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人参皂甙Re抗大鼠急性缺血-再灌流心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达
目的观察人参皂甙Re抗急性缺血再灌流心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Bad和Fas基因蛋白表达,探讨人参皂甙Re抑制心肌细胞凋亡的可能机制.方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支,建立大鼠缺血-再灌流动物模型;采用透射电镜、缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞,利用光学显微镜进行细胞计数;免疫组织化学检测Bcl-2、Bax、Bad和Fas基因蛋白的表达,并利用图像分析系统测量平均光密度值进行定量分析.结果①假手术组未发现心肌凋亡细胞.缺血-再灌流组心肌凋亡细胞数为(134.45±45.61)个/视野,Re治疗组(90.66±19.22)个/视野,两组间差异有显著性意义(P＜0.01).②免疫组织化学检测发现缺血-再灌流组及Re治疗组Bcl-2、Bax、Bad和Fas基因蛋白的表达较假手术组明显增加(P＜0.05),Re治疗组Bcl-2的表达与缺血-再灌流组比较差异无显著性意义(P＞0.05),而Bax、Bad、Fas的表达明显下降(P＜0.05),人参皂甙Re治疗组Bcl-2/Bad、Bcl-2/Bad、Bel-2/Fas比值均较假手术组与缺血-再灌流组明显增大.结论人参皂甙Re治疗可以抑制急性缺血再灌流诱导的心肌细胞凋亡,其作用机制可能是抑制了促凋亡基因Bax、Bad、Fas的表达,从而使Bcl-2/Bax、Bcl-2/Bad、Bcl-2/Fas比值增大.
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薄层扫描法测定三七消痔栓中人参皂甙Re的含量
采用双波长薄层扫描法测定中成药三七消痔栓中人参皂甙Re的含量,平均回收率为99.28%,RSD为0.64%.本方法简便,灵敏度高,重现性好,可作为该药的质量控制指标之一,也可为含三七类中成药栓剂的定量作参考.
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龟芪参口服液中人参总皂甙的含量检测分析
目的：检测龟参口服液中人参总皂甙的含量。方法：采用大孔吸附树脂吸附人参总皂甙等成分，后经梯度洗脱处理，显色后测定人参总皂甙含量。结果：先用20％乙醇洗脱，继以70％乙醇洗脱，实验结果较满意，定为正文的含量测定方法。结论：本法准确率高，分析快速。回收率为98.16％。
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芪参胶囊质量标准研究
目的:建立芪参胶囊的质量标准.方法:用HPLC法测定制剂中人参皂苷Rg1和Re的含量.结果:人参皂甙Rg1在2.6μg～8.84μg范围内呈良好的线性关系,R=0.9997;人参皂甙Re在2.120μg～7.208μg范围内呈良好的线性关系,R=0.9990.结论:本方法简便可行,灵敏准确,专属性强,重复性好.
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红参组方的注射剂中人参皂甙Rg1、Re、Rb1的含量测定
目的:测定不同的含红参组方的注射剂中人参皂甙Rg1、Re和Rb1的含量.方法:采用反相高效液相色谱法.结果:人参皂苷Rg1、Re和Rb1在4～400 μg·ml-1、4～400 μg·ml-1和8～800 μg·ml-1峰面积与其浓度具有良好的线性关系.平均加样回收率分别为97.10%～108.91%(人参皂甙Rg1),94.78%～103.00%(人参皂甙Re)和102.71%～106.83%(人参皂甙Rb1).结论:该方法简便、快速、准确,可同时测定含红参组方注射剂中人参皂甙Rg1、Re、Rb1的含量.
关键词： 红参组方注射液/分析 人参皂甙Rg1 人参皂甙Re 人参皂甙Rb1 -
人参皂甙Rg1,Re对β-淀粉样蛋白诱导原代培养海马及皮质神经元损伤的保护作用
目的:研究人参皂甙Rg1,Re对β-淀粉样蛋白(β-AP)诱导原代培养海马及皮质神经元损伤的影响.方法:测定神经元细胞培养上清中的乳酸脱氢酶(LDH)释放度来检测细胞的受损程度.结果:经终浓度为0.4 μmol/L的β-AP诱导损伤12 h, 神经元细胞培养上清中的LDH释放度明显升高;人参皂甙Rg1,Re在10,20 μmol/L浓度时均能使LDH的释放度显著减少.结论:两种人参皂甙在一定剂量范围内能对抗β-AP诱导的神经元损伤,表现出对神经元一定程度的保护作用.
