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不明原因复发性流产患者子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-1O基因的表达
目的 探讨不明原因复发性流产(URSA)与子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10基因表达的关系.方法 采用原位杂交技术,以HOXA-10反义核苷酸为探针检测51例URSA患者及38例正常生育(NF)组的分泌期子宫内膜/早孕蜕膜组织HOXA-10 mRNA的表达水平,并以灰度阳性单位(PU值)表示. 结果 NF组子宫内膜分泌早期HOXA-10mRNA表达的PU值腺体为(6.66±0.11),间质为(6.76±0.15);分泌中期分别为(10.95±0.90)及(11.46±1.08);分泌晚期分别为(11.05±1.12)及(11.54±1.10);蜕膜组织分别为(11.55±1.14)及(11.93±1.92);分泌中晚期及蜕膜组织的PU值显著高于分泌早期.URSA组不同时期子宫内膜及早孕蜕膜组织中HOXA-10 mRNA的表达水平基本一致,无明显的分泌中晚期及早孕期峰,并且分泌中晚期及早孕蜕膜组织的PU值明显低于NF同期组.两组各期腺体和问质的PU值无显著差异.结论 子宫内膜HOXA-10基因在分泌中晚期及早孕蜕膜组织中的高表达可能和孕卵着床及妊娠维持密切相关,其表达缺陷可能是导致URSA发生的重要原因之一.
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原位杂交检测HOXA-10基因在人子宫内膜的表达
目的：探讨正常生育妇女月经周期不同时期子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中HOXA-10基因的表达。方法：采用原位杂交的方法。结果：HOXA-10基因在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞均有表达；中晚分泌期的表达高于增殖期及分泌早期，且间质细胞的表达高于腺上皮细胞。结论：(1)HOXA-10基因在分泌中期子宫内膜高表达提示其可能在人胚胎着床过程中起某种作用。(2)HOXA-10基因可能在人子宫内膜蜕膜化过程中有重要作用。
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HOXA-10调节的围着床相关分子研究进展
HOXA-10作为雌、孕激素直接调控的多效性核内转录因子,介导胚胎种植的多个环节,如子宫内膜容受性的建立、胚胎的定位及粘附、胞饮突形成、蜕膜化、血管通透性等.然而HOXA-10调节的下游分子知之甚少.差异显示技术,将有助于阐明其在着床中的分子生物学作用机制,并可能为生殖调节提供分子靶点.
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HOXa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用
目的 讨HOXa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用.方法 应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)分别检测未孕及早孕小鼠第1、2、3、4、5、7d HOXa-10基因表达量的变化规律;同时用可以持续表达HOXa-10的DNA/脂质体复合物质粒和HOXa-10反义寡脱氧核糖核酸分别转染到受孕2d小鼠子宫角内,观察胚泡着床数.结果 FQ-PCR结果显示,随着小鼠妊娠天数的增加,HOXa-10基因表达量也逐渐增高,在孕4d达到峰值,孕5d开始下降,孕7d时表达量已接近未孕状态;在用HOXa-10 DNA质粒/脂质体转染孕2d小鼠子宫角后,小鼠的胚泡着床数明显增加;用HOXa-10反义寡脱氧核糖核酸,脂质体转染孕2d小鼠子宫角后,小鼠的胚泡着床数明显减少(P<0.05). 结论在胚泡植入窗口期,子宫内膜HOXa-10基因表达上调,其可能参与了胚泡着床过程.
