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流动相对灰树花多糖分子量测定影响的研究
目的:考察流动相对高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定灰树花多糖(GFP)相对分子质量(Mr)的影响因素.方法:采用HPGPC法分别以不同的流动相、盐浓度、pH值测定GFP的Mr,并对测定结果进行分析.结果:分别以纯水、0.02％ NaN3、0.1mol·L-1 NaNO3和0.1mol·L-1 Na2SO4溶液为流动相进行测定,GFP的Mr依次为822410、177520、29112和25066道尔顿;在0-0.025mol/L氯化钠溶液中Mr先急剧降低,然后随着盐浓度的增加,在0.1 -0.2mol/L氯化钠溶液中趋于平稳;在pH 3 -6时,Mr随pH增加而急剧增加,在pH 6 -9范围内变化较小,当pH为10时又稍微增加.结论:不同流动相、盐浓度、pH值对GFP的Mr测定结果有明显影响.
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灰树花多糖对CIF模型磷酸化p38MAPK表达的影响
目的:观察灰树花多糖对化疗相关性疲劳(CIF)模型疲劳程度的改善情况,并初步探讨其可能的机制.方法:6～8周龄SPF级C57BL/6小鼠60只随机分为4组,即空白组,模型组,灰树花多糖低剂量组(5 mg·kg-1)和灰树花多糖高剂量组(10 mg·kg-1),每组15只.将除空白组以外的小鼠腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-Fu,40 mg·kg-1),每天给药1次,连续5d,同时灰树花多糖低剂量组和灰树花多糖高剂量组给予不同剂量灰树花多糖灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,期间测量体重和抓力变化.第15天处死动物取材测血尿素氮、血乳酸和肝糖原含量及腓肠肌p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK) mRNA和磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的表达情况.结果:低剂量和高剂量的灰树花多糖均能明显增强CIF小鼠的抓力(P＜0.01);低剂量和高剂量灰树花多糖均可明显降低CIF小鼠运动后的血尿素氮值(P＜0.05);高剂量灰树花多糖可以明显降低CIF小鼠运动后的血乳酸值(P＜0.01);低剂量和高剂量灰树花多糖均可明显降低腓肠肌p38 MAPK mRNA和p-p38 MAPK蛋白的表达水平.结论:灰树花多糖可以有效改善化疗相关性疲劳,可能与下调p38 MAPK基因与p-p38 MAPK的表达有关.
关键词： 灰树花多糖 化疗 疲劳 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
灰树花多糖对脾虚小鼠T细胞亚群和Th1/Th2亚群的影响
目的观察灰树花多糖对脾虚小鼠T细胞亚群和Th1/Th2亚群的影响,探讨其免疫调节机制。方法健康雄性清洁级昆明小鼠48只随机分为空白组、脾虚组、阳性组(香菇多糖)及灰树花多糖低、中、高剂量组,每组8只,各给药组给予相应药物,滤菌后腹腔注射10 d,第11日处死动物。流式细胞术检测各组小鼠外周血CD3+、CD4+及CD8+T细胞百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的含量。结果高剂量灰树花多糖能明显升高脾虚小鼠外周血CD4+T淋巴细胞百分率(P＜0.05)；中、高剂量灰树花多糖可以明显升高脾虚小鼠的 CD4+/CD8+T 细胞比值(P＜0.01)。中、高剂量灰树花多糖可以明显升高脾虚小鼠 CD3+T 淋巴细胞百分率(P＜0.01)。灰树花多糖中、高剂量组可以明显升高脾虚小鼠血清 IFN-γ含量(P＜0.01),灰树花多糖高剂量组可以明显降低脾虚小鼠血清IL-4含量(P＜0.01)。结论灰树花多糖可改善脾虚时所致CD4+/CD8+T细胞比值降低,使Th2细胞向Th1细胞转化,从而达到治疗脾虚证的目的。
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超声波-微波协同提取灰树花多糖工艺研究
目的:为提高灰树花多糖的提取率,本文用超声波一微波协同提取仪优选灰树花多糖提取的佳工艺.方法:以时间、液流比和温度作为提取的变量因素,从中优选出佳的提取条件.结果:提取温度90%,时间10 min和液料比为30:1为本文灰树花多糖超声波-微波协同仪提取法的佳条件.结论:超声波-微波协同提取仪优选灰树花多糖提高了灰树花多糖的提取效率、提取纯度,缩短提取时间,明显降低提取成本,适合大规模生产,为市场的开发开辟新的提取手段.
