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表皮黑素细胞专用培养基组分与细胞外信号调节激酶蛋白磷酸化关系初步观察
目的 了解表皮黑素细胞专用培养基HU16中维持细胞生长的主要物质人重组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、FBS和环腺苷酸激动剂与细胞外信号调节激酶(ERK1/2)蛋白磷酸化的关系.方法 从环切包皮原代培养人表皮黑素细胞,用western blot检测去bFGF、去FBS以及去环腺苷酸激动剂培养基培养后ERK1/2蛋白磷酸化水平的改变.结果 去bFGF和去FBS处理后,表皮黑素细胞ERK1/2蛋白的磷酸化水平明显下降(P<0.05),恢复完全培养基培养后0.5 h,ERK1/2蛋白的磷酸化水平即重新上升至处理前水平.去环腺苷酸激动剂处理后,ERK1/2蛋白的磷酸化水平无明显改变.结论 HU16培养基中bFGF和FBS的浓度可影响体外培养的人表皮黑素细胞中ERK1/2蛋白的磷酸化水平.
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研究表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞在接触性共培养体系中的相互作用
目的:研究分析表皮黑素细胞和毛囊角质形成细胞在接触性共培养体系的建立,以及相互作用。方法用胰酶融化游离毛囊与包皮的表皮,获得纯度角度高的角质形成细胞与黑素细胞,第三代毛囊角质形成细胞在6孔板中接种,2 d以后按照表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞之间的比例,按照1∶2、1∶10、1∶20的比例接种黑素细胞,其中在1∶10的比例中,加入-黑素细胞刺激素,在干预6 d以后,用NKI/beteb作一抗。结果以1∶10的接种比例,很符合表皮基底层的黑素细胞与角质形成细胞比例;但是在1∶2情况下可获得数量多的表皮黑素细胞。而在1∶20情况下可以发现角质细胞、黑素细胞之间的联系。结论表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞在接触性共培养体系下,非常适合用于人色素系统方面的研究。
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α-MSH和MC-1R对表皮黑素细胞的调控作用
获得性皮肤色素沉着缘于自体皮片移植后、皮肤创伤后(烧伤、外伤等)、皮肤感染后的色素过度沉着,是整形外科一种常见的就诊现象,国内外学者尝试了许多治疗方法,但效果均不满意.究其原因是对皮肤色素沉着的机制还不完全清楚.目前的研究表明色素沉着涉及到黑素细胞的黑素合成、黑素小体的转运及代谢等环节.而黑素细胞的黑素合成又有多种因素参与调节如α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulating hormone,α-MSH)和促肾上腺皮质激素 (adrenocorticotropic, ACTH)的水平、黑皮素受体的表达、黑素细胞内传导信号系统的激活、紫外线、多种细胞因子(ET-1,IL-1,TGF-β)等.笔者拟就α-MSH与MC-1R对表皮黑素细胞的调控作一综述.
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人表皮黑素细胞、毛囊无色素黑素细胞和鼠黑素瘤细胞的原子力显微镜观察
目的:观察培养的人表皮黑素细胞、毛囊无色素黑素细胞和S91鼠黑素瘤细胞的形态结构.方法:培养并纯化来自正常人包皮的黑素细胞以及来自毛囊的无色素黑素细胞,同时复苏S91细胞株,传代后接种到内置云母片的培养板中,细胞贴附到云母片上后固定,用原子力显微镜扫描观察.结果:正常人表皮黑素细胞有3级分支,在主干及分支的顶端和侧缘可见膨出的球形结构.鼠黑素瘤细胞仅有很短的2级分支,在2级树突近端可见黑素小体.毛囊无色素黑素细胞只有1级树突,并只在树突近端有少数黑素小体.结论:表皮黑素细胞在形态上比黑素瘤细胞、毛囊无色素黑素细胞更成熟,有更多的黑素颗粒从树突的顶端和侧缘以胞吐的形式被输出.
