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广东省梅州市24450例女性HPV感染与基因分型
目的 探讨梅州地区女性HPV感染情况与基因亚型分布,为该地区宫颈癌的预防和治疗提供数据资料.方法 运用导流杂交基因芯片技术对24 450例就诊女性的宫颈脱落细胞标本进行HPV基因分型检测,并对HPV基因亚型感染情况进行对比分析.结果 24450例标本中检测出HPV阳性者3 922例,感染率为16.04％.在阳性标本中,HPV高危型阳性率高的前3位依次是HPV-16(30.37％)、HPV-52(17.77％)和HPV-58(15.53％),低危型以HPV-CP8304为主(5.61％).30 ～ 50岁是HPV感染的高峰年龄段,HPV阳性检出率在各年龄组的差异有统计学意义(P ＜0.001).结论 梅州地区就诊女性常见的HPV亚型是16型,30 ～50岁是HPV感染高发人群,HPV基因分型对宫颈癌的预防和治疗具有积极的指导意义.
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潮汕地区食管癌血清标本中HPV的抗体检测
目的 检测潮汕地区食管癌患者血清中人乳头瘤病毒(HPV)相关抗体的存在情况,为我国食管癌患者的监测提供参考数据.方法 分别构建包含HPV16型E6/E7和HPV18型E6/E7基因的pSecTag重组载体,转染293细胞后分别表达HPV16型E6/E7和HPV18型E6/E7的融合蛋白,以融合蛋白为抗原,用免疫酶法检测76份食管癌患者血清及149份正常体检人群血清中HPV的IgG抗体;用L1做抗原的ELISA法检测相同样本的血清.结果 使用免疫酶法,E6/E7融合蛋白做抗原在所有血清标本中只有一份食管癌患者血清显示免疫阳性;使用ELISA法,L1做抗原,76例食管癌患者中有37例检测到抗体IgG阳性反应,阳性率为48.7％,149例体检人群中,79例有抗体IgG阳性反应,阳性率为53.0％.经统计分析二者无显著性差异.结论 HPV相关抗体检测方法尚不能作为食管癌的筛查工具,HPV感染的血清学检测用于食管癌的诊断有待于进一步的研究.
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HPV16型E7C亚基因与共激活分子B7-1协同诱导E7特异性CTL研究
目的 利用去除E7的转化活性而保留其抗原性的E7C亚基因研制防治HPV16相关疾病的疫苗,并进一步探索利用B7-1研制更佳活化细胞免疫的加强疫苗. 方法 用PCR方法扩增获得E7C后,插入真核表达质粒获得pLNCE7C,体外真核细胞中证实其具有表达能力后,在C57BL/6小鼠后腿肌肉内直接进行裸DNA接种免疫,或与pLNCmB7-1联合免疫接种,用51Cr释放法体外分析经免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性. 结果 经免疫小鼠获得较好的E7特异性CTL活性;若E7C与小鼠B7-1的表达质粒联合接种,则活性明显得到加强. 结论 E7C可以用于HPV16 DNA疫苗研制,B7-1具有推广应用价值.
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人乳头瘤状病毒疫苗
小儿喉乳头状瘤与人乳头状瘤病毒6、11型感染有关,一种预防宫颈癌的疫苗产生的免疫作用不仅针对导致官颈癌的常见病毒业型并且包含了与小儿喉乳头状瘤相关的病毒亚型,应用此类疫苗必将会为防治人乳头状瘤病毒6、11亚型感染及其相关疾病提供更加有效的方法.
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人乳头瘤病毒分型长链寡核苷酸芯片的制备
目的制备用于人乳头瘤病毒(HPV)初步检测和分型的长链寡核苷酸基因芯片.方法对4型HPV(6,11,16,18)全基因组序列进行分析,设计特异性高、熔解温度(Tm)和GC含量相近的HPV型特异性长链寡核苷酸探针,点样制备成寡核苷酸基因芯片,利用限制性显示技术对HPV样品进行荧光标记,并将标记好的样品与芯片杂交,以了解寡核苷酸基因芯片在HPV病毒检测和分型中的作用.结果荧光标记的HPV样品与多个型特异性HPV探针杂交有明显的荧光信号,可以根据杂交结果进行初步的分型检测.结论采用设计合理的60mer寡核苷酸基因芯片可以从基因水平实现对HPV的检测和分型.