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灰树花多糖咀嚼片中多糖含量测定
目的：建立简单易行的多糖含量测定方法，测定灰树花多糖咀嚼片中多糖的含量。方法：采用硫酸-蒽酮法，618nm测定，葡萄糖作对照。结果：线性关系为Y=0.1259X+0.1248（R2=0.9991），线性范围为0.0232～0.1392mg/ml，回收率99.6%，制剂中多糖含量73.0%。结论：该方法简单易行，能用于灰树花多糖咀嚼片中多糖的含量测定。
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灰树花多糖的免疫作用实验研究
目的:研究灰树花多糖在免疫方面的药理作用.方法:小鼠50只,分为空白对照组,阳性对照组和灰树花高、中、低3个剂量组,各组动物给药后,观察其对小鼠吞噬细胞的吞噬功能、对鸡红细胞致敏小鼠血清溶血素水平的影响,以及对小鼠免疫器官重量的影响.结果:灰树花多糖在180 mg/kg和120 mg/kg剂量下,可明显增强小鼠吞噬细胞的吞噬功能,增强小鼠的体液免疫能力,并能提高小鼠免疫器官的重量.结论:灰树花多糖具有提高机体免疫力作用.
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灰树花多糖协同顺铂对HeLa细胞凋亡的影响
目的：探讨灰树花多糖（ PGF）协同顺铂（ DDP）对HeLa细胞凋亡的作用。方法流式细胞仪测定不同药物处理组的凋亡率，苏木素-伊红（HE）染色观察凋亡细胞形态，免疫组化法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（ caspase）-3蛋白表达。结果流式细胞仪检测显示：PGF （0.05 mg／L）、DDP（1 mg／L）及联合组（ PGF 0.05 mg／L＋DDP 1 mg／L）作用24 h凋亡率分别为21.28％、23.60％和42.13％，与空白对照组比较差异显著（P＜0.05），协同作用组与各单药组比较差异显著（P＜0.05）；HE染色观察到凋亡细胞形态学改变；免疫组化显示，联合用药组与两单药组比较caspase-3蛋白表达上调。结论联合用药对HeLa细胞的凋亡率较单独用药组有明显提高，其作用机制可能与caspase-3蛋白表达上调有关。
关键词： 灰树花多糖 顺铂 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 -
灰树花多糖联合顺铂诱导HeLa细胞凋亡
目的：探讨灰树花多糖（PGF）联合顺铂（DDP）诱导HeLa细胞凋亡及其可能的分子机制。方法四甲基偶氮唑蓝比危法（MTT）检测细胞增殖抑制率， RT-PCR 法检测 survivin 和 caspase-3 mRNA 的表达。结果 MTT 法显示，联合用药抑制率均高于单药组（ P＜0.05）。 PGF 0.05 mg／L与DDP 1 mg／L联合作用24 h时，Q＞1.15； RT-PCR显示，联合用药组与两单药组比较 survivin mRNA 表达下调，caspase-3 mRNA 表达上调。结论联合用药对HeLa细胞的抑制率较单独用药组有明显提高。联合用药24 h时点，二者有协同作用。联合用药诱导HeLa细胞凋亡可能与凋亡基因survivin表达下调和caspase-3基因表达上调有关。
关键词： 灰树花多糖 顺铂 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 -
灰树花多糖联合顺铂对H22小鼠腹水瘤的抑制作用
目的 观察灰树花多糖(PGF)协同顺铂对H22腹水瘤小鼠的影响.方法 将建模后的80只小鼠随机分为4组,以PGF、顺铂和两者联合分别对小鼠用药.测量小鼠腹水量;记载小鼠生存时间;观察腹水细胞形态变化;检测小鼠腹膜渗透性;流式检测细胞凋亡率.结果 与对照组比较,联合组、PGF组及顺铂组均能减少小鼠的腹水量、延长小鼠生存期,提高细胞凋亡率(均P<0. 05),且联合组作用优于PGF组及顺铂组(P<0. 05,P<0. 01).与对照组及顺铂组比较,PGF组及联合组均能显著降低小鼠腹膜渗透性(均P<0. 05).结论 PGF与顺铂联合应用对H22小鼠腹水瘤具有显著抑制作用.
