首页 > 文献资料
-
肠胃清对结肠癌肝转移裸鼠生存期及肿瘤组织铜转运相关蛋白表达的影响
目的:观察肠胃清对结肠癌肝转移裸小鼠生存期、肿瘤生长及对肿瘤组织铜转运相关蛋白表达的影响,探讨肠胃清对结直肠癌化疗增效的作用机制.方法:BALB/C裸小鼠,采用HCT116细胞建立裸小鼠结肠癌肝转移模型,随机分为模型组,肠胃清组、化疗组、肠胃清联合化疗组(联合组),每组20只,肠胃清组ig给予相应药物,ip生理盐水,化疗组ip奥沙利铂(L-OHP),5-氟尿嘧啶(5-FU),ig给予生理盐水,联合组ig给予肠胃清,ip L-OHP,5-FU,模型组ig和ip生理盐水,连续给药3周.观察肠胃清对荷瘤小鼠生存期及肿瘤生长的影响;利用免疫组化观察肿瘤组织人铜离子转运蛋白1(hCTR1),铜转运蛋白α链(ATP7A)和P型铜转运ATP酶(ATP7 B),多药耐药相关蛋白2(MRP2),谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)蛋白表达的影响;采用TUNEL法观察移植瘤组织细胞凋亡率.结果:与模型组比较,肠胃清组、化疗组、联合组抑瘤率分别为45.33％,70.51％,72.07％,以联合组明显(P＜0.01);肠胃清组、化疗组、联合组裸小鼠生存时间均长于模型组(P＜0.05);肠胃清组、联合组肿瘤组织中hCTR1的表达阳性率均高于模型组和化疗组(P＜0.05);肠胃清组、联合组ATP7A,ATP7B和GST-π的表达阳性率均低于模型组和化疗组(P＜0.05);肠胃清组、联合组的MRP2表达阳性率低于模型组(P＜0.05);联合组凋亡指数高于化疗组和模型组(P＜0.01).结论:肠胃清能上调肝转移瘤组织hCTR1的表达,下调ATP7A和ATP7B蛋白表达,降低GST-π和MRP2的表达,并有增加肿瘤组织内铂药物含量的趋势,同时能诱导细胞凋亡,增加肿瘤细胞凋亡率,从而提高化疗敏感性.
-
肠胃清药物血清协同奥沙利铂对人结肠癌耐药细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨肠胃清药物血清协同奥沙利铂(L-OHP)对HCT116/L-OHP细胞增殖及凋亡的影响.方法:采用MTT法检测L-OHP联合肠胃清药物血清对HCT116/L-OHP细胞的生长抑制情况,流式细胞仪碘化丙啶(PI)染色分析细胞周期分布及Annexin V-FITC试剂盒监测对HCT116/L-OHP凋亡的影响.结果:HCT116/L-OHP细胞对L-OHP的耐药指数为9.17倍,48 h L-OHP作用于HCT116和HCT116/L-OHP的IC50分别为(9.88 ±0.42),(85.81 ±2.76) mg·L-1,联用肠胃清药物血清后HCT116/L-OHP的IC50降至(35.2±2.8) mg·L-1,逆转指数为2.44倍(P＜0.05).联用前后细胞周期分别停滞在G1,G2期及G1期,其中G1,G2期各组间两两比较P＜0.001,S期组间除奥沙利铂组与奥沙利铂联用肠胃清组比较P＜0.05外,余P＜0.001.联用前后细胞凋亡率分别为(8.6±0.31)％,(23.73±2.36)％,各组间除空白组与奥沙利铂组比较P＜0.05外,余P ＜0.001.结论:肠胃清药物血清能有效地逆转人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT116/L-OHP对奥沙利铂的耐药,诱导HCT116/L-OHP凋亡,改变细胞周期分布.
