基于NOS信号的艳山姜挥发油对ox-LDL诱导HAECs损伤的保护作用

目的:研究艳山姜挥发油(EOFAZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的入主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用.方法:体外传代培养HAECs,EOFAZ保护作用研究分为7组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L-ox-LDL),EOFAZ高质量浓度组(200 mg·L-1ox-LDL+ 100 μg·L-EOFAZ),EOFAZ低质量浓度组(200 mg·L-1ox-LDL+ 10 μg·L-1EOFAZ),阿司匹林组(Asp,200 mg·L-1ox-LDL +2.5×10-4 mol·L-1Asp),卡维地洛组(Car,200 mg·L-1 ox-LDL+1×10-6 mol·L-1 Car),阿托伐他汀钙组(Atorv,200 mg·L-1ox-LDL+1×10-6 mol·L-1Atorv);一氧化氮合酶(NOS)信号研究分为5组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L-1 ox-LDL),EOFAZ组(200 mg·L-1 ox-LDL+ 100 μg·L-1EOFAZ),NOS抑制剂组(200 mg·L-1 ox-LDL+ 100 μmol·L-1 L-NAME或300 μmol ·L-1 L-NMMA),EOFAZ加NOS抑制剂组(200 mg·L-1 ox-LDL+100 μg·L-1EOFAZ+ 100 μmol·L-1L-NAME或300 μmol·L-L-NMMA).噻唑蓝(MTT)法分析细胞存活率,酶标仪法及Griess 试剂法分别检测培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(N0)含量.化学法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱 导型一氧化氮合酶(iNOS)活性.实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测iNOS及eNOS mRNA表达水平.结果:与模型组比较,EOFAZ明显提高ox-LDL诱导损伤的HAECs的细胞存活率,抑制LDH外漏及iNOS活力(P ＜0.05,P＜0.01),促进NO及eNOS的产生(P＜0.05,P＜0.01).Real-time PCR分析表明,EOFAZ以及相关抑制剂显著下调iNOS mRNA表达水平(P ＜0.05,P＜0.o1),上调eNOS mRNA表达水平(P＜0.05).结论:EOFAZ对ox-LDL诱导损伤的HAECs具有保护作用,其作用机制与调控eNOS和iNOS的表达水平有关.

艳山姜挥发油抑制JNK1/2/3磷酸化对ox-LDL诱导的HAECs损伤的影响

目的:研究艳山姜挥发油对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用,并分析可能的作用机制.方法:实验分为空白组(无血清内皮细胞培养基),模型组(200 mg·L-ox-LDL),艳山姜挥发油高剂量组(200mg·L-1ox-LDL+100 μg·L-1艳山姜挥发油)和低剂量组(200 mg·L-1ox-LDL+10 μg·L-1艳山姜挥发油)共4组.艳山姜挥发油预保护1h,继续加入ox-LDL共同作用24 h,采用噻唑盐(MTT)法分析细胞存活率,苏木精-伊红(HE)染色法进行形态学观察;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)外漏量,Western blot分析c-Jun氨基末端激酶(JNK)1/2/3,p-JNK1/2/3蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应分析JNK1/2/3 mRNA表达水平.结果:艳山姜挥发油能显著提高HAECs的存活率,改善细胞的病理损伤,减少LDH外漏量,抑制JNK1/2/3蛋白磷酸化,但对JNK1/2/3蛋白和mRNA水平无显著影响.结论:艳山姜挥发油改善ox-LDL诱导的HAECs损伤,其作用机制与抑制JNK1/2/3蛋白磷酸化相关.

丹参酚酸B镁对自由基损伤人主动脉内皮细胞的影响

目的研究丹参水溶性成分--丹参酚酸B镁对人主动脉内皮细胞生长增殖的影响和对自由基损伤内皮细胞的影响,以进一步了解丹参酚酸B镁的心血管药理作用机理.方法实验中使用第3～6代的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cell, HAEC),采用形态学和MTT法观察不同浓度药物对细胞增殖的影响;采用葡萄糖-葡萄糖氧化酶造成的氧自由基损伤细胞模型观察药物的作用;透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果丹参酚酸B镁1.0mg/ml和0.5mg/ml两个剂量对HACE有明显的细胞毒作用(P＜0.01).低于0.2mg/ml的浓度对细胞增殖无不良影响;丹参酚酸B镁对自由基损伤细胞有明显的保护作用.电镜结果显示其可以保护线粒体等细胞超微结构.结论丹参酚酸B镁对HAEC细胞毒性较低;对自由基损伤细胞有明显的保护作用.