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灰树花多糖诱导HeLa细胞凋亡的体外实验
目的 观察灰树花多糖(PGF)对HeLa凋亡的影响.方法 采用MTT法研究PGF对HeLa细胞增殖的体外抑制作用,HE染色观察凋亡细胞形态,免疫组化法检测caspase-3蛋白表达.结果 PGF以时间和剂量依赖的方式抑制HeLa细胞的生长,HE染色观察到凋亡细胞的形态学改变,免疫组化检测到caspase-3蛋白高表达.结论 PGF促进HeLa细胞凋亡,其作用机制可能与caspase-3蛋白表达增高有关.
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灰树花多糖对人肺腺癌细胞株A549线粒体的影响
目的：检测人肺癌细胞株A549的细胞增殖、线粒体呼吸水平及线粒体膜电位，观察灰树花多糖对 A549线粒体的影响。方法CCK-8法检测A549细胞增殖，线粒体呼吸系统检测细胞线粒体呼吸水平，MitoTracker Red CMXRosb 线粒体荧光探针、罗丹明123（ Rh123）检测线粒体膜电位。结果 CCK-8检测细胞增殖显示0.4％的灰树花多糖即可抑制 A549细胞的增殖，0.6％灰树花多糖作用4 h 后，绝大多数 A549细胞死亡，其结果与对照组相比较有显著差异（P＜0.05）；线粒体呼吸系统结果显示，0.4％灰树花多糖作用于A549细胞4 h后细胞呼吸微弱；荧光显微镜观察细胞状态、线粒体荧光探针染色显示，0.4％、0.6％灰树花多糖组部分细胞凋亡，细胞收缩呈圆形，强荧光表达；流式细胞仪检测线粒体膜电位显示，0.4％、0.6％灰树花多糖组荧光信号增强。结论灰树花多糖可以抑制A549的增殖，其作用机制与线粒体膜电位的耗散相关。
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灰树花多糖对胃粘膜损伤的辅助保护作用试验
目的:研究灰树花多糖(GFP)对大鼠胃粘膜损伤的辅助保护作用.方法:将60只昆明种雄性大鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、GFP 低(15mg/kg)、(30mg/kg)、高(60mg/kg)剂量组,用灰树花多糖灌胃30d后,对大鼠实施解剖,测量大鼠胃粘膜损失程度指标.结果:显示灰树花多糖中、高剂量组能显著降低胃粘膜的损失程度,对大鼠体重无明显影响,表明灰树花多糖对胃粘膜损伤有显著的辅助保护作用.
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灰树花多糖联合顺铂对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡的影响
细胞凋亡作为当今生物医学研究中引人注目的领域之一,正以惊人的速度取得令人瞩目的进展.研究显示灰树花多糖可减少化学疗法的副作用.顺铂是目前应用广泛的化疗药物之一,本研究通过测定肿瘤抑制率、HE染色和免疫组化检测Caspase-3的表达,探讨灰树花多糖联合顺铂对肿瘤细胞凋亡的影响.
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灰树花多糖的复合酶-微波提取、超滤纯化及生物学评价
目的 研究灰树花多糖的复合酶解-微波萃取、超滤纯化工艺及纯化多糖的抗肿瘤活性.方法 灰树花子实体经微波萃取、复合酶解(木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的质量比为2:2:1)、活性炭脱色和超滤纯化得到具有不同相对分子量的灰树花多糖;采用正交试验结合响应模型,优化灰树花多糖的超滤纯化工艺;将110只荷瘤小鼠分成生理盐水组对照组和3个实验组,分别灌胃生理盐水,环磷酰胺、灰树花子实体原糖、超滤截留液和超滤透过液,研究其对荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用.结果 优化的灰树花多糖超滤工艺为:超滤温度35℃、多糖浓度20g/L,超滤压力0.12 MPa,pH为7,超滤时间20 min;灰树花子实体原糖GFP、超滤截留液GFP-Ⅰ和超滤透过液GFP-Ⅱ对荷瘤小鼠的肿瘤抑制率高分别可达40.23%、51.65%、36.24%.结论 建立的响应模型能很好拟合实验结果;超滤温度和多糖浓度之间、超滤温度与PH值之间、多糖浓度与超滤压力间的交互作用极为显著;超滤时间、超滤压力对试验指标有极为显著的影响.在相同剂量下,经100kDa超滤膜分离后的超滤截留液GFP-Ⅰ的肿瘤抑制率明显高于未经超滤处理多糖以及超滤滤过液多糖.