-
中药复方肠胃清含药血清对胃癌SGC7901细胞凋亡的影响
目的 观察中药复方肠胃清含药血清对胃癌SGC7901 细胞凋亡的影响,探讨其作用机制.方法 将人胃癌SGC7901 细胞分为6 组:空白对照组及肠胃清药物血清低、中、高剂量组和5-氟尿嘧啶(5-FU)组、5-FU 联合肠胃清中剂量组.用MTT 法观察肠胃清药物血清对SGC7901 细胞增殖活性的影响;用流式细胞术检测肠胃清药物血清对细胞凋亡的影响;用Western blot 检测方法 测定细胞P53、Bax 与Bcl-2 蛋白表达水平;RT-PCR 方法 检测肿瘤细胞P53、Bax 及Bcl-2 基因表达.结果 肠胃清药物血清能抑制胃癌SGC7901 细胞增殖,并诱导细胞凋亡,同时明显抑制Bcl-2蛋白和基因的表达(P <0.05 或P <0.01),增强P53、Bax 蛋白和基因表达水平(P <0.05 或P <0.01).结论 中药复方肠胃清能抑制胃癌SGC7901 细胞增殖,并诱导细胞凋亡,其机制可能与促进P53、Bax 基因及抑制Bcl-2 基因蛋白表达有关.
-
肠胃清方对人结肠癌HCT116/L-OHP裸鼠皮下移植瘤miR-30a/Beclin1通路的影响
目的 本课题旨在分子生物学技术和中医基础理论指导下,从miRNAs与自噬相关联的角度,讨论miR-30a与自噬基因Beclin1在结肠癌化疗耐药中的相关性,并探讨肠胃清对miR-30a介导自噬的调控作用及逆转结肠癌耐药的分子机制.方法 建立人结肠癌耐奥沙利铂(L-OHP)细胞株HCT 116/L-OHP裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白组、L-OHP组、肠胃清方组、肠胃清方低剂量+L-OHP组、肠胃清方高剂量+L-OHP组.治疗结束后采用RT-PCR、免疫组织化学、Tunnel等研究肠胃清对瘤体组织中miR-30a、Beclinl、LC3的表达及细胞凋亡的影响.结果 奥沙利铂组可见Beclinl、LC3的上调,miR-30a的下调,细胞凋亡的减少.而肠胃清联用奥沙利铂组可见Beclinl、LC3的下调,miR-30a的上调,细胞凋亡的增加(P＜0.05或P＜0.01).结论 奥沙利铂诱导保护性自噬导致细胞凋亡减少可能是其耐药的机制.肠胃清可通过调控miR-30a/Beclinl通路而抑制自噬逆转结肠癌耐药.
-
肠胃清协同顺铂对人结肠癌耐药细胞增殖及凋亡的影响
目的 观察肠胃清协同顺铂(DDP)对HCT116/L-OHP增殖及凋亡的影响.方法 用MTT法、流式细胞仪检测肠胃清协同DDP对人结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP增殖及凋亡的影响.结果 HCT116/L-OHP对DDP的耐药指数为2.13倍,48 h DDP作用于HCT116和HCT116/L-OHP的IC50分别为(9.39±0.38),(21.05±1.61)mg·L-1;联用肠胃清后,作用于HCT116/L-OHP 的IC50降至(13.43±1.22)mg·L-1(P<0.05),逆转指数为1.57倍.联用前后细胞周期分别停滞在G2、S期及G1、S期,细胞凋亡率分别为(19.34±0.38)%,(54±1.77)%(P＜0.01).结论 肠胃清能逆转HCT116/L-OHP对DDP的耐药,诱导细胞凋亡,改变周期分布.
