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碳青霉烯类抗生素诱导耐药铜绿假单胞菌外膜蛋白D2表达与编码基因多点突变
目的 探讨对碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌编码外膜蛋白D2(OprD2)基因变异与OprD2表达的关系.方法 由临床分离敏感铜绿假单胞菌,使用不同浓度亚胺培南与美罗培南含药琼脂平板法筛选耐药菌株.应用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、凝胶成像系统分析OprD2.应用聚合酶链反应及测序分析OprD2基因编码区.结果 人工诱导能产生出与临床分离株一样的对碳青霉烯类抗生素耐药的菌株.在SDS-PAGE图谱上亚胺培南与美罗培南耐药株与同源敏感株相比均有OprD2的减少.测序结果显示在多株耐药菌中,OprD2基因编码区3个基因位点同时出现碱基突变:在+84位点产生突变,胞嘧啶突变为胸腺嘧啶(C→T);在+401位点突变(C→A),造成第134位氨基酸苏氨酸突变为天冬氨酸(Thr→Asp);在+959位点突变(A→G),造成第320位氨基酸赖氨酸突变为精氨酸(Lys→Arg).结论 同时出现3个或更多的碱基点突变可能导致铜绿假单胞萧OprD2缺失或表达减少,可能是对碳青霉烯类抗生素产生耐药性的原因.
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哈尔滨地区铜绿假单胞菌外膜蛋白D2与亚胺培南耐药关系研究
目的 研究哈尔滨地区铜绿假单胞菌外膜蛋白D2(OprD2)含量改变与亚胺培南(IMP)耐药之间关系.方法 采用超声破碎方法提取42株对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌OprD2,进行SDS-PAGE电泳,利用水杨酸盐抑制试验确定OprD2的位置,通过凝胶分析软件分析OprD2的相时含量,并与敏感株进行对比分析.结果 42株对IMP耐药的铜绿假单胞菌中,OprD2完全缺失的有11株,减少的有17株,与敏感株相比,OprD2的相对含量明显降低.结论 哈尔滨地区铜绿假单胞菌OprD2含量的减少或缺失是其对IMP耐药的主要原因之一.
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铜绿假单胞菌耐药基因及外膜蛋白D2的检测与分析
目的 了解对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌产生的耐药基因类型以及外膜蛋白D2的表达情况.方法 收集2014年1月-12月新疆维吾尔自治区人民医院各种细菌培养标本4 589份,使用VITEK 2 Compact系统进行菌株的鉴定和药敏试验,筛选出对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌,并通过PCR技术扩增blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA基因和外膜蛋白D2编码基因,进行测序鉴定.结果 铜绿假单胞菌blaIMP基因阳性的检出率为75.86％ (44/58),外膜蛋白D2表达阳性率为22.41％ (13/58),测序后证实基因型为IMP-1型.结论 耐亚胺培南的铜绿假单胞菌以携带blaIMP为主,耐药机制可能与IMP-1基因型的产生和OprD2缺失有关.
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绿脓杆菌外膜蛋白D2(OprD2)与耐药关系的研究
该文采用外膜蛋白SDS-PAGE、凝胶分光光度扫描分析方法,研究该室临床分离的绿脓杆菌OprD2与耐药的关系.结果表明绿脓杆菌泰能耐药株均有不同程度OprD2的减少,耐药组OprD2的相对含量明显低于敏感组,提示OprD2的减少甚至缺失是绿脓杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因.
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铜绿假单胞菌外膜蛋白 D2与亚胺培南耐药关系的研究
目的：研究广西地区铜绿假单胞菌外膜蛋白D2（OprD2）的表达与亚胺培南耐药之间的关系。方法采用SDS-PAGE电泳法对提取出的106株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的外膜蛋白进行电泳，并利用水杨酸盐抑制实验确定OprD2的位置，通过凝胶成像系统成像并将其与敏感株比较进行分析。结果106株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中有99株细菌缺失OprD2。结论 OprD2缺失是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因之一。
