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壳聚糖结构和分子量对凝血作用的研究
本工作研究了不同脱乙酰度和不同分子量壳聚糖、壳聚糖醋酸生理盐水溶液及羧甲基壳聚糖生理盐水溶液的凝血作用.在壳聚糖醋酸生理盐水溶液作用下,红细胞发生聚集和形变,而且低脱乙酰度现象明显,分子量在105～106范围内影响不十分明显;羧甲基壳聚糖不能使红细胞在低相对离心力下发生沉降,仅有部分叠连现象;而壳聚糖则不能使红细胞发生聚集和形变.血液凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分促凝血酶原激酶时间(APTT)和纤维蛋白原浓度(FIB)验证了壳聚糖、壳聚糖醋酸生理盐水溶液以及羧甲基壳聚糖均不激活凝血因子,且脱乙酰度、分子量以及取代基对这些指标也没有明显地影响.动态凝血实验发现低脱乙酰度壳聚糖能够更好地使血液凝固.
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壳聚糖脱乙酰度的1H-NMR测定方法研究
目的建立测定壳聚糖脱乙酰度的1H-NMR方法.方法样品经溶解、降解处理后,测定1H-NMR图谱,根据氢的化学位移和响应值,计算样品的脱乙酰度.分别测定了脱乙酰度从70%～95%的壳聚糖样品及神经修复用导管的脱乙酰度.结果样品的前处理条件在所考察的范围内对测定结果的影响较小,但对样品的聚合度有较大影响.不同脱乙酰度的样品按照所确立的条件测定均获得了重现性较好的结果.结论所建方法准确、可靠、重复性好.
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壳聚糖澄清剂的脱乙酰度及残留量研究
目的对壳聚糖澄清剂的脱乙酰度及精制后的中药水提液中壳聚糖的残留量进行了探讨.方法用线性滴定测定壳聚糖(游离胺基)的含量.结果壳聚糖澄清剂的脱乙酰度约80%,在澄清液中壳聚糖残留量小于0.010%.结论壳聚糖作为精制中药水提液的澄清剂是可行的.
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不同脱乙酰度和分子量壳聚糖的生物相容性之比较
目的:壳聚糖是天然多糖几丁质部分脱乙酰基后的产物,是一种良好的生物材料.本文研究了四种来源相同,不同脱乙酰度和分子量壳聚糖的生物相容性.方法:应用四唑盐比色法(MTT)研究了宫颈癌细胞(Hela细胞)在四种壳聚糖膜上的细胞活性和生长状况,并通过酶联免疫技术(ELISA)和圆二色法(CD)测定了人血清白蛋白(HAS)在这四种壳聚糖膜上的吸附量以及吸附后HAS二级结构的变化.结果:MTT结果表明:生长在脱乙酰度为74.7%壳聚糖膜上的Hela细胞的活性高.ELISA结果表明:脱乙酰度为74.7%壳聚糖膜对HAS的吸附量较小,其它三种壳聚糖对HAS的吸附量较高.圆二色法结果表明:吸附在脱乙酰度为74.7%壳聚糖膜上的HAS的二级结构与其他三种壳聚糖吸附HAS的结果差异较大.讨论:从这四种壳聚糖的脱乙酰度,壳聚糖膜表面的氨基含量以及亲水性等方面讨论了HAS在四种壳聚糖上的吸附量,吸附后二级结构的差异以及Hela细胞在这四种壳聚糖上生长的差异.
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水溶性壳聚糖的研究进展
目的:本文对甲壳素与壳聚糖的水溶性衍生物的研究情况及其在医药上的应用进行了综述,并着重讨论了其在化学改性方面的进展.
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壳聚糖的制备工艺及与医用产品质量的关系
甲壳质又称甲壳素、几丁质、不溶性甲壳素、聚乙酰氨基葡萄糖等,是N-乙酰基-D-葡萄糖胺通过β-(1,4)-甙键联接的线性多糖,化学名为聚(1,4)-2-乙酰氨基-2-脱氧β-D-葡萄糖.壳聚糖是甲壳质的主要衍生物,又称为甲壳胺、壳多糖、几丁(聚)糖、可溶性甲壳素、脱乙酰甲壳素、粘性甲壳素、聚氨基葡萄糖等,化学名为聚-2-氨基-2-脱氧-β-D-葡萄糖[1].一般把脱乙酰度在70%以上的称为壳聚糖,70%以下的称为甲壳质.
