首页 > 文献资料
-
出生后不同时间大鼠脊髓神经干细胞的培养特点
神经干细胞研究一直是神经科学领域的热点.目前国内外学者已经建立了神经干细胞的分离和培养技术[1].本研究分析大鼠出生后不同时间大鼠脊髓神经干细胞的培养特点,为应用神经干细胞积累经验.
-
脊髓神经干细胞的研究进展
近十多年来,人们对神经干细胞的研究进展迅速.本文从生长因子EGF和bFGF的反应性、分化特点、临床应用前景三个方面来综述脊髓神经干细胞的研究进展.为深入开展脊髓神经干细胞的基础研究及临床应用研究提供科学依据.
-
LINGO-1在脊髓神经干细胞分化过程中的表达特征及效应
背景:研究LINGO-1在脊髓神经干细胞分化过程中的表达及效应对调控神经干细胞分化及修复脊髓损伤有着重要的意义.目的:观察LINGO-1在脊髓神经干细胞分化过程中的表达特征及生物学作用.方法:体外培养大鼠脊髓神经干细胞,并对培养细胞进行Nestin染色干性鉴定及诱导分化多能性鉴定.于分化第0天及第5天进行LINGO-1与Nestin(神经干细胞)、β-TubulinⅢ(神经元细胞)、GFAP(星形胶质细胞)及O4(少突胶质细胞)免疫荧光双染色,观察LINGO-1的表达特征.体外培养的大鼠脊髓神经干细胞分为对照组及干扰组,干扰组脊髓神经干细胞感染LINGO-1 shRNA慢病毒下调LINGO-1表达,对照组脊髓神经干细胞感染Scramble-shRNA慢病毒,于感染第5天免疫荧光染色检测神经元突起长度.结果与结论:①脊髓神经干细胞可以分化成为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞;②LINGO-1在脊髓神经干细胞及其分化的神经元、少突胶质细胞中表达,但不在星形胶质细胞中表达;③下调LINGO-1表达后,干扰组神经元突起长度较对照组明显增长,差异有显著性意义(P<0.05);④结果表明,体外培养的脊髓神经干细胞具有多项分化潜能,LINGO-1在脊髓神经干细胞及分化早期的神经元、少突胶质细胞中表达,但不在星形胶质细胞中表达.LINGO-1对分化后神经元突起生长具有负性调控作用.
-
脊髓神经干细胞的研究进展及应用前景
上世纪末,Reynolds等[1]从成年小鼠纹状体中分离出能够在体外不断分裂增殖的具有多分化潜能的细胞群,提出了神经干细胞(neural stem cell,NSC)的概念.1997年Mck-ay [2]在Science上指出神经干细胞是指能自我更新、具有分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞能力的细胞,它具有多分化潜能、自我更新能力和干细胞基本生物学特性.Gage [3]也提出神经干细胞是被用来描述那些能产生神经组织或来源于神经系统、有一定的自我更新能力、能通过不对称分裂产生除它本身以外的细胞.神经干细胞的出现彻底改变了中枢神经系统(CNS)神经元不能再生的概念.近年来,很多研究表明在胚胎和成年动物中枢神经系统的不同部位都存在神经干细胞,它的发现为人们深入研究中枢神经系统的发育、分化以及探索治疗神经系统疾病开辟了新的思路,对神经干细胞的研究已成为生命科学的热点.但目前的研究多集中在纹状体和皮层的神经干细胞上,对脊髓神经干细胞的研究为数不多.本文就脊髓源性神经干细胞的分离培养、诱导分化以及应用前景做综述如下.