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不典型鳞状细胞和低度鳞状上皮内病变中高危型人乳头瘤状病毒检测的作用
目的:探讨高危型人乳头瘤状病毒(human papillomavirus , HPV)检测对宫颈液基细胞学诊断为不能明确意义的不典型鳞状细胞(atypical squamous cells undetermined significance, ASC-US)和低度鳞状上皮内病变(low squamous intraepithelial lesion , LSIL)的分流管理作用.方法:对940例宫颈液基细胞学检查结果为ASC-US或LSIL的患者采用二代杂交捕获(hybird capture Ⅱ, HC-Ⅱ)方法检测高危型HPV DNA,并在阴道镜指导下进行宫颈活检.结果:940例中,ASC-US 497例,LSIL 443例.行宫颈活检病理诊断,慢性宫颈炎417例,宫颈湿疣315例,宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial lesions, CIN)1级124例,CIN2 级65例,CIN3级或宫颈浸润癌19例.在宫颈细胞学异常的ASC-US和LSIL组中,高危型HPV阳性率分别是59.6%和84.9%.在ASC-US和LSIL组HPV阴性时CIN2级及其以上病变(CIN2级,CIN3级或宫颈浸润癌)检出率为0.5%和6.0%,HPV阳性时检出率是8.8%和14.1%,HPV阳性时CIN2级及其以上病变检出率高于HPV阴性患者,差异具有统计学意义.在ASC-US组中,高危型HPV检测对CIN2级及其以上病变的阴性预测值达99.5%;当高危型HPV DNA检测结果在1～9.99时,CIN2级及其以上病变仅占1.6%;在10以上时,CIN2级及其以上病变占10.7%.结论:宫颈细胞学为ASC-US的患者如果高危型HPV阳性,检出CIN2级及其以上病变的概率增加,并且高危型HPV检测的阴性预测值高,在ASC-US患者中,随着HPV载量增高,检出CIN2级及其以上病变的概率随之增高.高危型HPV检测和病毒载量有助于ASC-US的分流管理,而对LSIL无分流管理作用.
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女性类风湿关节炎患者中人乳头状瘤病毒-16的感染
类风湿关节炎( rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性侵蚀性关节病变为主的全身性自身免疫性疾病,以女性多发,男女患者比例约为1∶3,病理表现为滑膜炎并出现关节的软骨和骨破坏,终可导致关节畸形与功能丧失,严重影响着患者的生活质量[1].目前类风湿关节炎的发病机制尚未明了,许多证据显示感染可能是RA发病的重要诱因.
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高危型人乳头瘤病毒整合态与宫颈病变相关性研究
目的 通过随访1年观察整合态高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)进展为宫颈高级别病变的患病率,探讨宫颈上皮中整合态HR-HPV与宫颈病变发生发展的关系.方法 利用实时荧光聚合酶链反应(PCR)方法检测96例HR-HPV组和宫颈上皮内瘤变(CIN Ⅰ)组中宫颈脱落细胞中HR-HPV DNA的整合状态.结果 ①2组进展为高级别的宫颈病变的患病率比较,差异有统计学意义.②在宫颈病变有关因素的分析中,整合态HR-HPV感染时发生宫颈病变的危险度增加.结论 整合态HR-HPV感染为引起宫颈高度恶性病变的主要致病因素.
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重组人乳头瘤病毒CTL表位疫苗的构建与表达
目的:构建人乳头瘤病毒的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位疫苗并在大肠杆菌中表达.方法:应用多轮PCR的方法合成CTL表位基因序列,将其亚克隆入pET28a表达载体中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白质,用Western blotting对重组蛋白进行鉴定.结果:采用计算机表位预测的方法选取HPV6、11、16型的CTL表位,通过5轮PCR人工合成人乳头瘤病毒CTL表位疫苗的基因片段HPVepi,用亚克隆的方法构建了重组表达质粒pET28a-Tat-HPVepi,并在大肠杆菌高效表达了该重组蛋白质,经Western blotting鉴定显示出特异性条带.结论:结合计算机表位预测和PCR的方法构建并在大肠杆菌中高效表达了一种人乳头瘤病毒CTL表位疫苗.