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蝇蛆壳聚糖对高脂血症大鼠降脂作用
目的 研究不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠的降血脂作用.方法 采用酸碱化学法制备72.3%,80.5%,96.1%脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖,并用红外扫描鉴定其结构.取成年雄性SD大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、高脂模型组、蝇蛆壳聚糖72.3%,80.5%,96.1%脱乙酰度组,给高脂饲料造模的同时连续给予蝇蛆壳聚搪8周,测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量,同时观察对大鼠体重影响.结果 各脱乙酰度组蝇蛆壳聚糖均能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量(P＜0.01),显著升高HDL-C(P＜0.01),降低大鼠体重(P＜0.01).结论 蝇蛆壳聚糖具有明显降血脂作用,其作用与脱乙酰程度呈正相关.
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蝇蛆壳聚糖对高脂血症大鼠的降脂保肝作用
目的 研究不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠的降脂保肝作用.方法 采用酸碱化学法制备不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖,并用红外扫描鉴定其结构.取大鼠给高脂饲料造模的同时连续分别给予不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖8 w,测定大鼠血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,测定肝脏指数和肝组织中TC含量,并对各组大鼠肝脏进行病理观察.结果 各脱乙酰度组蝇蛆壳聚糖均能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量(P<0.01),显著升高HDL-C含量(P<0.01),降低大鼠的肝脏系数及肝组织TC含量(P<0.01),并能减轻肝细胞脂变程度.结论 不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖能调节实验性高脂血症大鼠血脂代谢,抑制肝脏脂肪沉积,有良好的降脂保肝作用,其作用与脱乙酰程度呈正相关.
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壳聚糖膜的降解性及生物反应性研究
壳聚糖是甲壳素经脱乙酰基后,精制而成的可溶性甲壳素.据报道[1],壳聚糖具有良好的成膜性、生物降解性和生物相容性.其降解产物一般对人体无毒副作用,在体内不积蓄,无免疫原性,因而可制备手术缝合线、人工皮肤、骨修复材料、人工透析膜、接触眼镜、抗凝血材料等,在医学领域内有着极其广阔的应用前景.本文着重于研究壳聚糖膜的生物降解性.
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壳聚糖体外吸附血清胆固醇的作用及其影响因素
目的:探讨应用壳聚糖在体外吸附血清胆固醇的作用及其影响因素,为临床应用壳聚糖吸附法治疗高脂血症提供依据.方法:将不同分子量、不同脱乙酰度和不同粒径的壳聚糖,分别加入到含高胆固醇的血清中,在限定条件下作用一定时间,用胆固醇氧化酶法分别测定加入壳聚糖前后的血清胆固醇含量,计算其吸附量.结果:壳聚糖分子量为53～55万时,吸附胆固醇量达到大值;随壳聚糖脱乙酰度的提高,壳聚糖对胆固醇的吸附量也提高;壳聚糖粉末粒径越小越利于吸附.结论:壳聚糖用作体外血清胆固醇吸附剂具有优良血液相容性和吸附性,其吸附行为与分子量、脱乙酰度和粒径有关.
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壳聚糖的生物学特性及其在眼科应用研究进展
1811年法国人Henri Braconnot从菌类中提取了一种类似纤维素的物质,当时只是把它当作一种新型纤维素,直到1843年,才由法国人J.L.Lassaigne发现该物质中含有氮,证明它不是纤维素,由于这种物质广泛存在于虾、蟹、昆虫等动物的甲壳中,以及真菌酵母的细胞壁里,故称之为甲壳素,甲壳素又称甲壳质、几丁质、壳蛋白、蟹壳素等,它的化学命名为[B-1.4-2-乙酰氨基-2-脱氧-D-葡萄糖],英文名为Chitin,是一种天然的生物高分子,其分子结构与纤维素很相似,属线性多糖类,其分子中有许多胺基和羟基,易于进行化学修饰和改性,按反应条件和处理方法的不同可获得不同脱乙酰度和相对分子质量的产品.
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不同分子量高脱乙酰度壳聚糖的制备及表征
目的 制备不同分子量高脱乙酰度壳聚糖.方法 在强碱条件下通过不同方式的水解从原料壳聚糖制备一系列高脱乙酰度壳聚糖,用HAc/H2O2体系对制备的高脱乙酰度壳聚糖进行不同时间的降解得到中低分子量高脱乙酰壳聚糖,并用乌氏黏度计测定其黏均分子量.结果 在实验条件下成功制备了一系列中低分子量高脱乙酰壳聚糖,并用红外和核磁光谱进行分析表征.结论 采用10 mol·L-1NaOH水溶液110℃间歇水解的方法可以制备90%～100%脱乙酰度的壳聚糖,用0.35 mol·L-1HAc/0.45 mol·L-1H2O2体系可以制备黏均分子量10,000～100,000Da的壳聚糖样品.
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碱量法测定壳聚糖脱乙酰度的滴定误差
壳聚糖脱乙酰度采用碱量法,按强碱-强酸型测定,不管选用何种指示剂,均可产生不容忽视的滴定误差.