-
LINGO-1在脊髓神经干细胞向少突胶质细胞分化中的作用研究
目的:观察LRR结构和免疫球蛋白结构域Nogo受体作用蛋白(LINGO-1)在脊髓神经干细胞(SpNSCs)向少突胶质细胞分化过程中的表达特征及其对少突胶质细胞分化成熟的作用.方法:体外培养大鼠脊髓神经干细胞并诱导分化,于分化第3天及第5天进行LINGO-1与A2B5及O4免疫荧光双染色,观察LINGO-1的表达特征.体外培养的大鼠脊髓来源神经干细胞分为对照组及干扰组,干扰组通过LINGO-1 shRNA慢病毒感染SpNSCs下调LINGO-1表达,对照组表达Scramble-shRNA的慢病毒,通过LINGO-1 shRNA慢病毒感染SpNSCs下调LINGO-1表达,于分化第7天免疫荧光染色检测少突胶质细胞分化情况及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达情况.结果:LINGO-1与A2B5及O4均共表达于分化细胞中.下调LINGO-1表达后,成熟少突胶质细胞达到对照组细胞的3.28倍,MBP表达量为对照组的5.31倍,且均具有统计学意义(均P<0.05).结论:LINGO-1在少突胶质细胞分化过程中持续表达,LINGO-1负性调控少突胶质细胞分化及成熟.
-
脊髓神经干细胞定向分化为神经元过程中生长相关蛋白-43和钙调蛋白的表达
我们通过本实验在分离培养大鼠脊髓神经干细胞(NSCs)的基础上,研究其在定向分化为神经元过程中生长相关蛋白-43(GAP-43)和钙调蛋白(CaM)的表达及两者相关性,为神经干细胞的研究和应用奠定理论基础.
-
外磁场作用下特异性磁性NICD对脊髓神经干细胞增殖与凋亡的影响
目的 研究Notch信号通路在脊髓损伤部位高表达后,对内源性脊髓神经干细胞再生能力的影响,探讨其在脊髓损伤修复中的作用.方法 构建鼠NICD(Notch intracellular domain,NICD)质粒,用经典的氧化还原法将NICD质粒结合至葡聚糖磁性纳米颗粒(dextran magnetic nanoparticles,DMN)上,参照Alivisatos和Conwell方法构建纳米化目的基因,在外磁场作用下转染体外培养鼠脊髓神经干细胞,检测转染前后细胞增殖与凋亡情况.结果 纳米化NICD-DMN转染体外培养内源性脊髓神经干细胞后,细胞明显增多,而凋亡明显减少,统计学有显著意义(P<0.05).结论 特异性磁性NICD在外磁场协助下明显促进内源性脊髓干细胞增殖,抑制其凋亡.
-
大鼠胚胎脊髓神经干细胞的分离培养及其向神经细胞的诱导分化
目的分离培养大鼠胚胎脊髓神经干细胞(SNSCs),研究其体外增殖分化的特点,模拟大鼠胚胎时期脊髓发育的微环境诱导SNSCs向神经细胞定向分化.方法显微机械分离孕10～11d胚胎大鼠脊髓神经干细胞,无血清悬浮培养,以复合添加剂N4定向诱导分化,并拍照记录不同时期细胞分化的形态;用不同荧光剂进行细胞免疫荧光染色,并计算阳性细胞的平均分化比例.结果显微机械分离SNSCs方法,所分离的SNSCs具有较高的增殖能力,经复合添加剂N4诱导可以分化为神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞.结论采用显微机械分离SNSCs方法简单、效率高,N4添加剂可以高效诱导SNSCs分化为神经细胞,且分化的细胞中神经元比例高.
-
胚胎大鼠脊髓神经干细胞体外培养和分化的研究
目的探讨脊髓源性神经干细胞的培养方法和体外分化特性. 方法从孕龄15天的胚胎大鼠脊髓组织中分离获得神经干细胞,采用含表皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的无血清限定性培养基培养并进行干细胞体外分化,细胞免疫荧光化学方法鉴定分化结果. 结果胚胎脊髓中可分离得到大量的神经干细胞,培养10天左右可获得干细胞球;用细胞免疫荧光化学法鉴定干细胞分化,可见其中含有神经元和星形胶质细胞. 结论无血清限定性培养基是脊髓源性神经干细胞的良好培养基;脊髓源性神经干细胞体外可诱导分化为神经元和神经胶质细胞.
