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用极谱法测定水发食品中的甲醛
甲醛俗称福尔马林,是有刺激气味的无色液体,为基本有机原料,用于防腐剂、消毒剂、交联剂、粘结剂,广泛用于医药、染料、纺织、皮革、造纸、塑料等.同时,它是一种破坏生物细胞蛋白质的原生质毒物,生物体组织接触甲醛会发生强烈刺激,并使其组织硬化,毒性极大.
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原花青素交联的支架材料的生物相容性研究
目的 探讨原花青素作为交联剂的壳聚糖、胶原蛋白、硫酸软骨素、透明质酸钠合成的支架材料植入兔角膜的生物相容性.方法 将壳聚糖、胶原蛋白、硫酸软骨素、透明质酸钠等溶液按照一定的比例混合,加入原花青素和戊二醛溶液作为交联剂,制成2种支架材料分别植入2组新西兰大白兔角膜的囊袋内.在不同的时间点进行裂隙灯显微镜观察照相,并进行组织病理学检查,比较不同的支架材料对角膜的影响.结果 原花青素交联组术后1周有结膜睫状充血,角膜水肿;2周后充血水肿逐渐消失.兔眼角膜情况稳定,术后4个月基本透明;材料与角膜的生物相容性好,5个月后材料大部分吸收溶解,角膜透明.组织病理学检查可见兔角膜标本中材料内有角膜基质细胞长入.原花青素交联的支架材料比戊二醛交联的支架材料刺激性小.结论 原花青素交联的壳聚糖、胶原蛋白、硫酸软骨素、透明质酸钠组成的支架材料与角膜组织具有良好的生物相容性,原花青素可能比戊二醛更适合作为支架材料的交联剂.
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离子导入角膜胶原交联术治疗兔眼金黄色葡萄球菌性角膜炎
背景 研究表明,核黄素联合紫外线A照射产生的交联效果能够提高角膜的抗酶解能力,并且能够抑制多种细菌的生长.目前胶原交联用于治疗圆锥角膜的效果已得到证实,但能否用于治疗细菌性角膜炎国内尚未见相关报道. 目的 评价离子导入角膜胶原交联法单独应用或联合药物治疗兔眼金黄色葡萄球菌性角膜炎的效果.方法 选取40只成年家兔,右眼角膜基质内注射2×109个/ml金黄色葡萄球菌悬液(比浊法)制备金黄色葡萄球菌角膜炎模型,然后采用随机数字表法将实验兔随机分为模型组、加替沙星滴眼液点眼组、核黄素-紫外线角膜胶原交联组和药物+交联治疗组,右眼为实验眼,左眼为空白对照.于造模后24 h行实验眼角膜分泌物涂片进行细菌培养和鉴定,核黄素-紫外线角膜胶原交联组和药物+交联治疗组行离子导入角膜胶原交联治疗;加替沙星滴眼液点眼组和药物+交联治疗组用加替沙星滴眼液点眼,每日7次,连续14 d.治疗前及治疗后每天于裂隙灯显微镜下检查实验眼并进行炎症分级;分别于治疗前和治疗后14d行眼前节光学相干断层扫瞄(AS-OCT)检查,观察实验眼病变区角膜厚度变化;于治疗后14 d摘出实验眼分别行角膜的组织病理学观察和透射电子显微镜超微结构观察.实验动物的使用和喂养按照潍坊医学院实验动物伦理委员会(AEEC)的指导方针进行.本研究方案得到AEEC批准. 结果 裂隙灯显微镜检查可见,所有实验眼造模后24 h均形成角膜溃疡,各组角膜炎症分级的差异无统计学意义(x2=0.293,P＞0.05);至治疗后14 d,药物+交联治疗组实验眼角膜病变程度1只眼为2级、9只眼为3级,模型组、加替沙星滴眼液点眼组和核黄素-紫外线角膜胶原交联组均为4级,4个组间不同病变分级眼数分布的差异有统计学意义(x2=38.710,P＜0.001).AS-OCT显示,治疗后14 d,药物+交联治疗组实验眼病变区角膜厚度为(428.1±146.2)μm,明显厚于模型组、加替沙星滴眼液点眼组和核黄素-紫外线角膜胶原交联组,4个组间差异有统计学意义(F=8.310,P＜0.001).角膜组织病理学检查显示,药物+交联治疗组实验眼基质胶原纤维破坏程度轻,炎性细胞浸润少;角膜透射电子显微镜观察显示,药物+交联治疗组实验眼亚细胞结构(即细胞器)接近正常的角膜基质细胞明显多于模型组、加替沙星滴眼液点眼组和核黄素-紫外线角膜胶原交联组.结论 离子导入角膜胶原交联术可用于兔金黄色葡萄球菌性角膜炎的治疗,角膜胶原交联术联合局部抗生素应用的治疗效果优于单纯局部药物疗法和单纯角膜胶原交联法.