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人参皂甙Re和人参总皂甙对运动性疲劳大鼠下丘脑Ach、DA、5-HT及含GABA量的影响
目的 观察人参皂甙Re和人参总皂甙对运动性疲劳模型大鼠中枢神经递质乙酰胆碱(Ach)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)和γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机均分为人参皂甙Re组、人参总皂甙组、模型组和空白组,给药组和模型组大鼠在灌胃1 h后进行中等运动强度的水平跑台运动,每天1次,连续14 d.末次运动后即刻处死大鼠,迅速取下丘脑,色谱法测Ach、DA、5-HT和GABA含量.结果 与模型组比较,人参皂甙Re和人参总皂甙组大鼠下丘脑Ach和DA的含量显著性升高,而5-HT和GABA的含量有显著性降低;与人参皂甙Re组相比较,人参总皂甙组大鼠下丘脑Ach、5-HT和GABA有显著性降低,而DA含量有显著性升高.结论 人参皂甙Re及人参总皂甙均可对下丘脑神经递质含量产生影响,从而达到抗运动性疲劳效应,但人参总皂甙的效果更优,尤其能更好地改善运动性疲劳下中枢保护性抑制的状态.
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升白扶正口服液的质量分析研究
目的 通过实验制定升白扶正多糖口服液的质量标准.方法 用薄层层析法鉴别口服液中人参皂甙的Re和黄芪甲甙,并通过薄层扫描法测定二者在口服液中的含量.结果 此分析方法线性良好.人参皂甙Re的平均加样回收率为99.20%,RSD为1.13%.黄芪甲甙的平均加样回收率为97.73%,RSD为1.50%.结论 方法较简便可靠.薄层层析主斑点分离良好.结果 稳定,可用于升白扶正口服液的质量控制.
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人参皂甙Re对高儿茶酚胺大鼠心肌损伤的保护作用
目的 探讨人参皂甙Re (GSRe)对高儿茶酚胺大鼠心肌损伤的保护作用.方法 采用异丙基肾上腺素(ISO)腹腔注射方法建立高儿茶酚胺大鼠模型.18只实验大鼠随机分为对照组、ISO组和GSRe治疗组(GSRe组).记录各组大鼠心电图变化.取心肌组织分别行透射电镜检查、原位缺口末端标记(TUNEI)法检测和Fas,Bcl-2基因蛋自表达的免疫组织化学检测.结果 与对照组比较,ISO组心率显著增快(P<0.01),且有室性心律失常发生;电镜下可见心肌细胞凋亡,心肌细胞凋亡指数及Fas,Bel-2基因蛋白表达阳性指数均增加(Pa<0.01).GSRe组较ISO组心率减慢.可逆转室性心律失常为窦性心律电镜下核染色质边集缩缓解,心肌细胞凋亡指数撇著下降(P<0.01),Fas基因蛋自表达阳性指数显著下降(P < 0.01),Bel-2从因蛋自表达阳性指数掀著升高(P<0.01).结论 GSRe可拮抗ISO诱分的大鼠心动过速,逆转室性心律失常,同时可下调Fas基因表达、上调Bcl-2基因表达,抑制大鼠心肌细胞凋亡.GSRe对高儿茶酚胺大鼠心肌损伤有保护作用.
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运动性疲劳大鼠中枢神经递质改变及人参皂甙Rb1和Re抗疲劳的实验研究
目的:观察人参皂甙Rb1和人参皂甙Re对运动性疲劳大鼠中枢神经递质DA、5-HT、Ach和GABA含量的影响,探讨其抗运动性疲劳的机制.方法:将40只雄性SD大鼠,随机均分为人参皂甙Rb1组、人参皂甙Re组、模型组和空白组,分别灌胃给药,取下丘脑组织制备标本,检测神经递质DA、5-HT、Ach和GABA的含量.结果:人参皂甙Rb1和人参皂甙Re均能有效提高DA和Ach的含量(P＜0.05-P＜0.01),降低下丘脑GABA和5-HT的含量(P＜0.01).与人参皂甙Re比较,人参皂甙Rb1在降低GABA和5-HT含量、提高DA含量方面效果更优(P＜0.05),但在提高Ach含量方面效果相对较差(P＜0.05).结论:人参皂甙Rb1和人参皂甙Re均可通过不同靶点具有不同程度的改善运动性疲劳状态下中枢神经递质紊乱的情况,达到抗运动性疲劳的效果.