米格列奈对内皮细胞一氧化氮合成及氧化应激的影响

目的 观察口服降糖药米格列奈对高糖环境下内皮细胞一氧化氮(NO)合成及氧化应激反应的影响.方法 成功培养及传代人主动脉内皮细胞(HAECs),分为对照组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度为30 mmol/L)、米格列奈组(30 mmol/L葡萄糖+10 μmol/L米格列奈).ELISA法测NO、上清液中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量；比色法分别检测6、12、24、48、72 h上清中超氧化物岐化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)的含量.结果 ①米格列奈组24 h NO含量为(232.7 1±8.78)μmol/L,较高糖组低(P＜0.05),随后逐渐升高,48 h和72 h含量[(263.48±6.32)、(270.91±6.03)μmol/L]较高糖组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).②干预24、48、72 h测米格列奈组eNOS的含量[(51.96±2.65)、(59.28±3.63)、(60.41±4.48) μmol/L]均较高糖组增高,差异有统计学意义(P＜0.05)；同步测iNOS含量[(53.28±3.45)、(62.09±3.71)、(59.90±3.60) μmol/L]与高糖组相比明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).③干预6、12、24、48、72 h测米格列奈组SOD活力[(3.99±0.46)、(5.70±0.14)、(4.98±0.37)、(3.18±0.25)、(3.35 ±0.51) U/mL]较高糖组高,差异有统计学意义(P＜0.05)；测MDA含量[(0.500±0.014)、(0.633±0.018)、(0.623 ±0.051)、(0.510±0.030)、(0.513±0.015) nmol/mL]较高糖组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 米格列奈能减少高糖环境中动脉内皮细胞iNOS的生成,增强eNOS的活性和表达,促进内皮细胞NO的产生,同时能减轻高糖引起的氧化应激损伤.

090从可可树种子中分离的五聚原花青素能选择性地抑制人主动脉内皮细胞中酪氨酸激酶Erb B2的表达

NLRP3炎症体参与末端糖基化产物诱导的人主动脉内皮细胞损伤

目的 观察NLRP3炎症体在末端糖基化产物(AGEs)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)细胞损伤中的作用.方法 制备AGEs并以不同浓度AGEs处理体外培养的HAECs,再以抗氧化剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)处理细胞.MTT法评估细胞活性;流式细胞术测定细胞内活性氧簇(ROS)生成水平;ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β水平;免疫印记法检测HAECs中NLRP3、ASC、caspase1 p20以及IL-1β 蛋白表达水平.结果 与正常对照相比,经不同浓度AGEs处理后的HAECs细胞活力显著下降(P<0.05);细胞内ROS生成水平显著增加(P<0.05);细胞内NLRP3、ASC、caspase-1 p20以及IL-1β蛋白表达水平显著升高(P<0.05);细胞培养上清液内IL-1β水平显著升高(P<0.05).上述变化均具有AGEs浓度依赖性(P<0.05).抗氧化剂NAC处理能够显著改善AGEs对细胞活力的抑制(P<0.05),抑制ROS产生(P<0.05),下调NL-RP3、ASC、caspase1 p20以及IL-1β蛋白表达(P<0.05),并减少培养上清液内IL-1β水平(P<0.05).结论 AGEs可能通过诱导HAECs内ROS产生激活NLRP3炎症体导致细胞损伤.