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钙离子预处理脱矿牙本质胶原对原花青素交联效果的影响
目的:探讨钙离子预处理牙本质胶原对原花青素交联效果的影响.方法:牙本质片经磷酸完全脱矿后分为2组,即氯化钙预处理组和未处理组,每组牙本质片分为3个亚组:去离子水组(阴性对照)、戊二醛组(阳性对照)、原花青素组.通过测定牙本质片酶解后的质量损失、羟脯氨酸释放、抗弯强度变化以及透射电镜形貌观察,评估交联后牙本质胶原抗酶解能力和力学性能.结果:戊二醛或原花青素交联处理均可以减少牙本质胶原的降解(P<0.05),并提高其抗弯强度(P<0.05);钙离子预处理可进一步提高原花青素的交联作用,表现为抗酶解能力的提高(P<0.05)和抗弯强度的稳定性(P<0.05).结论:钙离子预处理脱矿牙本质胶原可增强原花青素对牙本质胶原的交联作用.
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京尼平交联改性可溶性蛋壳膜蛋白冻干支架的制备及检测
目的:评价京尼平交联改性前后可溶性蛋壳膜蛋白(soluble eggshell membrane protein,SEP)冻干组织工程支架的理化性能和生物相容性.方法:冷冻干燥法制备SEP的冻干支架,浸泡于京尼平溶液中交联改性.通过扫描电镜观察其表面形貌.测量其孔隙率、抗拉强度以及降解率,采用溶血实验、亚急性全身毒性实验和细胞毒性实验初步评价其生物相容性.结果:京尼平交联改性前后的SEP冻干支架孔径分别为(280±71)μm和(263±89)μm,孔隙率分别为(90.4±7.6)%和((87.9±9.7)%;交联改性显著提高了SEP冻干支架的拉伸强度和弹性模量,降低了支架的失重率(P<0.01);交联前后的材料均无溶血现象;亚急性短期全身毒性实验中组织切片均未见病理变化;细胞毒性检测均为0级.结论:京尼平交联改性在提高SEP冻干支架的力学强度和抗降解能力的同时,仍可保持支架材料良好的生物相容性.
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小分子靶向肽与力达霉素辅基蛋白偶联方法研究
目的:建立小分子靶向肽(RGD)2C肽同时与力达霉素辅基蛋白氨基和羧基联接的方法.方法:先用交联剂SPDP与力达霉素辅基蛋白氨基端氨基反应,再用交联剂HPDP与力达霉素羧基在交联剂EDC存在时反应,后将联接有SPDP与HPDP的力达霉素辅基蛋白与(RGD)2C肽反应.上述三个过程分别用Sephadex G15葡聚糖凝胶柱纯化以除去小分子物质.以基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱检测联接结果.结果:在本实验条件下,小分子靶向肽(RGD)2C肽同时与力达霉素辅基蛋白氨基与羧基成功联接,总的联接比为1:1和2:1.结论:采用交联刑SPDP和HPDP,可使小分子靶向肽同时与力达霉素氨基和羧基成功联接.
