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脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体研究及黄芪作用观察
目的:观察脾虚大鼠胃壁细胞胃泌素受体结合位点数的变化以及中药黄芪注射液对其的调控作用.方法:脾虚模型采用利血平方法,治疗组给予黄芪注射液;大鼠胃黏膜壁细胞分离与纯化采用Lewin胃袋法及Percoll密度梯度纯化;壁细胞胃泌素受体结合位点数(sites/cell)的检测采用放射配基结合方法.结果:利血平脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体结合位点数为271.2±91.8,明显低于正常组(619.1±304.5,P<0.05).中药黄芪注射液对其有显著上调作用(545.2±205.3,P<0.01).结论:利血平脾虚大鼠胃壁细胞胃泌素受体结合位点数下降,中药黄芪注射液对其有明显上调作用,胃泌素受体与脾虚证关系密切.
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补脾方药对脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体及细胞内[Ca2+]i作用的观察
目的:观察脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体及受体后信号细胞内钙离子的变化,并观察补脾方药党参、白术、补中益气汤对其的影响.方法:大鼠壁细胞采用EDTA-Pronase酶法消化而来.胃泌素受体检测采用放射配基结合实验,壁细胞内[Ca2+]i变化测定采用双波长荧光法.结果:大黄脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体结合位点数有显著降低,经补脾方药治疗后有所恢复;同时脾虚模型壁细胞内静息钙离子浓度明显低于正常组,经胃泌素刺激后壁细胞内[Ca2+]i有所升高,且脾虚模型升高幅度明显高于正常组,经治疗后此状态有所恢复,但无统计学意义.结论:脾虚证可能与胃泌素受体低表达相关,且壁细胞内钙离子处于低代谢状态,但对于胃泌素刺激的反应性增强,进而可能导致酸分泌敏感性相对增高,胃黏膜易损性增强.补脾方药对其有一定的调节作用.
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4种临床常见选择性5-羟色胺再摄取抑制剂对5-羟色胺转运体的抑制作用比较
目的 选择性5.羟色胺(5-HT)再摄取抑制剂(selective serotonin reuptake inhibitors,SSRIs)是目前临床应用广泛的新型抗抑郁药物.通过考察氟西汀、帕罗西汀、西酞普兰和舍曲林对5-HT转运体(serotonin transporter,SERT)的抑制作用的强弱,为临床选择药物提供实验依据.方法 利用大鼠脑突触体和大鼠血小板SERT,通过放射配基实验,观察在SSRIs存在下SERT对[3H]5-HT的摄取变化,获得IC50值,比较氟西汀、帕罗西汀、西酞普兰和舍曲林对SERT抑制作用的强弱.结果 大鼠脑组织突触体和血小板SERT体外放射配基结合实验显示,帕罗西汀、氟西汀、西酞普兰和舍曲林对SERT抑制作用的IC50(nmol·L-1)分别为(血小板vs突触体):(1.26 vs 1.39)、(44.7 vs 35.5)、(10.5 vs 16.2)和(6.64 vs 7.09).结论 4种SSRIs对SERT的抑制作用都很强,IC50在nmol·L-1数量级.抑制作用的强弱依次为帕罗西汀＞舍曲林＞西酞普兰＞氟西汀.
关键词： 选择性5-羟色胺再摄取抑制剂 5-羟色胺转运体 放射配基结合实验 突触体 血小板 -
肾病综合征大鼠肾小球血管紧张素Ⅱ受体结合的变化及机制
血管紧张素Ⅱ(AⅡ)在肾病综合征(NS)蛋白尿产生、水肿形成和肾小球硬化中发挥作用.为探讨肾局部肾素-血管紧张素系统(RAS)在NS中的作用,对阿霉素肾病大鼠(ADR)肾小球AⅡ受体进行测定.材料与方法:(1)雄性SD大鼠,随机分为对照组和肾病组,经尾静脉一次性注射盐酸阿霉素( 6 .5 mg*kg-1).部分动物结合实验前给予依那普利(10 mg·kg-1·d -1 ).(2)肾小球的分离纯化参照Fong氏的方法.(3)放射配基结合实验:反应体系-- 反应介质、肾小球、标记AⅡ和系列浓度的非标记AⅡ.反应体积300 μl.依次加入反应介质、肾小球、标记AⅡ和非标记AⅡ,在22 ℃振荡水浴中反应60 min,冰水终止反应.过滤分离结合的配基.自动γ计数仪测量放射性强度,所得数据作Scatchard分析,求出解离常数(Kd) 和大结合容量(Bmax).(4)放免法测定血浆AⅡ.(5)数据以[AKx- ±s表示,受体参数用配对比较t检验.
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低剂量甘丙肽拮抗剂M40在中枢的兴奋剂作用
甘丙肽是1983年发现的由29个氨基酸残基组成的多肽,其N和C端分别为甘氨酸和丙氨酸残基.甘丙肽广泛分布于中枢和外周组织,有调节胃肠平滑肌收缩、抑制胰岛素分泌、加强吗啡镇痛效应和参与记忆等重要作用.近年发现甘丙肽浓度异常与Alzheimer病(AD)的发生和发展有关,因而日益受到神经学界重视.甘丙肽拮抗剂M40[甘丙肽(1-13)-脯-脯-丙-亮-丙酰胺]是研究甘丙肽受体的重要工具药,可用于AD治疗.放射配基结合实验显示,M40在胰腺和脊髓有高、低亲和力两种受体.在高位神经中枢该药物是否存在不同效应,不同效应是否产生于同一细胞,迄今未见报道.我们以PrV为受试对象,运用全细胞膜片钳技术,对不同剂量M40的中枢作用进行了探索.
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补阳还五汤大鼠含药血清对家兔血小板PAF受体活性的影响
目的 探讨补阳还五汤大鼠含药血清对家兔血小板PAF受体活性的影响.方法 应用中药复方血清药理学研究方法,制备大鼠补阳还五汤含药血清,应用放射配基受体结合法观察大鼠含药血清对家兔血小板PAF受体活性的影响.结果 补阳还五汤高、低剂量组,金纳多组和蒸馏水组对3H-PAF与家兔洗涤血小板PAF受体特异结合抑制率分别为51.4±15.7、44.3±11.3、52.2±12.2、34.3±20.3,各组间比较差异虽无统计学意义(P＞0.05),但各用药组比蒸馏水组抑制作用分别提高了33.26%、22.57%、34.29%,其补阳还五汤高剂量组和金纳多组的抑制作用与蒸馏水组比较,统计量接近显著性水平(t=2.3082,t=2.6181,t24.005=2.8780).结论 补阳还五汤大鼠含药血清对家免血小板PAF受体活性影响差异虽无统计学意义,但具有一定的抑制作用趋势,可能与其样本量较小或实验动物种属有关.