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打包固定法在白癜风自体表皮移植中的应用
近十余年,负压吸引起疱法对白癜风进行自体表皮移植在国内得到广泛应用,其手术成功率较高,但在颈部、腔口附近、关节等活动部位,由于表皮难以得到有效的固定,导致移植表皮与受植床之间产生空隙,表皮黑素细胞成活少,手术成功率低.我们采用打包固定法来固定移植表皮,取得明显疗效,报道如下.
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中药赤菟酊治疗白癜风临床疗效观察
酪氨酸酶(TYR)不仅是黑素细胞(MC)黑素生成的主要限速酶,还是黑素细胞分化成熟的一个特征性标志.黑素细胞破坏是白癜风发生皮肤脱色斑的主要原因.白癜风皮损复色有赖于白斑区残存表皮黑素细胞黑素生成能力增强以及毛囊外毛根鞘无功能黑素细胞活化.使用上调酪氨酸酶活性加速黑素生成的药物可促进黑素细胞分裂、增殖,提高白癜风的治疗效果.为了寻找治疗白癜风的有效药物和方法,我们选择上调酪氨酸酶活性的中药赤芍、川芎、菟丝子、刺蒺藜、补骨脂等组成中药复方,采用其乙醇提取液(赤菟酊)外用治疗白癜风并与对照组外用0.1%8-MOP酊比较,取得满意疗效,报道如下.
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驱虫斑鸠菊黄酮促人表皮黑素细胞黑素合成及其机制的研究
目的:观察驱虫斑鸠菊黄酮对体外培养的人表皮黑素细胞(MC)黑素合成和酪氨酸酶活性的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法:噻唑兰比色法(MTT)测定药物对细胞增殖率的影响,选择高、中、低3种浓度(30、10、3μg/ml)的驱虫斑鸠菊黄酮作用体外培养的人表皮黑素细胞,观察对黑素细胞的形态、酪氨酸酶活性、黑素含量的影响.免疫印迹法测定药物作用前后Mc酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TRP1)和酪氨酸酶相关蛋白2(TRP2)蛋白表达的变化.结果:≥90μg/ml驱虫斑鸠菊黄酮可明显抑制MC的增殖;试验浓度范围内可明显促进MC黑素合成和酪氨酸酶活性增加,并以浓度依赖方式促进TRP-1的蛋白表达,但对TYR、TRP-2的表达没有影响.结论:驱虫斑鸠菊黄酮在体外能直接刺激表皮MC黑素合成,上述变化可能通过促进TRP-1的蛋白表达和TYR的翻译后修饰作用来完成.
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黑素细胞肿瘤
黑素细胞肿瘤可由表皮黑素细胞、痣细胞或真皮成黑素细胞组成.黑素细胞起源于神经嵴,在特定的发育阶段,黑素细胞干细胞从神经嵴出发,沿着不同的路线,至皮肤、毛囊、眼、耳蜗、软脑膜定居,形成黑素细胞、毛囊黑素细胞及脉络膜细胞等.一般来说,黑素细胞在胚胎的4~6周开始向表皮移动并于第7周开始进入表皮.
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308nm激光联合胡椒碱对表皮黑素细胞中黑素合成及酪氨酸相关蛋白水平的影响
目的 研究308nm激光联合胡椒碱对表皮黑素细胞中黑素合成及酪氨酸相关蛋白水平的影响,初步探讨不同分组对黑素合成的作用机制.方法 培养的表皮黑素细胞分别以308nm激光联合胡椒碱(联合干预组)、308nm激光组、胡椒碱组、阳性对照组及空白对照组作用24h,72h及120h后,测定细胞黑素含量及酪氨酸相关蛋白(TRP-1,TRP-2)活性(激光共聚焦荧光定量分析法).结果 联合干预组、308nm激光组、胡椒碱组、阳性对照组均不同程度促进黑素含量及TRP-1,TRP-2活性的增高.其中以联合干预组促进作用强.结论 308nm激光联合胡椒碱有明显促进表皮黑素细胞黑素合成作用.