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花旗松素分子印迹聚合物合成条件优选及吸附能力的研究
目的 优选合成花旗松素分子印迹聚合物的试验条件.方法 采用分子印迹技术,花旗松素(Taxifolin)作为模板分子,分别以2-(三氟甲基)丙烯酸、丙烯酰胺(AA)、2-乙烯基吡啶(2-VPY)、4-乙烯基吡啶(4-VPY)为反应体系中的功能单体,有机溶剂乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)、三甲基丙烯酸三羟甲基丙烷酯(TRIM)作为交联剂,偶氮二异丁氰(AIBN)为引发剂,四氢呋喃(THF)为致孔剂,通过热引发聚合成花旗松素分子印迹聚合物.采用动态结合能力试验,评估不同条件下制备的聚合物对花旗松素的结合性能.结果 在功能单体为4-VPY、交联剂为EDMA,花旗松素与4-VPY的质量比为1∶3,4-VPY与EDMA的质量比为1∶3的条件下,制备得到的聚合物对花旗松素有较好的结合性能,结合量为17.84 mg·g-1.结论 在优选出的试验条件下合成的花旗松素分子印迹聚合物对花旗松素具有良好的吸附性能.
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DNA链间交联修复与范可尼贫血发病机制的研究进展
范可尼贫血(Fanconi anemia,FA)是一种罕见的常染色体或X染色体隐性遗传病,临床表现为多样化先天畸形、进行性骨髓衰竭、色素沉着症、恶性血液系统肿瘤及实体瘤倾向.该病典型的特征是对DNA交联剂具有高度敏感性,可产生DNA链间交联(Interstrand Cross-Links,ICL).目前已发现至少15种FA基因,其编码的蛋白参与特有的DNA修复途径-FA途径,任何FA基因突变或缺失均可导致发病,与此同时DNA链间交联修复可通过核苷酸切除修复、易错修复、跨损伤合成、无错修复、重组修复、错配修复多种途径完成.本文主要对FA途径以及FA途径对DNA链间交联修复的调控作用作一综述.
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载药聚乙烯醇/海藻酸钠静电纺丝纤维的改性及其药物体外释放研究
目的 将聚乙烯醇(PVA)/海藻酸钠(SA)静电纺丝纤维进行改性,制备具有良好性能且能缓慢释放药物的伤口敷料.方法 采用戊二醛蒸汽、3％氯化钙无水乙醇溶液和3％氯化钙饱和硼酸溶液对PVA/SA静电纺丝纤维进行交联后,以溶胀率为指标筛选出佳的交联剂.以3％氯化钙无水乙醇溶液为交联剂,分别制备了交联时间为1、3和20h的改性盐酸莫西沙星(MH)/PVA/SA静电纺丝纤维,然后将载药纤维于pH 7.4的PBS溶液中进行药物体外释放研究.结果 通过筛选得知3％氯化钙无水乙醇溶液为佳交联剂,其交联的纤维溶胀率为108％.在随后的MH/PVA/SA静电纺丝纤维药物体外释放实验中,我们发现随着交联时间的增长,药物释放越缓慢,在4h时,未交联和交联1、3和20h的累积释放率分别为66.63％、57.55％、40.90％和12.41％.结论 采用3％氯化钙无水乙醇溶液为交联剂改性的PVA/SA静电纺丝纤维耐水和溶胀性能良好,将更适合于用作难愈合且有渗出液伤口的敷料.
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亲水性交联剂处理牛颈静脉的理化特征
分别用4%的EX-313与0.5%的戊二醛处理牛颈静脉带瓣胶原管道,所获的材料分别进行外观、扫描电镜与光镜检查;另外进行大鼠皮下埋植试验,生物力学的测试,所获的数据进行t检验. EX-313处理后的材料比戊二醛处理者质地更接近天然血管, 结构间充满空隙,抗张强度与戊二醛处理者相当,抗钙化方面EX-313处理者明显优于戊二醛处理者.用亲水性交联剂EX-313处理的生物材料在抗钙化与顺应性方面比戊二醛更有优势,由其处理的牛颈静脉有可能成为较理想心脏修复材料.