环氧化酶-2与单核-内皮细胞黏附性的相关研究

目的 探讨环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)表达水平同单核-内皮细胞黏附性的关系及其相关机制.方法 采用细胞计数法检测单核-内皮细胞的黏附性；实时荧光定量PCR检测内皮细胞COX-2 mRNA表达量；Western blot检测内皮细胞COX-2蛋白表达量；ELISA检测内皮细胞前列腺素E2 (Prostaglandin E2,PGE2)水平.结果 内皮细胞COX-2 mRNA及蛋白表达量在炎症因子TNF-α、IL-1β刺激后显著上调,并随时间变化(P＜0.05)；内皮细胞COX-2蛋白表达量增加与PGE2水平及单核-内皮细胞的黏附性成正相关；使用COX-2特异性抑制剂NS398预孵育后,内皮细胞PGE2表达水平降低(P＜0.05),单核-内皮细胞的黏附性受到显著抑制(P＜0.01).结论 内皮细胞COX-2 mRNA及蛋白表达量在炎症因子TNF-α、IL-1β刺激后明显上调,其表达增加后可能通过催化花生四烯酸代谢成PGE2,使单核-内皮细胞的黏附性增强,从而影响动脉粥样硬化性疾病的进程.

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人主动脉内皮细胞IL－10和MCP－1表达的影响

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖（LPS）对人主动脉内皮细胞白细胞介素（IL）－10和单核细胞趋化蛋白（MCP）－1表达的影响。方法用不同浓度（0、10、100、150 ng／ml）的牙龈卟啉单胞菌脂多糖分别作用于人主动脉内皮细胞。酶联免疫吸附法、聚合酶链反应检测 IL－10和MCP－1的表达。结果在一定浓度范围内，牙龈卟啉单胞菌LPS呈剂量依赖性促进人主动脉内皮细胞（ HAECs） MCP－1的表达，同时减低 IL－10的表达水平。结论牙龈卟啉单胞菌LPS可诱导人主动脉内皮细胞IL－10和MCP－1表达紊乱，从而促进动脉粥样硬化的发生。

光果甘草定对 ox-LDL损伤性人主动脉内皮细胞保护的机制研究

目的：探讨光果甘草定（Glabridin，GD）对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）损伤性的细胞中自噬（ autophagy ）的影响。方法：采用体外培养人主动脉内皮细胞（ HAVEC ），经不同浓度GD预处理或不预处理，再行ox-LDL干预作对比。 MTT法检测细胞活性、透射电镜观察细胞中自噬小体，免疫印迹检自噬相关蛋白Beclin1和LC3在不同组别中的表达。结果：随ox-LDL浓度的增加，细胞活性，细胞中自噬小体和Beclin1和LC3的表达比空白对照组明显增加（P＜0．05）。经GD预处理的HAVEC，细胞活性，自噬小体和Beclin1和LC3的表达比未经GD预处理细胞组明显降低（ P＜0．05）。结论：ox-LDL能浓度依赖性地诱导HAVEC自噬性死亡，GD通过部分抑制自噬相关因子，保护血管内皮细胞。

心水通胶囊水提物对缺氧损伤性人主动脉内皮细胞LDH、MDA和SOD的影响

目的:研究心水通胶囊水提物的细胞毒理学作用.方法:水煎煮法提取心水通胶囊中水溶性成分,不同浓度干预缺氧诱导的人主动脉内皮细胞,并与相同浓度梯度呋塞米组对照.采用MTT比色法、酶学方法以及病理形态学等方法,分别检测细胞活性、培养液中LDH、MDA和SOD含量以及细胞病理形态变化.结果:在0.5~1.5mg/mL浓度之间,心水通胶囊组比缺氧模型组细胞存活率增明显增高(P<0.05).在该浓度区间,细胞培养液中LDH和MDA活力降低,而SOD的活力增强,且该作用呈药物浓度依赖性;心水通胶囊组细胞形态正常,贴壁生长良好,未见明显细胞毒性作用.呋塞米组LDH和MDA活力随浓度而增高,而SOD活力和细胞活率降低,细胞毒性也增加.结论:心水通胶囊对缺氧诱导的细胞损伤具有一定保护作用,细胞毒性小.