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双酚A暴露后子宫内膜胞饮突形态及HOXA-10基因表达的改变
目的 建立双酚A (BPA)暴露的昆明雌鼠动物模型,研究暴露后子宫内膜胞饮突的形态学改变以及HOXA-10基因在mRNA水平和蛋白水平表达的改变,探讨BPA对子宫内膜容受性的影响及可能机制.方法 将昆明雌鼠随机分成4组:高剂量暴露组、中剂量暴露组、低剂量暴露组和空白对照组.每组以花生油为溶剂,分别按250 mg/ (kg·d),50mg/ (kg·d),10 mg/ (kg·d),0 mg/ (kg·d)进行BPA灌胃染毒,共28 d,第29天腹腔注射人绝经期促性腺激素(HMG) 7.5 IU,48 h后腹腔注射hCG 10 IU,于当晚雌雄昆明小鼠1∶1合笼,次日可见阴道栓者为孕0d,孕5d后断椎处死,取出子宫,采用扫描电镜观察子宫内膜表面的胞饮突的形态学表现,应用Western Blot、免疫组化和荧光定量PCR测定HOXA-10的表达情况.结果 扫描电镜结果提示,各剂量BPA干预组着床期胞饮突的数目均比对照组少,分布松散且不均,形态不一.HE染色显示,BPA干预组子宫宫腔均较对照组大,子宫内膜上皮细胞的高度较低,排列紧密,间质细胞连接紧密,腺体数量较少.荧光定量PCR、免疫组化和Western Blot结果提示,BPA干预组HOXA-10基因在mRNA及蛋白水平的表达量均较对照组降低(P＜0.05).结论 通过对昆明雌鼠进行BPA的慢性暴露发现,BPA对小鼠胚胎着床期胞饮突的形成表现为抑制作用,同时抑制HOXA-10基因的表达.BPA可能通过改变子宫内膜容受性干扰胚胎着床.
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慢性心理应激对大鼠子宫内膜Hoxa-10表达的影响
目的 探讨慢性心理应激对大鼠子宫内膜Hoxa-10表达的影响.方法 取40只同日龄的雌性大鼠,观察组与对照组各20只.对照组在实验室群居饲养,观察组按浸笼模型制模.采用免疫组化S-P法,检测大鼠动情周期子宫内膜雌激素受体、孕激素受体及Hoxa-10的表达水平.结果 观察组动情间期孕激素受体表达较对照组下调(P＜0.05)、动情间期Hoxa-10表达较对照组下调(P＜0.05),Hoxa-10表达和孕激素受体表达呈正相关(直线正相关,r=0.777).结论 慢性心理应激能降低大鼠动情间期Hoxa-10表达,Hoxa-10表达缺陷可能是导致子宫容受性降低的重要原因之一.
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HOXA-10、 HOXA-11、 Esr2、 Pgr在控制性超排卵小鼠围着床期子宫内膜表达的研究
目的:检测同源框基因HOXA-10、HOXA-11以及雌激素受体Esr2、孕激素受体Pgr在控制性超排卵(COH)小鼠围着床期子宫内膜中的表达,探讨COH对子宫内膜容受性的影响.方法:将30只SPF级雌性昆明小鼠随机分为模型组(GnRH-a+HMG+HCG)和对照组(生理盐水),每组15只,造模成功后,计算子宫脏器指数,光学显微镜观察子宫内膜组织学变化；应用RT-PCR和Real-time PCR方法检测小鼠子宫内膜中HOXA-10、HOXA-11、Esr2、Pgr mRNA的表达.结果:模型组围着床期小鼠子宫脏器指数较对照组显著降低(P＜0.05),子宫内膜发育延迟,子宫内膜成熟度及厚度降低；模型组小鼠HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达较对照组显著下降(P＜0.05),而Esr2 mRNA表达显著升高(P＜0.05).结论:COH引起HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达下降,Esr2 mR-NA表达升高,致使围着床期内膜准备不足,子宫内膜容受性下降.
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内异症不孕患者子宫内膜组织中mir-29 c、mir-200 a、mir-145表达量及下游分子的评估
目的:研究内异症不孕患者子宫内膜组织中mir-29c、mir-200a、mir-145表达量并分析下游分子.方法:选择在本院就诊的子宫内膜异位症所致不孕的女性患者作为研究的不孕组、同期因男方因素所致不孕的女性患者作为研究的对照组.收集子宫内膜组织并检测mir-29c、mir-200a、mir-145、HOXA-10、HOXA-11及下游分子、黏附分子的表达量.结果:不孕组患者子宫内膜组织组织中mir-29c、mir-200a、mir-145的表达量均显著高于对照组;不孕组患者子宫内膜组织中HOXA-10、HOXA-11、整合素αvβ3、IGFBP-1、CD44V6、N-cadherin、FAK的mRNA表达量均显著低于对照组且与mir-29c、mir-200a、mir-145的表达量呈负相关,E-cadherin、FU T4的mRNA表达量均显著高于对照组且与mir-29c、mir-200a、mir-145的表达量呈正相关.结论:内异症不孕患者子宫内膜组织中高表达的mir-29c、mir-200a、mir-145能够调节HOXA-10、HOXA-11及下游分子、黏附分子的表达并影响子宫内膜容受性.
