亡蛋白-3(Caspase-3),生物信息学分析并用荧光素酶法证实miR-106b是否靶向结合EZH2.结果 与永生化的肝细胞LO2相比,miR-106b在肝癌细胞中表达量增加;miR-106b mimic促进HepG2细胞增殖和抑制凋亡;miR-106b inhibitor能导致Caspase-3全长表达量减少和其活性片段表达量增加;siEZH2抑制HepG2细胞增殖和促进其凋亡,并且能导致Caspase-3全长表达量减少及其活性片段表达量增加.荧光素酶结果表明miR-106b并非直接靶向抑制EZH2,miR-106b促进EZH2的表达.结论 抑制miR-106b和EZH2的表达都能有效抑制HepG2细胞增殖和促进其凋亡.
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Mir-106b表达与食管鳞状细胞癌的关系
目的 研究微小RNA106b(mir-106b)在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,并进一步分析其与肿瘤的临床病理学特征及预后的相关性.方法 收集200例2001～2007年中国医学科学院接收的食管鳞状细胞癌患者手术切除获得的肿瘤组织和相对应的癌旁组织,采用qRT-PCR方法检测mir-106b在组织中的相对表达水平,并通过northern blot进一步验证其表达情况.应用统计学方法分析mir-106b表达量与肿瘤临床病理学特征及预后的相关性.结果 相对于癌旁组织,食管鳞状细胞癌肿瘤组织中mir-106b的表达水平显著升高,统计学数据显示,mir-106b的表达量与淋巴结转移、肿瘤分期及吸烟有相关性(P＜0.05).并且,mir-106b表达水平较低的患者的生存率(60个月)显著高于mir-106b表达水平较高的患者(37个月,P=0.024).另外,Cox回归分析显示,mir-106b的表达量、区域淋巴结转移及吸烟均为是食管鳞状细胞癌患者独立预后因子(P＜0.05).结论 mir-106b在食管鳞状细胞癌患者肿瘤组织中高表达,且与淋巴结转移及预后不良密切相关,可用作ESCC的诊断及预后生物标志物.
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miR-106b在原发性肝癌中的表达及与预后的关系
目的 探讨miR-106b在肝癌(HCC)组织中的表达及其临床意义.方法 选择10对HCC组织及相应正常肝组织标本及82例有随访资料的HCC组织切片.qRT-PCR法及锁定核酸原位杂交检测miR-106b在HCC组织的表达,分析miR-106b表达与患者临床病理特征及预后的关系.结果 miR-106b在HCC组织中表达上调(P＜0.05).miR-106b表达与转移、组织分级、肝硬化及血清甲胎蛋白明显相关(P =0.046、0.019、0.004及0.043),而与年龄、性别、乙型肝炎、肿瘤大小及门脉癌栓无明显相关.HCC组织miR-106b高表达的患者5年生存率明显低于低表达患者(P＜0.01),miR-106b高表达是影响HCC患者总体生存的独立风险因素(P＜0.05).结论 miR-106b在HCC组织中表达明显上调,可能参与了HCC的发展过程,有望成为一种新的HCC预后参考指标.
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miR-106b在肝癌细胞中激活Wnt通路
目的：探讨肝癌细胞中miR-106b对Wnt／β-catenin信号传导通路的影响。方法：改变肝癌细胞中miR-106b 表达，TOP／FOP荧光素酶试验检测 Wnt／β-catenin 信号通路活性的变化；Real-time PCR 方法检测Wnt／β-catenin信号通路下游靶基因表达的改变；Western blotting方法检测细胞核内β-catenin表达改变。结果：过表达miR-106b ，肝癌细胞中TOP／FOP荧光比值显著增加，其下游6个靶基因mRNA表达量也显著上调。而抑制miR-106b，则下调荧光比值和下游靶基因的表达。同时发现，miR-106b表达，促进QGY-7703细胞核内β-catenin表达增加，而抑制miR-106b ，则核内β-catenin下调。结论：miR-106b在肝癌细胞中可激活Wnt／β-catenin信号通路。
关键词： 癌 肝细胞 miR-106b Wnt/β-catenin