晚期糖基化终产物诱导人主动脉内皮细胞氧化应激损伤及线粒体功能紊乱

目的:观察晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)对内皮细胞氧化应激水平和线粒体功能的影响,以探讨糖尿病血管内皮细胞功能障碍可能的发生机制.方法:以不同质量浓度(50,100 μg/mL)的AGE修饰的牛血清白蛋白(AGE-bovine serum albumin,AGE-BSA)作用于人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs) 48 h,CCK-8法测定HAECs的增殖能力,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,应用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平;JC-1法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),荧光素-荧光素酶法和Clark氧电极法测定细胞中ATP含量及细胞耗氧率.结果:AGE-BSA能显著性地抑制HAECs增殖,增加细胞内ROS水平,降低SOD活力,且高质量浓度作用更加明显.同时,AGE-BSA还能使MMP下降、ATP生成及耗氧减少.结论:AGE-BSA诱导HAECs产生氧化应激损伤,其机制与其造成线粒体功能紊乱相关.

FABP4对人主动脉内皮细胞分泌 MMP2的影响

目的：探究脂肪酸结合蛋白4（ FABP4）对人主动脉内皮细胞分泌基质金属蛋白酶2（ MMP2）的影响。方法：体外培养的人主动脉内皮细胞分别用转化生长因子-β（ TGF-β）及TGF-β加FABP4抑制剂HTS01037处理，检测处理前后内皮标志物CD31、VE-钙黏蛋白（ VE-Cad ）的mRNA表达，以及FABP4、MMP2的mRNA表达。结果：人主动脉内皮细胞用TGF-β处理后，内皮标志物CD31与VE-Cadherin mRNA表达升高，FABP4与MMP2的mRNA表达也升高（均P＜0.05）；用TGF-β加 HTS01037处理后，与单用TGF-β处理相比， CD31、VE-Cad及FABP4、MMP2的表达均降低（均P＜0.05）。结论：FABP4与TGF-β促进内皮细胞分泌MMP2的病理过程正相关。

人主动脉内皮细胞体外培养方法的建立及生物学活性鉴定

目的:建立体外人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)提取和培养的方法.方法:从术中取下的人主动脉组织上剥离内皮层,Ⅰ型胶原酶消化分离HAECs,利用显微镜观察其生长状况,免疫组织化学方法及流式细胞法鉴定及检测细胞纯度,以氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)检测细胞吞噬功能并检测细胞在体外的血管生成能力.结果:0.1％及0.2％的Ⅰ型胶原酶,佳消化时间均为50 min,2h贴壁细胞数分别(25.2±2.1)×103,(40.5±3.8)x103)个.细胞融合后在倒置显微镜下呈“鹅卵石”样排列生长.血小板-内皮黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)及Ⅷ因子鉴定为阳性,细胞纯度达(96.43±4.12)％.细胞内吞ox-LDL及血管生成能力较好.结论:钝性分离主动脉内皮层,辅以Ⅰ型胶原酶消化是一种较好的HAECs获取方法,酶浓度及消化时间是其重要的影响因素.

生长分化因子15对过氧化氢诱导的人主动脉内皮细胞凋亡的保护作用

目的 研究生长分化因子15(GDF-15)对过氧化氢(H2O2)诱导的人主动脉内皮细胞凋亡的保护作用及其可能的作用机制.方法 体外培养人主动脉内皮细胞,随机分为空白对照(A)组、H2O2损伤(B)组、低浓度GDF-15+H2O2 (C)组、高浓度GDF-15+ H2O2 (D)组、低浓度GDF-15+H2O2 +LY294002(E)组和高浓度GDF-15+ H2O2+ LY294002 (F)组.采用Hoechst3258染色、流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测磷酸化Akt(p-Akt)蛋白相对表达量.结果 B组细胞凋亡率高于A组(P＜0.05).与B组相比,C组、D组细胞凋亡率降低,p-Akt蛋白表达增加,并呈剂量依赖性(P＜0.05);而经LY294002预处理后,E组、F组细胞凋亡率增高,p-Akt蛋白表达减少(P＜0.05).结论 GDF-15可拮抗H2O2诱导的内皮细胞凋亡.其作用机制可能与上调p-Akt的表达有关.