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甲壳质脱乙酰度与几丁聚糖含量的关系
对甲壳质脱乙酰度(DD)与几丁聚糖含量(Crs)之间的关系加以探讨,阐明了脱乙酰度与几丁聚糖含量是两个不同的概念,但在数量上又有一定的关系,并提出了两者之间的计算公式.
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壳聚糖及其衍生物的医药应用进展
壳聚糖[Chitosan,(1,4)-2-氨基-2-脱氧-β-D-葡聚糖]是由甲壳素[Chitin,(1,4)-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-葡聚糖]经脱乙酰化反应后而得到的一种天然生物高分子,是生物界大量存在的一种线性氨基多糖,广泛存在于节足动物类的翅膀或外壳中,也存在于真菌和藻类的细胞壁中,是甲壳素重要的衍生物,是其脱乙酰度达到70%以上的产物.其结构如下[1]:
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壳聚糖中脱乙酰度测定方法的探讨
目的:探讨壳聚糖的游离氨基测定及脱乙酰度的计算方法.方法:对指示剂种类、浓度、试剂浓度、样品用量、样品处理条件进行佳化选择.对现有的方法壳聚糖的游离氨基测定及脱乙酰度的计算进行探讨.结果:用(1%)甲基橙-(1%)苯胺蓝混合指示剂1∶2指示滴定终点.盐酸标准溶液 0.1 mol/L 用量 30 ml.样品必须经过 105℃干燥处理用量为 0.3～0.5 g.计算公式选用改进后的公式 .结论:改进后的壳聚糖中脱乙酰度测定及计算方法更加完善,精密度、准确度等指标符合要求.样品测定结果令人满意.
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壳聚糖脱乙酰度测定方法的研究
目的:电位滴定仪测定壳聚糖脱乙酰度的方法并对不同测定方法进行比较.方法:运用电位滴定法和酸碱滴定法.结果:不同方法的准确度和精密度差异无统计学意义.结论:电位滴定方法和酸碱滴定法均适用于测定壳聚糖脱乙酰度.
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水溶性O-羧甲基壳聚糖的制备及结构表征
目的:以甲壳素为原料制备水溶性O-羧甲基壳聚糖(O-CMC),并进行结构表征.方法:通过羧甲基化和脱乙酰化两步反应合成O-CMC,采用胶体滴定法测定产物的取代度和脱乙酰度,一点法测定黏均分子量,利用红外谱图确定羧甲基的取代位置.结果:甲壳素与氯乙酸在50℃进行羧甲基化反应4h,然后于50℃碱性条件下进行脱乙酰化反应30 min,即得产物.经超声纯化,制得水溶性O-CMC,产率为78.14％.红外光谱分析表明,合成产物的羧甲基仅局限于C6伯羟基取代,取代度为0.64,脱乙酰度为44.53％,黏均分子量为1.42×104.O-CMC在中性和碱性条件下水溶性好,等电点为4.46,0.5％水溶液pH为7.52.结论:本法制得的O-CMC结构表征明确,脱乙酰度和取代度符合设计要求,水溶性佳.
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红外光谱法测定保健食品中壳聚糖含量
甲壳素(Chitin)属天然多糖类,广泛分布于各类动物中.节肢动物、软体动物、环节动物中富含甲壳素,动物的关节、蹄、足、壳等坚硬部位含量较高.目前医学临床试验已证实甲壳素具备抑制肿瘤、调节血压及美容祛脂等功效,近年来已成为保健食品市场上的"新贵".甲壳素多聚糖不溶于水及弱酸碱性介质中,难以被人体吸收,必须经强碱水解或酶解去除乙酰基,去除乙酰基后的甲壳素叫脱乙酰甲壳素或称壳聚糖(Chitosan).壳聚糖能溶于低酸度水溶液中,能在人体内消化吸收,因此,甲壳素的有效成分以壳聚糖表示,亦叫脱乙酰度.样品中壳聚糖的分离目前仍存在一定困难,因而难以应用色谱法进行准确检测.本文报道的红外光谱外标定量法[1],方法简便快捷,不需分离样品中壳聚糖,直接称取标准品和样品,混合均匀制成KBr片即可上机测定,结果准确可靠,可作为目前对甲壳素类保健食品功能成分监测的手段之一.
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壳聚糖澄清吸附作用的研究进展
综述近年来壳聚糖作为澄清剂在中药制剂生产中的应用情况,以及其对蛋白质、胆固醇、游离酸、铅离子、鞣质等的吸附作用的研究情况,介绍影响壳聚糖吸附作用的分子量和脱乙酰度的测定.