-
肠胃清联合奥沙利铂对人结肠癌耐药细胞株HCT116/L-OHP侵袭作用的影响
目的 研究中药复方肠胃清(CWQ)与奥沙利铂(L-OHP)联用对结肠癌奥沙利铂耐药细胞HCT116/L-OHP体外侵袭能力的影响.方法 体外培养人结肠癌奥沙利铂敏感细胞HCT116、耐药细胞株HCT116/L-OHP,MTT法观察细胞的增殖能力,根据IC50计算耐药指数(RF),检测肠胃清的逆转指数(RI).用Transwell实验观察耐药细胞侵袭能力改变情况,分5组:对照组、低高2个剂量奥沙利铂组、奥沙利铂低高2个剂量联合肠胃清提取物组.以免疫印迹技术检测侵袭转移相关蛋白的表达,细胞分4组:对照组,奥沙利铂组,肠胃清组,肠胃清联合奥沙利铂组,各组均作用细胞48 h.结果 人结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞株的稳定性良好,RF为10.49.肠胃清联合奥沙利铂可明显抑制HCT116/L-OHP耐药细胞增殖,逆转指数(RI)为4.46.奥沙利铂高剂量联合肠胃清提取物组的侵袭抑制率(48.34％)明显高于奥沙利铂高剂量组(19.83％),差异有统计学意义(P＜0.01).与奥沙利铂组的灰度值分别为1.14,0.96,0.26比较,联合组ADAM-17、MMP-2及MMP-9蛋白表达均显著下调,灰度值分别为0.53,0.68,0.05,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 肠胃清联合奥沙利铂能显著抑制HCT116/L-OHP耐药细胞的增殖和侵袭能力,其侵袭抑制作用与ADAM-17、MMP-2、MMP-9蛋白下调有关.
-
肠胃清逆转耐草酸铂结肠癌细胞的DNA损伤修复实验研究
目的:观察肠胃清药物血清联合化疗药物干预HCT116、HCT116/L-OHP细胞DNA损伤修复情况的影响,进一步探讨肠胃清增效的分子机理.方法:采用MTT法,观察肠胃清药物血清的增效作用:采用Western blot方法,从DNA损伤修复的两条通路,观察L-OHP、肠胃清药物血清对XRCC1、XRCC2、XPF、ERCC1蛋白的影响,比色测定法检测DNA损伤指标AP位点.结果:肠胃清药物血清可逆转HCT116/L-OHP多药耐药.HCT116/L-OHP中XRCC1、XRCC2、XPF、ERCC1的含量较HCT116均显著增多(p<0.05),AP位点表达较HCT116显著减少(p<0.05),HCT116经L-OHP、L-OHP+肠胃清药物血清联合作用后XRCC1、XRCC2、ERCC1蛋白含量均显著减少(p<0.05),AP位点表达均显著增加(p<0.05),HCT116/L-OHP中L-OHP联台肠胃清药物血清组与对照组相比XRCC2、XPF、ERCC1蛋白含呈有减少趋势.结论:结肠癌耐药细胞胞内的AP位点降低,进而增加细胞的修复能力,提高耐药性.L-OHP攻击结肠癌细胞,是通过降低BER、NER的能力,导致DNA损伤加重,干扰DNA复制,达到治疗目的.肠胃清药物血清能增加L-OHP的该项能力.
-
肠胃清抑制化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移的实验研究
目的 研究肠胃清对化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移的抑制作用并探讨其机制.方法 通过一次性腹腔注射大耐受剂量(MTD)奥沙利铂,3天后尾静脉注射结肠癌细胞CT26,建立化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移模型,24只BALB/c小鼠随机分为模型组、化疗诱导肺转移组(L-OHP)、肠胃清加化疗诱导肺转移组(CWQ+L-OHP).统计肺结节数目,苏木素-伊红染色(HE)检测肺组织内瘤灶,免疫组化检测肺转移瘤组织微血管密度(MVD);蛋白免疫印迹(Western blot)、实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测肺转移灶血管内皮生长因子(VEGF-A)、基质金属蛋白酶2/9(MMP2/9)蛋白和mRNA的表达.结果 与L-OHP组比较,CWQ+L-OHP组肺转移结节数目减少(P＜0.05)、肿瘤组织MVD值下降(P＜0.01),肺组织VEGF-A、MMP2、MMP9蛋白和mRNA的表达均下调(P＜0.01).结论 肠胃清能抑制化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移,与其下调肿瘤组织VEGF-A、MMP2、MMP9的表达,降低肿瘤组织MVD,减少肿瘤血管生成有关.