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灰树花多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用
目的:观察灰树花多糖(GFP)对糖尿病小鼠(DM)的血糖调节作用. 方法:将四氧嘧啶按180 mg/kg b.wt.剂量腹腔内1次性注射制作糖尿病小鼠模型.实验组分别按750、250、125 mg/kg b.wt. 三个剂量每天灌服GFP,正常对照组和实验对照组每日灌服相应体积的水,实验周期均为40 d.尾静脉采血测小鼠血糖值及糖耐量实验.结果:喂养40 d后,250 mg/kg.b.wt. 剂量组与实验对照组比较,血糖水平和血糖曲线下面积均明显降低(P＜0.05),750和125 mg/ kg b.wt. 剂量组与实验对照组比较无明显降低(P＞0.05).结论:灰树花多糖具有降低实验性糖尿病小鼠血糖的作用.
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灰树花菌丝体多糖的分离纯化和理化性质研究
对灰树花菌丝体粗多糖进行分离纯化和结构鉴定,并检测其活性.采用大孔树脂进行脱色,紫外扫描、红外、薄层层析、以及高效液相和气相色谱等进行纯度和结构鉴定,荷瘤小鼠检测抗肿瘤活性.结果表明弱极性和非极性的大孔树脂对色素的吸附量大,解吸容易,适用于灰树花菌丝体粗多糖的脱色,同时利于色素的收集及进一步研究.分离所得的多糖为白色粉末状,为a-葡聚糖,对S180肿瘤有明显抑制作用.
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灰树花多糖胶囊制剂的免疫调节实验研究
探讨了灰树花多糖胶囊制剂对小鼠的免疫调节和受8Gy60Co-γ射线照射的防护作用.分别用灰树花多糖胶囊制剂的剂量为0.13,0.27,0.81 g和水为对照共4组处理,经灌胃考察免疫调节和抗辐射的作用.结果:超过0.27g的剂量时,可以提高小鼠的足跖肿胀度、抗体细胞生成数、平均存活时间和30 d存活率及提高白细胞总数,有很好的免疫调节和辐射保护作用.
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灰树花多糖的研究进展
灰树花多糖是从贝叶多孔菌的子实体或菌丝体中分离到的一种真菌多糖,近20年的研究表明其具有显著的抗肿瘤、降血糖、抗肝炎、抗HIV病毒以及改善免疫系统功能等功效,现已被开发成多种保健品.文章综述了国内外有关灰树花多糖分离纯化以及相关生物活性的研究工作.
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灰树花胞内多糖抗辐射作用的初步研究
利用深层培养方法获得菌丝体,经热水提取后获得灰树花的菌丝体胞内多糖.以之为材料,研究了其对60Co-γ辐照小鼠白细胞数目以及存活率的影响,发现灰树花胞内多糖具有明显的促进辐照小鼠白细胞数目恢复以及提高存活率和存活时间的作用,此结果说明灰树花胞内多糖具有一定的抗辐射作用.
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灰树花液体深层培养多糖组份的分析鉴定研究
研究了液体深层培养的灰树花多糖组份和结构.应用气相色谱分析测得灰树花胞外多糖(HPT1)和灰树花胞内多糖(HPT2)的组份均含有葡萄糖(Glu)、甘露糖(Man)和木糖(Xyl);其摩尔比HPT1为1.00∶0.27∶0.11,HPT2为1.00∶0.35∶0.26.运用隧道扫描显微镜(STM)对多糖进行了结构的扫描研究,结果表明:HPT2可以清楚地看出主链上带有环状侧链,HPT1不清楚,其大小和结构与HPT2均有很大的差异.