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交联透明质酸钠凝胶中交联剂残留量的检测方法研究
目的 建立一种准确的检测交联透明质酸钠凝胶中交联剂1,4丁二醇二缩水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether,BDDE)残留量的方法,为产品的质量控制提供科学的检测方法.方法 采用气相色谱法考察BDDE的热稳定性,同时利用荧光分光光度法测定透明质酸钠凝胶中BDDE的残留量.通过分析荧光法检测BDDE残留量的影响因素(透明质酸酶及BDDE稳定性)改良荧光法.将透明质酸酶添加到BDDE标准溶液中,测定交联透明质酸钠凝胶中BDDE残留量.结果 传统荧光法检测示,BDDE残留量与荧光值呈线性相关性,线性方程为y=14.102x+1.103,R2=0.999 8.BDDE具有热不稳定性,随温度上升与时间延长均会发生分解.荧光法检测透明质酸酶和交联透明质酸钠凝胶酶解液均产生荧光值.经改良后的荧光法得到新的标准曲线,y=14.027x+7.062,R2=0.999 9.结论 荧光检测法是一种简便、快速、准确测定交联透明质酸钠凝胶中BDDE残留量的方法.由于BDDE具有热不稳定性,使用该方法时需严格控制各步骤温度,排除温度对检测结果的影响.同时采用传统荧光法检测凝胶中交联剂BDDE的残留量时需对凝胶进行酶解,而引入的透明质酸酶对检测结果存在较大影响,可将透明质酸酶添加到BDDE标准溶液中,以扣除其对检测结果的影响.
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不同交联剂对脱细胞牛心包膜生物材料改性的实验研究
目的 比较1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺[1-ethyl-3-(3-dinethylami-nopropyl)carbodimide,EDC]/N-羟基琥珀酸亚胺(N-hydroxysuccininide,NHS)和京尼平对脱细胞牛心包膜的交联效果,为选择佳交联剂提供依据.方法 取市售健康成年黄牛心包膜,采用高/低渗溶液法脱细胞,HE染色观察明确无细胞残留.将脱细胞牛心包膜分别采用EDC/NHS(EDC/NHS组)和京尼平(京尼平组)进行交联处理后,行扫描电镜、厚度、交联度、力学性能、变性温度测定和体外降解与细胞毒性实验,评价不同交联剂对脱细胞牛心包膜的改性效果.以单纯脱细胞牛心包膜(脱细胞组)、正常牛心包膜(空白对照组)作为对照.结果 扫描电镜观察示,两交联组胶原纤维呈相对规则的网状结构,孔径为10～20μm.与脱细胞组及空白对照组相比,两交联组牛心包膜厚度、变性温度均显著增加(P＜0.05),但两组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).两交联组交联度比较差异亦无统计学意义(t=o.205,P=0.218).各时间点两交联组降解率均显著低于空白对照组及脱细胞组(P＜0.05).两交联组弹性模量和断裂应力均较脱细胞组显著下降(P＜0.05),且接近空白对照组(P＞0.05),而断裂伸长率均较空白对照组和脱细胞组显著增加(P＜0.05);以上指标EDC/NHS组和京尼平组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).细胞培养3、5d时京尼平组细胞毒性均为1级,而EDC/NHS组5d时达2级.结论 京尼平交联脱细胞牛心包膜后生物性能优于EDC/NHS.
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新型交联方法在生物衍生材料中的应用进展
目的 综述新型交联方法在生物衍生材料中的应用与研究进展. 方法 查阅近年来国内外生物衍生材料交联方法的相关文献,并对其进行总结与分析. 结果 生物衍生材料的新型交联方法可划分为化学交联法、物理交联法和生物交联法三大类,其适用范围及交联性能因交联机制而异.因此,可根据材料的应用需要选择适宜的交联方法.一系列研究结果表明,交联后的生物衍生材料可有效应用于组织修复与重建. 结论 使用新型交联方法制备的生物衍生材料具有优良的生物相容性和组织修复能力、更理想的机械性能和降解性能等.这些方法为材料的交联改性提供更多选择,有助于得到更适用于临床的组织工程产品.