-
肠胃清对裸鼠人结肠癌皮下移植瘤DNA双链损伤及同源重组修复因子ATM、γH2AX的影响
目的 研究肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤DNA双链损伤及同源重组修复因子ATM、γH2AX的影响.方法 构建裸鼠人结肠癌细胞HCT116皮下移植瘤模型,分为空白组、L-OHP组、肠胃清组、肠胃清联合L-OHP组(联合组),分别采用NaCl溶液、L-OHP、肠胃清、肠胃清联合L-OHP干预.运用彗星扫尾实验检测DNA损伤程度,Western blot及免疫组化法检测同源重组修复因子ATM、γH2AX的表达.结果 与空白组比较,肠胃清组、L-OHP组和联合组均出现细胞拖尾现象,其中联合组细胞拖尾现象明显(P＜0.05).与空白组比较,L-OHP组和联合组DNA同源重组修复因子ATM、γH2AX蛋白表达明显上调(P＜0.05);与L-OHP组比较,联合组ATM、γH2AX蛋白表达明显下调(P＜0.05,P＜0.01).结论 肠胃清联合L-OHP组中DNA双链断裂损伤严重,提示肠胃清可增强L-OHP的疗效,其作用机制是减少结肠癌细胞对化疗损伤的同源重组修复作用.
-
肠胃清含药血清对人结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞凋亡作用的影响
目的 探讨中药复方肠胃清(CWQ)逆转入结肠癌HCT116/L-OHP细胞耐药的分子机制.方法 提取肠胃清含药血清,设置不同浓度,采用MTT法确定肠胃清的大无毒剂量和逆转指数(RI);采用彗星实验法检测肠胃清联合奥沙利铂(L-OHP)对耐药细胞DNA损伤的影响,流式细胞术观察肠胃清联合奥沙利铂(L-OHP)对耐药细胞凋亡的影响.结果 肠胃清含药血清可以逆转人结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞对L-OHP的耐药性,逆转指数(RI)为2.63倍.肠胃清联合L-OHP能促进耐药细胞发生DNA损伤(P＜0.001)及凋亡(P＜0.01).结论 肠胃清能够逆转人结肠癌铂类化疗耐药,其机制与促进肿瘤细胞DNA损伤、诱导凋亡有关.
-
肠胃清对结肠癌侵袭转移影响的实验研究
目的 探讨肠胃清(黄芪、党参、白术、猪苓、薏苡仁、八月札、野葡萄藤、红藤)对人体结肠癌LoVo细胞体内外侵袭转移的影响.方法 镜下观察肠胃清对结肠癌细胞形态的影响,Transwell、划痕实验观察肠胃清对结肠癌细胞侵袭转移的影响,构建裸鼠肺部转移模型,在体内观察肠胃清对结肠癌转移的作用.结果 肠胃清能改变LoVo细胞的形态,体内和体外均能抑制LoVo细胞的侵袭和转移并具有剂量依赖性,但效果略差于奥沙利铂,与奥沙利铂联合效果优于单用奥沙利铂.结论 肠胃清抗结肠癌分子机理应进一步作研究.
-
肠胃清逆转结肠癌HCT116/L-OHP细胞草酸铂耐药作用及对Pt-DNA加合物的影响
目的 探讨中药复方肠胃清(黄芪、白术、党参、猪苓、薏苡仁、八月札、野葡萄藤、红藤等)对结肠癌HCT116/L-OHP细胞草酸铂耐药的逆转作用及对Pt-DNA加合物的影响.方法 将HCT116/L-OHP细胞种植于裸小鼠皮下,建立肿瘤耐药模型,随机分为5组,A组为对照组,B组为草酸铂组,C组为肠胃清组,D组为草酸铂+肠胃清低剂量组,E组为草酸铂+肠胃清高剂量组,治疗前后测量移植瘤体积及荷瘤鼠体质量；采用细胞增殖抑制实验MTT法观察肠胃清药物血清对HCT116/L-OHP细胞株耐药性的逆转作用,并采用原子吸收分光光度法检测细胞内铂( Platinum,Pt)药物及核内Pt-DNA水平.结果 肠胃清联合草酸铂组与肠胃清或草酸铂单独用药组相比,有更高的肿瘤抑制率(P＜0.01),其中肠胃清高剂量联合草酸铂组抑瘤率高；与对照组相比,含肠胃清组荷瘤鼠体质量减轻好于单用草酸铂；MTT结果显示7.5％肠胃清药物血清能够增加耐药细胞株HCT116/L-OHP对草酸铂敏感性,逆转指数为2.74；肠胃清药物血清可以增加HCT116/L-OHP细胞内草酸铂水平,并能使细胞核内Pt-DNA加合物水平增加15.74％.结论 肠胃清能够逆转HCT116/L-OHP细胞对草酸铂的耐药性,其机制与肠胃清增加细胞内Pt-DNA加合物水平有关.
