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牙周细胞在离子化胶原表面的黏附与生长
目的:评价离子化胶原对不同交联剂的作用及交联后对牙周细胞的黏附与生长的影响.方法:实验于2006-10/2007-01在四川大学生物材料工程研究中心实验室完成.①通过胶原蛋白与甲醇在低温反应得到化学修饰离子化胶原,将胶原海绵和离子化胶原海绵分别与戊二醛、碳化二亚胺,京尼平在室温条件下发生交联反应,控制交联剂的终质量分数为0.006,交联时间均为24 h.②通过测溶液中羟脯氨酸含量测交联产物的交联度;用胶原酶测交联产物体外降解时间:通过牙周细胞在交联产物上的生长情况(A70nm)确定交联产物对细胞的作用.结果:①吸液率和交联度:离子化胶原与各交联剂交联后吸液率都低于胶原交联后,交联度相应提高,胶原和离子化胶原与戊二醛交联其交联度高,分别为81%,85%.②降解率:离子化胶原的降解率总的趋势低于胶原样品,离子化胶原、胶原被炭化二亚胺交联后,其降解率分别为0.5%,45.0%.③牙周细胞生长情况:离子化胶原交联产物上牙周细胞A570nm值高于胶原交联产物.结论:离子化胶原在交联过程中显示了较好的抗生物降解性能,离子化胶原交联产物在牙周细胞培养过程中显示出了低的细胞毒性,提示其对牙周细胞黏附与生长具有促进作用,可以代替胶原应用于牙周组织治疗.
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常规钴60照射对胶原蛋白膜稳定性的影响
目的 探讨常规钴60(60Co)辐照灭菌方法 对胶原膜稳定性的影响.方法 牛肌腱胶原膜经常规60Co辐照灭菌,比较辐照前后胶原膜孔径的大小、溶胀度、收缩温度、抗酶解能力及动物体内降解等指标.结果 经医用60Co辐照后,胶原膜的孔径变大,膜的溶胀度增加,收缩温度降低,体外抗胶原酶及胰蛋白酶的酶解时间缩短,小鼠皮下埋置降解时间减少.结论 常规60Co辐照后,胶原膜的交联度下降,分子稳定性降低,其分子结构的降解程度与辐射剂量呈正相关.
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氨基免疫荧光探针在瓣膜交联度检测中的应用
目的：利用羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（CFSE）能与氨基基团发生特异性不可逆结合，且在波长为488 nm的激发光下发出绿色荧光的特性，检测人工心脏瓣膜的交联程度。方法将去细胞的牛心包浸泡于0．5％的戊二醛溶液中进行交联处理，根据浸泡时间不同分为空白对照组、10 min组、30 min组和6 h组。各组分别制成冰冻切片，经CFSE溶液处理后，通过荧光显微镜观察每组切片的荧光强度，采用图像分析软件计算每组图像的平均荧光强度。同时，从戊二醛处理过的牛心包中提取蛋白质，用聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE）检测各组牛心包的剩余蛋白含量，与氨基免疫荧光探针法进行比较。结果未交联的氨基数量随交联时间增加逐渐减少，荧光强度空白对照组＞10 min组＞30 min组＞6 h组，各组间差异有统计学意义（P＜0．01）。聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测结果显示，从空白对照组到6 h组可提取的蛋白越来越少。结论与蛋白电泳法检测生物瓣膜交联度相比，CFSE荧光免疫法更为直观灵敏，且能反映瓣膜组织任何部位、层厚的交联效果，为人工生物瓣膜交联度的检测提供新的理论依据和思路。
关键词： 人工生物瓣膜 交联度 羧基荧光素琥珀酰亚胺酯 免疫荧光探针 -
京尼平预处理对脱矿牙本质胶原机械性能的影响
目的：探讨生物交联剂京尼平预处理对脱矿牙本质机械性能的影响。方法：制备人新鲜离体牙本质片和牙本质粉，经100 g/L磷酸液脱矿5 h后，分别用含0．05、0．1、0．15 mg/mL京尼平的蒸馏水、乙醇、丙酮液进行预处理；然后采用茚三酮比色法检测牙本质粉中的胶原交联度；用万能测试机检测牙本质片试件的极限拉伸强度。结果：3种溶剂配制的京尼平预处理剂均能浓度依赖性地增加牙本质胶原的交联度（P＜0．05）；相同浓度条件下不同京尼平溶剂组的交联度相比，以乙醇溶剂组高，丙酮溶剂组次之，水溶剂组低（P＜0．05）；同时还能浓度依赖性地提高脱矿牙本质的极限拉伸强度（P＜0．05），但相同京尼平浓度各溶剂组的牙本质极限拉伸强度相比，均无显著性差异（P＞0．05）。结论：京尼平能够浓度依赖性地提高牙本质胶原的交联度及其极限拉伸强度，以乙醇作为溶剂时效果更佳。
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交联固化对明胶微球质量的影响
明胶微球以其原料易得、工艺简单、可生物降解、低毒等特点被广泛应用于抗肿瘤及其他药物研究中〔1〕。明胶微球主要缺点是在水性环境中溶解较快，采用交联固化手段可延缓药物的释放〔2〕。本文就交联固化对微球质量的影响作一综述。1 交联固化时间 一般认为，增加交联固化时间能增加微球的交联度。实验表明〔3〕，随着交联固化时间的增加(10min～7d)，氨茶碱实际载药量与其理论值的比率减小，微球产率由31.5%降至3.30%。交联固化时间对盐酸氯压定的载药量、产率无明显影响，可能是由于药物的理化性质不同，微球与交联剂亲合能力不同。
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吸收明胶海绵中明胶交联度的测定
目的:研究国产吸收性明胶海绵中明胶的交联程度,为进一步提高该产品质量和性能提供依据.方法:利用2,4,6-三硝基苯磺酸与肽链中赖氨酸侧链ε-氨基发生反应,生成在346nm波长处有大吸收峰的三硝基苯衍生物,测定明胶与甲醛发生交联前后明胶蛋白质肽链赖氨酸侧链ε-氨基数量的变化,就可推知吸收性明胶海绵中明胶的交联程度.结果:利用此方法测得国产吸收性明胶海绵样品中明胶的交联度约为60%.结论:该方法可测定吸收性明胶海绵中明胶的交联度.