米格列奈对人主动脉内皮细胞NO合成及NOS活力的影响

目的 观察米格列奈对高糖环境下人主动脉内皮细胞(HAECs)一氧化氮(NO)合成及一氧化氮合酶(NOS)活力的影响.方法 将培养的HAECs分为对照组(葡萄糖5.5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖30 mmol/L)和米格列奈组(葡萄糖30 mmol/L+米格列奈10μmol/L).ELISA法检测NO含量及裂解液中内皮型NOS(eNOS)及诱导型NOS(iNOS)的含量,RT-PCR和Western blot分别检测细胞中eNOS mRNA和蛋白的表达.结果 与对照组相比,高糖组24 h NO含量升高(P＜0.05),48、72 h含量降低(P＜0.05).与高糖组相比,米格列奈组24 h NO含量降低(P＜0.05),48、72h含量升高(P＜0.05).与高糖组相比,米格列奈组iNOS含量降低(P＜0.05),eNOS mRNA及蛋白表达升高(P＜0.05).结论 米格列奈能减少高糖环境中HAECs的iNOS生成,增强eNOS活性和表达,促进内皮细胞NO产生.

SIRT3 siRNA对ox-LDL刺激的人主动脉内皮细胞ICAM-1、E-selectin 表达的影响

目的：探讨SIRT3基因对氧化型低密度脂蛋白（ ox-LDL）刺激的人主动脉内皮细胞（ HAEC）炎性因子细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、E-选择素（E-selectin）表达的影响。方法将生长状态良好的细胞随机分为空白对照组、转染试剂对照组、阴性对照组及SIRT3 siRNA（1、2、3、4）组。筛选出佳序列后，细胞分为空白对照组、siRNA组、（20、30、40μg/mL）ox-LDL组、siRNA＋（20、30、40μg/mL）ox-LDL组。转染24 h、ox-LDL刺激6 h。 qRT-PCR检测SIRT3 mRNA水平，Western blotting检测SIRT3蛋白表达，流式细胞术检测E-selectin、ICAM-1抗体的平均荧光强度值（MFI）。结果 SIRT3 siRNA2序列在mRNA水平的干扰效率为88．62％，蛋白水平为80．37％，干扰效果明显。与空白对照组相比，ox-LDL各组的SIRT3 mRNA相对表达量差异有统计学意义（P均＜0．05）；随ox-LDL浓度增加，SIRT3 mRNA相对表达量逐渐降低（ P均＜0．05）。与siRNA组相比，siRNA＋ox-LDL各组ICAM-1、E-selectin的MFI差异有统计学意义（P均＜0．05）；随ox-LDL浓度增加，MFI逐渐升高（P均＜0．05）。与空白对照组相比，siRNA组ICAM-1、E-selectin的MFI无统计学差异（P均＞0．05）。结论 SIRT3基因与ox-LDL刺激的人主动脉内皮细胞ICAM-1、E-selectin表达升高相关，可能参与并调控动脉内皮细胞损伤的炎症反应。

阿司匹林对人主动脉血管内皮细胞炎性损伤的保护作用

目的:研究阿司匹林(aspirin,Asp)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人主动脉内皮细胞(human aortic endothe-lial cells,HAECs)损伤的保护作用,并进一步阐明其对一氧化氮合酶(NOS)及血管内皮生长因子(VEGF)及其相关受体信号的调控.方法:LPS建立HAECs损伤模型.苏木精-伊红(HE)染色观察细胞形态;MTT法、划痕实验分析HAECs损伤修复能力;ELISA测定一氧化氮(NO)含量;Western blot检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、VEGF和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)蛋白表达.结果:给药12 h后Asp明显改善LPS(5 mg·L-1)导致的细胞损伤、提高修复能力(P＜0.05),并上调NO分泌量及VEGF、VEGFR-2的蛋白表达(P＜0.01);升高eNOS蛋白的表达(P＜0.01).而给药24 h后阿司匹林显著下调LPS导致的NO分泌量及iNOS、VEGF、VEGFR-2的蛋白表达升高,同时升高eNOS蛋白的表达(P＜0.01).结论:阿司匹林对LPS诱导的血管内皮细胞炎性损伤的保护作用与调节NOS/NO和VEGF及其受体的动态平衡密切相关.