-
肠胃清对KB-A-1 细胞 P-糖蛋白ATP 酶活性及MDR1基因转录水平的影响
目的:探讨肠胃清(黄芪、党参、白术等)逆转肿瘤多药耐药的作用机制.方法:制作肠胃清药物血清,观察药物血清对多药耐药细胞KB-A-1 P-糖蛋白ATP酶活性及MDR1基因转录水平的影响.结果:肠胃清药物血清对P-gp的ATP酶活性具有抑制作用,并呈剂量依赖性;2.5%和5%药物血清对MDR1基因转录水平的抑制作用分别达到了58%和100%.结论:肠胃清逆转肿瘤耐药与其抑制P-gp的酶活性、降低MDR1mRNA表达有关.
-
肠胃清抗幽门螺杆菌感染的临床前瞻性研究
幽门螺杆菌(Hp)感染与各种慢性胃炎、消化性溃疡、胃MALT淋巴瘤及胃癌相关[1].目前虽已有许多治疗方法,但因根除率低、副反应多等原因,使抗菌治疗受到影响.肠胃清是我院自行研制的抗Hp中药制剂,本研究旨在检验其治疗Hp的临床效果.
-
肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤化疗的减毒作用
目的:研究肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤奥沙利铂(L-OHP)化疗的减毒作用.方法:构建裸鼠人结肠癌细胞HCT116皮下移植瘤模型.造模后裸鼠分为空白组、L-OHP组、肠胃清组、肠胃清联合L-OHP组(联合组),每组10只,分别用0.9％ NaCl溶液、L-OHP、肠胃清、肠胃清联合L-OHP干预30 d.观察各组裸鼠体质量的变化,检测裸鼠脾脏质量,计算脾脏指数;检测裸鼠肝功能[天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)],肾功能[尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)],心功能[肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)]的水平.结果:L-OHP组裸鼠体质量减轻18.1％,较空白组明显减轻(P＜0.01);与L-OHP组比较,肠胃清组及联合组裸鼠体质量下降减少,差异具有统计学意义(P＜0.05).各组血清AST、ALT、SCr、BUN水平差异无统计学意义(P＞0.05);L-OHP组CK、LDH水平较空白组明显升高(P＜0.05,P＜0.01);肠胃清组及联合组CK、LDH水平较L-OHP组明显降低,差异有统计学意义(P＜O.05,P＜0.01).L-OHP组脾脏指数较空白组明显降低(P＜0.01);与L-OHP组比较,肠胃清组及联合组裸鼠脾脏指数明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:L-OHP对裸鼠副作用较大,肠胃清联合L-OHP后可减轻L-OHP化疗的毒副作用.