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程氏药酒质量标准研究
采用薄层色谱法对程氏药酒中人参、黄芪、白芍进行定性鉴别,并采用薄层扫描法对人参中人参皂甙Re的含量进行了测定.方法简便,专属性及重现性好,可作为该制剂的质量控制标准.
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人参皂甙Rb1与Re抗大鼠实验性缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达
目的观察人参皂甙Rb1和Re对缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Bad、Fas基因蛋白表达的影响,探讨人参皂甙Rb1和Re抑制心肌细胞凋亡的可能机制. 方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支(LAD),建立大鼠缺血再灌注动物模型;采用透射电镜、缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞,利用光学显微镜进行细胞计数;免疫组织化学检测Bcl-2、Bax、Bad、Fas基因蛋白表达,并利用图象分析系统测量平均光密度值进行定量分析. 结果①假手术组未发现心肌凋亡细胞;缺血再灌注组心肌凋亡细胞数为134.45±45.61个/视野,Rb1治疗组为51.65±13.71个/视野,Re治疗组为90.66±19.22个/视野,3组间有显著差异(P<0.01);②缺血再灌注组、Rb1治疗组及Re治疗组Bcl-2、Bax、Bad、Fas基因的表达均较假手术组明显增加(P<0.05),Rb1治疗组和Re治疗组Bcl-2的表达与缺血再灌注组比较无明显差异(P>0.05),而Bax、Bad、Fas的表达明显下降(P<0.05),Rb1抑制Bax基因蛋白表达的效应较Re更为明显(P<0.05).Rb1治疗组和Re治疗组Bcl-2/Bad、Bcl-2/Bad以及Bcl-2/Fas比值均较假手术组及缺血再灌注组明显增加,Rb1治疗组Bcl-2/Bax比值较Re治疗组增大. 结论心肌缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡,人参皂甙Rb1和Re治疗则可以显著减少缺血再灌注心肌细胞的凋亡,其机制可能是抑制了促凋亡基因Bax、Bad、Fas的表达,并使Bcl-2/Bax、Bcl-2/Bad以及Bcl-2/Fas比值增大.Rb1抑制心肌细胞凋亡的作用较Re更好.
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人参皂甙Re对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及Fas基因表达的影响
目的:观察人参皂甙Re(以下简称Re)对缺血再灌注心肌细胞凋亡及Fas基因表达的影响,探讨Re抑制心肌细胞凋亡的可能机制.方法:结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支,建立大鼠缺血再灌注动物模型;采用透射电镜、缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞,利用光学显微镜进行细胞计数;原位杂交及免疫组化分别检测Fas基因mRNA及蛋白的表达,并利用图像分析系统测量阳性表达区域平均光密度值,进行定量分析.结果:①透射电镜发现缺血再灌注组缺血区出现心肌凋亡细胞,假手术组未发现心肌凋亡细胞;②缺血再灌注组心肌细胞凋亡数为(134.45±45.61)个/视野,Re治疗组细胞凋亡数(90.66±19.22)个/视野,两组间差异有非常显著性意义(P<0.01);③原位杂交及免疫组化检测均发现Fas基因的表达缺血再灌注组较假手术组明显增加(P<0.01),Re治疗组较缺血再灌注组明显下降(P<0.05).结论:心肌缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡,Re治疗则可以显著减少缺血再灌注心肌细胞的凋亡.Re通过抑制Fas基因的表达而抑制心肌细胞凋亡.