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人类乳头瘤病毒与宫颈癌
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,在全球女性恶性肿瘤中其发病率仅次于乳腺癌,在发展中国家则居首位.据资料显示,我国目前宫颈癌患者约40万,每年新增患者超过13万,每年有3～5万女性死于宫颈癌,死亡率为11.34%,居女性死亡率之首[1].自70年代以来,人类乳头瘤状病毒(human papillomauirus,HPV)感染与宫颈癌的关系一直是众多肿瘤学家和病毒学家观注的焦点.随着分子生物学与流行病学的发展,人类乳头瘤状病毒感染与下生殖道疾病关系研究的不断深入,发现人类乳头瘤病毒感染与宫颈癌的发生密切相关.国际癌症研究中心(IARC)专题讨论会(1995)年明确提出HPV感染是宫颈癌的主要危险因素.现在流行病学资料结合实验室的证据已经确定了HPV与宫颈癌的病因关系.HPV有很多亚型,各亚型在宫颈浸润癌中,以16型多见,宫颈腺癌中以HPV18型多见,而与鳞癌关系大的是HPV16型.
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人乳头瘤病毒体外研究的技术及进展
人乳头瘤病毒的体外研究技术在人乳头瘤病毒研究中占有重要地位.通过人乳头瘤病毒的人工感染及感染细胞分化诱导技术,目前已可在体外完成多种型别人乳头瘤病毒的复制周期.常用的人乳头瘤病毒体外研究技术、人乳头瘤病毒复制与转录调控、人乳头瘤病毒与宿主细胞相互作用、人乳头瘤病毒感染的干预与治疗等热点问题引起人们的关注.
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HPV E6、E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用
目的 利用液基薄层细胞学(TCT)检测标本检测高危人乳头瘤病毒(HPV) E6/E7 mRNA,研究人乳头瘤病毒癌基因E6、E7 mRNA检测对宫颈癌早期诊断价值.方法 收集宫颈液基细胞学标本4 680例,先通过TBS诊断系统进行诊断,对于诊断阳性的162份TCT标本进一步检测HPV E6/E7mRNA的表达情况,统计在细胞学级别中的表达量差异.结果 未见上皮内病变或恶性病变(NILM)4 518例,非典型鳞状细胞不能明确意义(ASC-US)82例,不能排除高级别鳞状上皮内病变的非典型鳞状上皮细胞(ASC-H) 22例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)50例、高度鳞状上皮内病变(HSIL)8例.除NILM4 518例以外的162例标本进行HPV E6/E7检测,TBS分级的4个组间的HPV E6/E7 mRNA表达阳性率差异有统计学意义(P＜0.05).TBS分级的4个组间拷贝数比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HPV E6/E7 mRNA检测有助于提升宫颈癌高危患者筛查效率.
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液基薄层细胞学技术与人乳头瘤病毒联合检查在宫颈癌早期诊断的价值
目的 研究液基薄层细胞学技术(TCT)与人乳头瘤病毒(HPV)联合检查在宫颈癌早期诊断的价值.方法 行宫颈癌筛查的受检者220例,行TCT检查、HPV检查及阴道镜下宫颈组织病理活检,以病理活检检查结果作为"金标准",计算TCT检查、HPV检查的灵敏性和特异度,检测宫颈组织中抑癌基因的表达量.结果 HPV诊断灵敏度为100％,显著高于TCT(19.05％),差异有统计学意义(P＜0.05);TCT诊断的特异度为94.93％,显著高于HPV(0),差异有统计学意义(P＜0.05).TCT阳性组织中P53和P16iink4a的mRNA含量和蛋白含量显著低于TCT阴性组织(均P＜0.05).结论 HPV诊断宫颈癌灵敏性高,TCT诊断宫颈癌特异度高,两种方式联合检查更适用于宫颈癌的早期筛查.