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京尼平作为交联剂在天然生物材料改性中的应用
目的 综述京尼平作为交联剂在天然生物材料改性中的应用及研究进展. 方法 查阅近年关于京尼平作为交联剂在天然生物材料改性中应用的相关文献,进行分析总结. 结果 天然交联剂京尼平交联效率高,细胞毒性显著低于传统人工合成的化学交联剂,交联后的生物制品稳定性强,抗酶解效果显著提高. 结论 京尼平有望替代人工合成的传统化学交联剂,为组织工程中天然生物材料的交联改性提供更好的选择.
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制备透明质酸衍生物交联剂的应用研究
目的综述近年来国内外有关制备透明质酸衍生物交联剂的研究,为研制开发新型透明质酸提供选择. 方法查阅国内外相关文献,对制备透明质酸衍生物交联剂的种类和特性、交联方法、交联机制进行综合分析. 结果利用各种交联剂对透明质酸进行修饰,所得到的透明质酸衍生物保留了透明质酸良好的生物相容性,且流变学特性发生了改变,使其在组织内的存留时间延长. 结论透明质酸衍生物的开发大大地拓展了透明质酸在医学领域的应用.
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交联剂加入量对SY-1型硅橡胶物理性能的影响
目的:确定固化SY-1型硅橡胶时交联剂的适加入量.方法:测试了交联剂5种不同加入量:0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%(与胶料的质量之比)时SY-1型硅橡胶的物理性能.结果:交联剂加入量为胶料的1%时固化后的硅橡胶其物理性能综合来看为好:扯断伸长率为(440±54)%,扯断强度为(4.3±0.28)MPa,撕裂强度为(18.2±3.1)kN/m,邵氏A硬度为(24±3.6)U;结论:在交联剂加入量与胶料的质量分数为ω=1%时,SY-1型硅橡胶可获得更好的物理性能.
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交联固化对明胶微球质量的影响
明胶微球以其原料易得、工艺简单、可生物降解、低毒等特点被广泛应用于抗肿瘤及其他药物研究中〔1〕。明胶微球主要缺点是在水性环境中溶解较快，采用交联固化手段可延缓药物的释放〔2〕。本文就交联固化对微球质量的影响作一综述。1 交联固化时间 一般认为，增加交联固化时间能增加微球的交联度。实验表明〔3〕，随着交联固化时间的增加(10min～7d)，氨茶碱实际载药量与其理论值的比率减小，微球产率由31.5%降至3.30%。交联固化时间对盐酸氯压定的载药量、产率无明显影响，可能是由于药物的理化性质不同，微球与交联剂亲合能力不同。
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荧光分光光度法测定交联透明质酸凝胶中交联剂的残留量
目的:建立测定交联透明质酸凝胶中交联剂1,4 -丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)残留量的方法.方法:利用BDDE与烟酰胺产生的强荧光物质,在λex=370 nm/λem=430 nm检测其荧光强度,建立测定BDDE残留量的荧光分光光度法,并与气相色谱法进行比较.结果:在0.5～8.0μg·mL-1范围内,BDDE浓度和荧光强度有良好的线性关系,回归方程为y=76.729x-2.9517,r2=0.998;定量限为0.53μg·mL-1；平均回收率为99.4％,RSD=2.5％；市售样品中BDDE平均残留量为(1.47±0.41) μg·mL-1.气相色谱法定量限为1.85 μg·mL-1,灵敏度和线性相关性均较差.结论:荧光分光光度法简单准确,灵敏度高,更适用于交联透明质酸凝胶的质量控制.
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改性明胶注射液近红外定性分析模型的建立
目的:建立准确快速地识别不同交联剂的改性明胶注射液以及不同厂家生产的琥珀酰明胶注射液的近红外定性分析模型.方法:以全国范围内不同企业生产的改性明胶注射液为分析对象,用光纤测定近红外漫反射光谱,结合OPUS软件建立近红外定性分析模型.结果:选择合适的谱段,采用一阶导数(或二阶导数)结合矢量归一化预处理方法,平滑点数选择9,分两层建立的定性分析模型,正确识别率为100％.结论:模型准确地区分不同交联剂的改性明胶注射液,可以用于监控厂家生产工艺,控制制剂的质量,适合药品现场快速筛查,有效的打击假劣药品.