内质网应激蛋白CHOP-10在缺血缺氧诱导人主动脉内皮细胞损伤中的作用

目的 探讨人主动脉内皮细胞(HAEC)在缺血缺氧刺激下内质网应激(ERS)标志蛋白C/EBP同源蛋白10(CHOP-10)的表达变化及意义,并观察阿托伐他汀对上述过程的影响.方法 将传代培养的HAEC分为正常对照组、缺血缺氧组、缺血缺氧+ CHOP-10基因沉默组以及缺血缺氧+阿托伐他汀组(0.1 mol/L、1.0 moi/L、10.0mol/L),缺血缺氧+CHOP-1O基因沉默组采用CHOP-10 shRNA下调CHOP-10的基因表达;24h后采用RT-PCR法检测细胞中CHOP-10的基因表达,Western blot法检测CHOP-10、Caspase-3和Caspase-8的蛋白水平;采用ELISA法检测细胞培养液中白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度;采用CCK8法测定细胞增殖活力.结果 与正常对照组相比,HAEC在缺血缺氧损伤时CHOP-10表达明显升高(P＜0.01),细胞分泌炎性因子IL-6及TNF-α增加(P＜0.01),凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达增加(P＜0.01),细胞增殖活力明显下降(P＜0.01).阿托伐他汀能呈浓度依赖性地抑制HAEC CHOP-10表达,而缺血缺氧+CHOP-10基因沉默组或缺血缺氧+阿托伐他汀组,炎性介质IL-6、TNF-α的分泌也相应减少,细胞凋亡下降,增殖活力明显增加(P＜0.01).结论 缺血缺氧损伤可引起血管内皮细胞发生ERS及炎症反应,导致细胞增殖活力下降,凋亡增加,CHOP-10基因沉默或应用阿托伐他汀干预可减轻缺血缺氧时ERS及炎症反应而对血管内皮细胞产生保护作用.

AGEs 对人主动脉内皮细胞线粒体融合蛋白表达的影响

目的：明确晚期糖基化终产物（AGEs）是否可引起内皮细胞线粒体融合蛋白 Mfn1和 Mfn2表达水平的变化。方法： AGEs 用糖基化牛血清白蛋白（AGE－BSA）代替。将购买的原代人主动脉内皮细胞株进行体外扩增、传代、分组，进行 AGEs 干预，分为对照组，不同浓度梯度的 AGEs 干预组（50 mg／L、100 mg／L 和200 mg／L）和干预不同时间组（分别是100 mg／L 的 AGEs 干预人主动脉内皮细胞6 h、12 h、24 h 和48 h）。采用实时荧光定量 PCR方法对 AGEs 干预后的人主动脉内皮细胞 Mfn1和 Mfn2的 mRNA 表达水平进行检测；采用 Western blot 法对 AGEs干预后的人主动脉内皮细胞 Mfn1和 Mfn2的蛋白表达水平进行检测。结果：不同浓度 AGEs 干预人主动脉内皮细胞24 h 可引起 Mfn1和 Mfn2的 mRNA 和蛋白表达水平显著降低；100 mg／L AGEs 干预人主动脉内皮细胞6 h，Mfn1和 Mfn2的 mRNA 和蛋白表达水平与对照组相比无显著变化，而干预12 h、24 h 和48 h 均引起人主动脉内皮细胞Mfn1和 Mfn2的 mRNA 和蛋白表达水平显著降低。结论： AGEs 干预体外培养的人主动脉内皮细胞12 h 后其线粒体融合蛋白 Mfn1和 Mfn2的表达水平降低，提示 AGEs 可能引起内皮细胞线粒体动力学的改变，并可能通过这一途径引起内皮细胞线粒体功能异常，而导致内皮细胞的功能异常。

胞壁酰二肽对人主动脉内皮细胞炎症因子表达影响的研究

目的:观察胞壁酰二肽对人主动脉内皮细胞数种炎症因子表达的影响.方法:用胞壁酰二肽(MDP)按要求对人主动脉内皮细胞(HAECs)进行处理,运用实时定量RT-PCR以及RT-PCR测定IL-1β,IL-8,MCP-1,IFN-α与IFN-β基因的表达.用Western blot与RT-PCR方法研究MDP影响IFN-α,IFN-β表达的机制.结果:经MDP处理后,HAECs细胞中炎症因子IFN-α,IFN-β,IL-1β,IL-8和MCP-1的表达上调.结论:MDP可以通过上调HAECs细胞炎症因子的表达.