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人参皂甙Re对急性缺血再灌注心肌细胞凋亡及fas基因表达的影响
目的研究人参皂甙Re对急性缺血再灌注心肌细胞凋亡及fas基因表达的影响,探讨人参皂甙Re抑制缺血再灌注心肌细胞凋亡的分子机制.方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支(LAD),建立大鼠急性缺血再灌注动物模型.30只大鼠分3组(每组10只):人参皂甙Re组,缺血再灌注组和假手术组.用透射电镜和TUNEL 法检测心肌细胞凋亡,并用光学显微镜进行凋亡细胞计数,免疫组化法检测Fas蛋白表达,利用图像分析系统检测阳性结果的平均吸光度(A)值进行定量分析.结果心肌细胞的凋亡数在缺血再灌注组、假手术组和人参皂甙Re 治疗组每视野分别为134.45±45.61、0.18±0.09和90.66±19.22,各组间的心肌细胞凋亡数有显著差异 (P<0.05).缺血再灌注组、假手术组和人参皂甙Re 治疗组的Fas蛋白的平均A值分别为:0.13±0.03、0.06±0.01和0.07±0.01 ,人参皂甙Re治疗组与缺血再灌注组相比差异有显著性意义(P<0.05).结论人参皂甙Re能显著抗急性缺血再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡,抑制急性缺血再灌注诱导心肌细胞内Fas蛋白表达可能是作用机制之一.
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人参皂甙Re对异丙肾上腺素致家兔室性心律失常的保护作用
目的 探讨人参皂甙Re对异丙肾上腺素致家兔实验性室性心律失常的保护作用.方法 异丙肾上腺素诱导产生触发性室性心律失常模型,家兔分为正常对照组、模型组、阳性对照组(异搏定0.4 mg/kg)和实验组(人参皂甙Re 20,10或5 ms/kg),观察转为窦性节律持续时间,实验结束取左心室部分心肌组织行光学显微镜和电子显微镜检查.结果 ①异博定组维持窦性节律的时间为177.00±5.66 s,人参皂甙Re 20,10,5 mg/kg处理组维持窦性节律的时间分别是177.83±5.31 s、21.00±2.83 s、4.50±1.64 s.②心肌病理切片表明人参皂甙Re对持续室性心律失常的心肌有显著保护作用.结论 人参皂甙Re可用于临床触发性室性心律失常的治疗,可拮抗儿茶酚胺类药物对心肌的毒性作用.[中国当代儿科杂志,2009,11(5):384-388]
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人参皂甙Re对家兔触发性室性心律失常血流动力学的影响
目的:探讨人参皂甙Re对家兔触发性室性心律失常血流动力学的影响.方法:异丙肾上腺素诱导产生模型,家兔分为正常对照组、模型组、阳性对照组(异搏定0.4 mg/kg)和实验组(人参皂甙Re 20、10、5 mg/kg),观察转为窦性节律持续时间和血流动力学指标变化.结果:(1)异博定组维持窦性节律时间为(177.00±5.66)s,治疗后1、3、5 min血流动力学各指标与模型组同时段相比,有显著性下降.(2)人参皂甙Re各组维持窦性节律时间分别是(177.83±5.31)s、(21.00±2.83)s、(4.50±1.64)s,治疗后1、3、5 min血流动力学各指标与模型组同时段相比,均有显著性下降,呈剂量依赖性,呈负相关.结论:人参皂甙Re可用于触发性室性心律失常治疗,对血流动力学各指标影响呈剂量依赖性.
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用TK基因和HGPRT基因突变试验检测人参皂甙Re的抗诱变性
背景与目的:用TK基因和HGPRT基因突变试验评价人参皂甙Re的抗诱变性,为其进一步的开发利用提供资料.材料与方法:设人参皂甙Re 12.5、25、50、100 μg/ml分别与致突变物甲基磺酸甲酯(MMS)5 μg/ml同时处理TK6细胞的实验组,同时设溶剂对照组(1%DMSO),阳性诱变对照组(MMS 5ug/ml)和抗诱变阳性对照组(VitC+MMS),各组处理TK细胞4 h后,采用微孔板法检测TK和HGPRT两个位点的突变频率.结果:随着剂量的增加,人参皂甙Re拮抗MMS诱变性的作用增大,表现在TK和HGPRT两个位点突变频率均较阳性诱变对照组降低,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:人参皂甙Re具有拮抗MMS诱导的TK基因和HGPRT基因突变的作用;TK基因突变试验比HGPRT基因突变试验更为敏感.
关键词： 人参皂甙Re TK6细胞 TK基因突变试验 HGPRT基因突变试验