-
肠胃清对人大肠癌细胞HCT8/V皮下移植瘤长春新碱耐药的逆转作用
目的:观察中药复方肠胃清口服液逆转大肠癌长春新碱耐药的作用,初步探讨其逆转耐药的作用机制.方法:建立人大肠癌耐长春新碱(VCR)细胞株HCT8/V裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为正常对照组、VCR组、肠胃清组、肠胃清高剂量+VCR组、肠胃清低剂量+VCR组.治疗结束后计算瘤体抑制率;高效液相色谱法检测瘤内VCR药物浓度;流式细胞技术检测瘤内细胞周期和凋亡改变.结果:肠胃清高低剂量联合VCR的瘤体抑制率为47.47%、69.62%,明显高于单用肠胃清或VCR组;对照组VCR的含量为0.1745μg/g瘤重,而肠胃清高剂量联合VCR组的浓度为12.2236μg/g瘤重,是对照组的70.05倍;与对照组比较,药物干预后,G1期细胞明显增加,S期细胞明显低于对照组,细胞凋亡率明显增加,以肠胃清联合VCR组作用强.结论:肠胃清逆转大肠癌移植瘤对VCR的耐药与通过增加瘤体内药物浓度、诱导细胞凋亡有关.
-
“微饿”养生益康寿
“微饿”养生理念，在祖国传统养生保健宝库中比比皆是。孙思邈《千金要方》：“安身之本，必资以食。”何良俊《四友斋丛说》：“食取补报，不饥即已，饱生众疾。”刘词《混俗颐生录》：“食不欲苦饱，苦饱即伤心，伤心则气短妨闷。”李豫亨《推篷寤语》：“饮食不可过多，饮食能抑塞阳气，不能上升，将以养生，实以残生也……淡餐少食，常使肠胃清虚，则神气固流，阴阳得位，此养生之大要。”
-
"肠胃清"对结肠癌皮下移植瘤奥沙利铂治疗的增敏作用及对肿瘤组织坏死凋亡的影响研究
目的:研究肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤奥沙利铂(L-OHP)治疗的增敏作用及对肿瘤组织坏死凋亡的影响.方法:构建裸鼠结肠癌细胞HCT-116皮下移植瘤模型,将造模成功的裸鼠随机分为模型组、L-OHP组、肠胃清组和肠胃清联合L-OHP组(联合组),分别给药或生理盐水3周后,观察各组裸鼠肿瘤体积,计算抑瘤率,苏木精-伊红染色法(HE)观察肿瘤组织病理形态学变化,DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL染色法)检测肿瘤组织细胞凋亡情况.结果:各给药组给药后瘤体体积明显小于模型组(P<0.01),联合组瘤体体积明显小于L-OHP组和肠胃清组(P<0.01).各组抑瘤率比较,联合组明显高于L-OHP组和肠胃清组(P<0.01).各给药组肿瘤组织坏死面积百分比和肿瘤细胞凋亡指数均高于模型组(P<0.01),联合组明显高于L-OHP组和肠胃清组(P<0.05或P<0.01).结论:肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤L-OHP治疗有增敏作用,并可促进肿瘤细胞坏死及凋亡.
-
"做微"养生健康长寿
"微饿"养生理念,在祖国传统养生保健宝库中比比皆是.孙思邈<千金要方>:"安身之本,必资以食."何良俊<四友斋丛说>:食取补报,不饥即已,饱生众疾."刘词<混俗颐生录>:"食不欲苦饱,苦饱即伤心,伤心则气短妨闷."李豫亨<推篷寤语>:"饮食不可过多,饮食能抑塞阳气,不能上升,将以养生,实以残生也……淡餐少食,常使肠胃清虚,则神气固流,阴阳得位,此养生之大要."
-
肠胃清对多药耐药人结肠癌裸鼠异位移植瘤的抑制作用及其细胞凋亡的影响
目的 观察肠胃清对裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法 采用HCT8/V细胞制作裸鼠皮下移植瘤,随机分为4组:生理盐水组(简称空白组)、长春新碱组(简称化疗组)、肠胃清组(简称中药组)、长春新碱联合肠胃清组(简称联合组),分别采用HE染色法和TUNEL法观察药物干预后多药耐药人结肠癌裸鼠移植瘤的病理改变及凋亡指数.结果 治疗组均能在一定程度上改变人结肠癌多药耐药裸鼠异位移植瘤的病理形态,肠胃清组凋亡指数高于化疗组,肠胃清联合化疗组凋亡指数高.结论 中药复方肠胃清能在一定程度上诱导结肠癌多药耐药细胞凋亡,并与化疗药具有协同作用.