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HOXa-10在早孕小鼠子宫内膜中的表达
目的:探讨HOXa-10基因在小鼠胚胎着床过程中的作用.方法:分别应用FQ-PCR和免疫组化方法检测未孕及早孕第1、2、3、4、5、7天小鼠子宫内膜HOXa-10基因及蛋白的表达.结果:FQ-PCR测得随着小鼠妊娠天数的增加,子宫内膜HOXa-10基因表达量也逐渐增高,在孕4天达到峰值.免疫组化分析显示HOXa-10蛋白在子宫内膜的表达规律与FQ-PCR结果一致.结论:在小鼠胚胎着床过程中,HOXa-10在子宫内膜中高表达,可能对子宫内膜容受性变化有重要的调节作用.
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菟蓉补肾方对多囊卵巢综合征大鼠子宫容受性干预的研究
目的 研究菟蓉补肾方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫容受性的干预作用及其作用机制.方法 用来曲唑复制PCOS模型,考察菟蓉补肾方对PCOS大鼠体质量与子宫指数、子宫组织病理学与子宫内膜HOXA10基因的表达、血清性激素以及合笼后受孕等情况.结果 34～68 g/kg菟蓉补肾方可明显减缓PCOS模型大鼠体质量的异常增长,提高子宫指数,改善子宫的组织病理学,提高子宫内膜平均厚度,改善性激素失衡状态,提高子宫HOXA10基因的表达;合笼后,34～68 g/kg菟蓉补肾方能提高PCOS大鼠的受孕数与产仔数.结论 菟蓉补肾方可提高PCOS大鼠子宫容受性,其调节性激素水平及促进子宫HOXA10基因的表达是其作用机制之一.
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GnRH-a控制性超促排卵(COH)对小鼠着床期Hoxa-10基因表达的影响
目的:研究GnRH-a长方案控制性超促排卵(COH)对小鼠妊娠率、胚胎着床率及着床期HOXA-10基因表达的影响,探讨COH影响胚胎着床的机制.方法:实验动物随机分为实验组(GnRH-a +hMG+hCG)和对照组(生理盐水),雌、雄合笼后观察小鼠阴栓率,于着床期取小鼠子宫,观察妊娠率及胚胎着床数,计算着床率；应用RT-PCR、Real-time PCR方法及免疫组织化学法分别检测小鼠着床期子宫内膜Hoxa-10 mRNA及蛋白的表达.结果:实验组小鼠阴栓率及妊娠率均明显低于对照组(P＜0.01),实验组胚胎着床数高于对照组(P＜0.01),但胚胎着床率较对照组显著降低(P＜0.05),着床期小鼠子宫内膜Hoxa-10mRNA及蛋白表达下降,与对照组比较均有明显差异(P＜0.05).结论:GnRH-a长方案COH可引起小鼠着床期子宫内膜Hoxa- 10表达下降,导致子宫内膜容受性降低,从而影响小鼠妊娠及胚胎着床.
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H0xa-10在人月经周期分泌中期子宫内膜腺上皮表达下降
目的:对同源异型框基因Hoxa-10在月经周期各阶段人子宫内膜的表达形式进行观察.方法:通过原位杂交方法测定了5例增殖期、9例分泌期的人子宫内膜Hoxa-10的表达.结果:Hoxa-10基因在人子宫内膜均有表达.但在各周期阶段,其表达的强度和部位却有所不同.首次发现Hoxa-10在对应于着床期的分泌中期以及分泌晚期子宫内膜腺上皮的表达明显降低或不表达.结论:Hoxa-10在人类着床过程中可能具有重要功能.