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人乳头瘤状病毒感染与子宫颈癌的相关性分析
目的 探讨人乳头瘤状病毒(HPV)感染与子宫颈癌的相关性.方法 选择接受宫颈巴氏涂片检查以及病理切片检查的妇女438例,采用人乳头瘤状病毒核酸扩增分型检测试剂盒检测所有受检妇女21种HPV阳性情况.结果 438例受检妇女中,确诊子宫颈癌102例(23.29％),HPV阳性94例(21.46％).HPV阳性率与子宫颈癌患病率差异无统计学意义(x2=0.421,P=0.517).HPV16阳性56例(54.90％),HPV58阳性19例(18.63％),HPV18阳性12例(11.76％),HPV52阳性8例(7.84％),均显著高于其他类型HPV阳性率(均P＜0.05).HPV16、HPV58、HPV18和HPV52阳性患者中浸润癌所占比例显著高于上皮内瘤样病变和原位癌的总比例(均P＜0.05).结论 HPV16、HPV58、HPV18和HPV52与浸润性子宫癌具有高度的相关性.
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护理干预对宫颈人类乳头瘤状病毒感染患者焦虑、自尊及睡眠的影响
近年来,宫颈人类乳头瘤状病毒(HPV)感染的发病率呈增高趋势,且随着检测手段的改进,使其临床检出率也逐年增加[1].由于HPV感染主要经性生活传播,且可以导致宫颈癌的发生[2],因此患者确诊后存在着明显的负性心理,引起患者焦虑程度增加.笔者采用特定的护理方法对宫颈HPV感染患者进行干预,以探讨其临床效果.
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FHIT在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的表达及意义
目的:探讨在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)发生中脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因表达异常的作用及与HPV感染的关系.方法:用免疫组化法检测67例宫颈癌、42例CINⅢ和35例正常宫颈上皮组织的FHIT的表达.用PCR法检测宫颈癌石蜡组织中的HPV DNA,并用直接测序法或反向核酸杂交法对HPV分型.结果:正常宫颈组织中FHIT基因表达下调率为8.6%,CINⅢ组为28.57%,宫颈癌组为46.27%,差异均有统计学意义(P＜0.05).CINⅢ组FHIT蛋白表达下调率虽比宫颈癌组为低,但组间无统计学差异(P=0.66).67例宫颈癌病例中,高危型HPV感染阳性者的FHIT表达下降或缺失占55.32%,明显高于无高危型HPV感染者(20%)(P＜0.05).宫颈癌患者的年龄、临床分期、肿瘤组织学分级、肿瘤浸润深度和淋巴结转移与FHIT蛋白表达均无明显相关(P＞0.05).FHIT表达下调或缺失31例宫颈癌患者的5年生存率为77.1%,FHIT正常表达36例的5年生存率为79.3%(P＞0.05).结论:FHIT在宫颈癌及CINⅢ中的表达明显下调,可能与HPV感染协同在宫颈癌的发生中起了重要作用.而FHIT在宫颈癌发展中的作用及与预后的关系,有待大样本的进一步研究.
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HPV L1检测预测宫颈鳞状上皮内病变预后的意义
近年研究表明,随着宫颈鳞状上皮内病变(SIL)的进展,病变组织HPV L1衣壳蛋白表达呈下降趋势.联合宫颈HPV L1衣壳蛋白检测及现有筛查手段如细胞学、p16等检测也许可以提高其预测SIL预后的准确性.现将HPV L1检测用于预测SIL预后的科学性及实用性作一综述,以探索更加合理的筛查流程,对SIL患者进行佳的分流管理.
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宫颈细胞学、人乳头瘤状病毒检测及阴道镜在宫颈癌前病变诊断的应用
目的:探讨人乳头瘤状病毒DNA检测与细胞学检查及阴道镜检查对宫颈癌前病变的诊断价值.方法:2007年1月-2008年1月体检发现宫颈病变的患者173例,均进行宫颈刮片、高危型HPV检测及阴道镜检查,对一项或多项异常者行病理组织学检查,以病理结果为金标准.结果:高危型HPV-DNA检测的敏感度为83.82%;巴氏涂片以ASCUS为分界点的敏感度为49.71%;联合宫颈细胞学检查、HPV-DNA检测及阴道镜下病理检查的敏感度高为95.95%.结论:联合采用宫颈细胞学检查、HPV-DNA检测及阴道镜下病理检查能及早发现宫颈癌前病变,提高检出率,降低假阴性.
