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NF-κB和P38MAPK在BMSCs肝向分化中的作用
目的 探讨信号转导分子核因子κB (NF-κB)和P38MAPK在肝细胞生长因子(HGF)、肝组织液(LTF)介导下骨髓间充质干细胞(BMSCs)向肝样细胞定向分化过程的作用.方法 采用全骨髓贴壁法分离大鼠BMSCs,利用HGF、LTF两种诱导剂以及NF-κB信号通路抑制剂BAY 11-7082对第3代BMSCs进行分组培养.采用吲哚靛青绿(ICG)摄取实验检测肝向分化的细胞,免疫组化染色检测NF-κB蛋白表达,Western Blot法检测NF-κB、p-P38和AAT表达.结果 经HGF、LTF诱导20 d后的细胞可摄取ICG.免疫组化检测显示,BMSCs经HGF、LTF两种诱导剂诱导后,细胞核内有NF-κB蛋白表达,添加抑制剂BAY 11-7082后细胞核内NF-κB蛋白表达减弱(F=572.2、280.9,P＜0.01).Western Blot检测显示,经HGF、LTF两种诱导剂诱导后,细胞内NF-κB和p-P38蛋白表达量显著增加,且细胞能够表达AAT蛋白,加入抑制剂BAY 11-7082后随着培养时间的延长,NF-κB、p-P38和AAT蛋白表达量均出现不同程度的降低(F=280.8～3 028.2,P＜0.01).结论 HGF、LTF均可诱导BMSCs向肝细胞分化,P38MAPK和NF-κB信号通路均参与了BMSCs的肝向分化,P38MAPK信号通路的调控主要出现在肝向分化的前期,NF-κB的抑制在前期对其无明显影响.
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利塞膦酸钠对神经病理性疼痛大鼠脊髓胶质细胞活化的影响及镇痛作用
目的 探讨利塞膦酸钠(risedronate,RIS)对大鼠神经病理性疼痛及脊髓背角胶质细胞活化的影响.方法 本研究在2016年10月至2018年2月于郑州大学第一附属医院进行,以脊神经结扎(SNL)模型为基础将雄性SD大鼠72只随机分为6组:脊神经结扎组即手术组(SNL组),利塞膦酸钠(RIS)低剂量治疗组[R(L)组]、中剂量治疗组[R(M)组]、高剂量治疗组[R(H)组],假手术组(Sham组)及对照组(Control组).皮下注射RIS各组剂量分别为0.1、0.5、1 mg/kg,分别在术后0～14d时测定各组大鼠的机械缩足反应(MWT)阈值,运用免疫组织荧光染色检测各组OX42、GFAP及p-p38 MAPK蛋白的表达情况,采用蛋白印迹(Western blot)法检测各组p-p38 MAPK表达的变化.结果 与Sham组相比,SNL组、R(L)组、R(M)组及R(H)组术后各时点MWT水平均下调(P＜0.05),R(L)组、R(M)组及R(H)组在术后5、7、10、14d时各指标均优于SNL组(P＜0.05).在术后7d时,Western blot结果显示,与Sham组比较,SNL组p-p38 MAPK表达水平升高(P＜0.05);与SNL组相比,R(M)组p-p38 MAPK表达水平降低(P＜0.05);组织免疫荧光染色结果显示,与Sham组相比,SNL组及R(M)组脊髓背角OX42、GFAP及p-p38MAPK表达水平升高(P＜0.05);与SNL组比较,OX42及p-p38 MAPK标志蛋白表达水平降低(P＜0.05).结论 皮下注射利塞膦酸钠可缓解大鼠神经结扎所致神经病理性疼痛,其机制可能是通过抑制p38MAPK通路激活进而抑制脊髓背角小胶质细胞活化发挥镇痛作用.
关键词： 二磷酸盐类 脊髓 小胶质细胞 p38丝裂原活化蛋白激酶类 神经痛 -
p38丝裂原活化蛋白激酶阻滞剂SB203580对白血病K562细胞周期的作用及机制
目的 研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)阻滞剂SB203580对K562细胞周期的作用及机制.方法 以反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting方法检测SB203580处理K562细胞后p38、Cyclin D2、Cyclin E、p27 mRNA和蛋白的表达并以流式细胞术(FCM)检测其细胞周期的变化.结果 SB203580处理后K562细胞p38、Cyelin D2、Cyclin E mRNA和蛋白表达降低;p27 mRNA和蛋白表达增高.G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,与用药前相比差异均有统计学意义.结论 SB203580可能通过p38途径,影响细胞周期调控蛋白,终抑制K562细胞的增生.
关键词： 白血病 细胞周期 p38丝裂原活化蛋白激酶类 K562细胞 SB203580 -
p38MAPK信号转导通路与细胞凋亡研究进展
丝裂原活化蛋白激酶(mitogen2activated protein kinase, MAPK)级联是细胞内广泛存在的丝/苏氨酸蛋白激酶超家族,是将细胞质的信号传递至细胞核并引起细胞核发生变化的重要物质.
关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶类 细胞凋亡 综述
